谭兰
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：石河子大学生命科学学院农业生物技术中心重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学更多>>
- 费尔干猪毛菜液泡膜氢离子焦磷酸酶基因SfVP的克隆、序列分析及表达被引量：3
- 2014年
- 植物液泡膜氢离子焦磷酸酶(Vacuolar H+-PPase,VP)能够酸化液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性方面发挥着着重要作用。本研究采用RT-PCR结合RACE方法,从费尔干猪毛菜中(Salsola ferganica)克隆得到液泡膜质子焦磷酸酶基因SfVP,该基因的cDNA全长2738 bp,包含1个2301 bp的完整开放读码框(ORF),编码766个氨基酸的多肽。氨基酸序列分析表明其属于H+-转运无机焦磷酸酶超家族成员,具有典型的H+-PPase结构域,其疏水性较强,含有12个跨膜螺旋结构。SfVP序列比对显示具有H+-PPase的3个保守序列CS1、CS2和CS3,其中CS1中含有保守的底物催化位点,与烟草的NtVP氨基酸序列相似性为95.3%。半定量RT-PCR结果表明,SfVP的转录表达丰度随着600 mmol/L NaCl处理时间的增加而升高,处理12 h后显著增加并一直维持在较高水平。
- 贺怡钱雯婕袁磊李榕谭兰谢全亮李鸿彬
- 关键词：RACE
- 棉花磷脂酶C基因的克隆及参与油脂代谢的功能分析被引量：1
- 2015年
- 以陆地棉胚珠和纤维为实验材料,利用RT-PCR技术克隆得到磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)基因(GhPLC,GenBank登录号:KR154219),将棉花磷脂酶C基因转化拟南芥,分析其在油脂代谢过程中的重要作用。测序鉴定显示,GhPLC基因的全长开放读码框为1 524bp,编码包含508个氨基酸的蛋白质,理论分子量约为55kD。序列比对分析显示,GhPLC属于典型的碱性磷酸酶超家族的磷脂酶。利用pET32a-GhPLC原核表达获得分子量约为55kD左右的重组蛋白GhPLC;酶活力分析显示,重组GhPLC蛋白具有较高的将卵磷脂(PC)催化为二酰甘油(DAG)的酶活力。半定量RT-PCR结果表明,GhPLC基因参与棉花种子和纤维发育过程。构建植物过量表达载体35S∷GhPLC并转化哥伦比亚野生型拟南芥,转基因拟南芥中GhPLC基因的表达和PLC酶活力显著提高,且转基因拟南芥种子的油脂含量提高了5.3%。
- 梁卓谭兰袁哈利谢全亮王斐李鸿彬
- 关键词：棉花磷脂酶C油脂含量拟南芥
- 陆地棉GhPLDα基因的克隆、序列分析及表达
- 2014年
- 【目的】棉花磷脂酶D(GhPLDα)基因的克隆、序列功能结构域分析及表达。【方法】以陆地棉胚珠和纤维为材料提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到PLDα基因的cDNA片段,将其构建到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行体外诱导表达,通过SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,利用分光光度法检测酶活性,采取RT-PCR方法检测基因表达。【结果】从发育的棉花胚珠和纤维混合材料中克隆得到的磷脂酶基因的开放读码框为2 421 bp,编码包含807个氨基酸的蛋白质,分子量约为88 kDa。通过同源序列比对和功能结构域分析,GhPLDα具有典型的磷脂酶D家族(HKD)结构域,同时还存在蛋白激酶C结构域2(C2结构域)。构建了pET28a-GhPLDα原核表达载体;获得分子量约为88 kDa左右的重组蛋白GhPLDα。半定量RT-PCR结果表明GhPLDα基因可能参与棉花胚珠与纤维发育过程。【结论】GhPLDα基因的克隆、序列分析和表达为进一步研究棉花GhPLDα基因在胚珠和纤维发育中过程的功能奠定了基础。
- 谭兰李榕袁哈利贺怡梁卓谢全亮李鸿彬
- 关键词：棉花
- 一个棉花微管结合蛋白基因GhSP1L5的克隆及表达分析
- 2014年
- 利用RT-PCR技术从处于快速伸长发育时期的棉花纤维组织中克隆得到Spiral1-Like(SP1L5)基因(GhSP1L5),其开放读码框为315 bp,编码105个氨基酸的蛋白质,生物信息学分析表明,GhSP1L5蛋白N端和C端较为保守,并含有SCOP结构域,是典型的微管结合蛋白。进化树分析表明该基因与SP1L5家族基因的亲缘关系较近。构建原核表达载体pET28a-GhSP1L5,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行体外诱导表达,通过SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,获得分子质量约为12 kD的重组蛋白。QRTPCR结果分析表明GhSP1L5基因在开花后15和20 dpa的纤维组织中表达量较高,在棉纤维发育的其他时期及根、茎、叶组织中表达量较低。
- 李榕寇伟谭兰贺怡梁卓李鸿彬
- 关键词：棉花纤维微管结合蛋白
- 《分子生物学》课程教学改革与实践被引量：1
- 2013年
- 分子生物学是生命科学领域中发展最为快速的学科。分子生物学课程是高等院校生命科学类开设的骨干课程；对于培养生命科学领域高素质的创新人才具有重要作用。然而，当前分子生物学的课程教学却远滞后于学科的发展．从提高分子生物学课程的教学质量和培养生命科学领域创新人才角度出发．开展课程教学改革势在必行。本着“以人为本”的理念．该文从教学内容方面对分子生物学课程教学内容进行了改革与探索。在教学内容改革方面．注重教学内容与学科前沿发展相一致,完善课程内容的衔接，注重教学内容在科学研究实际中的应用,强化实践教学的实效性。这些教学改革的实施将有利于课程教学质量的提高和学生创新能力的培养。
- 李鸿彬谭兰王斐任雪艳
- 关键词：分子生物学教学内容以人为本
