臧维苹
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
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- 紫外线B照射与直线加速器照射对淋巴细胞增殖分化功能及血小板聚集功能影响的比较研究
- 臧维苹
- 重组人血小板生成素基因在COS-7细胞及在小鼠体内的转移与表达
- 2001年
- 为了观察重组血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)基因在COS 7细胞及在小鼠体内的表达 ,应用DNA重组技术构建了含TPO基因的真核表达质粒 pcd2 TPO ,用脂质体法将其转染COS 7细胞 ,用裸质粒DNA直接注射加电脉冲的方法将 pcd2 TPO质粒转移到小鼠骨骼肌中。用RT PCR及ELISA法检测到TPO基因在COS 7细胞的瞬时表达 ,MTT法显示其有刺激TPO依赖细胞系增殖的活性。RT PCR及免疫组织化学染色可检测到TPO基因在转基因小鼠骨骼肌的表达 ,ELISA法定量检测转基因组小鼠血清TPO浓度为 (1185± 2 64)ng L ,明显高于正常小鼠的TPO浓度 (2 5 0± 76)ng L。本实验实现了TPO基因在小鼠体内和COS 7细胞的转移 。
- 臧维苹魏旭东伏爽王申五汤健王德炳
- 关键词：血小板生成素COS-7细胞基因转移基因表达
- 血小板生成素基因治疗的初步研究
- 该实验应用DNA重组技术,构建了含人TPOcDNA的真核细胞高效表达质粒pcDI/TPO,藉脂质体将其转染COS-7细胞,间接免疫荧光实验、RT-PCR、WesternBlot可检测到TPO基因在COS-7细胞的表达,M...
- 臧维苹
- 关键词：血小板生成素COS-7细胞基因表达血小板
- 电脉冲介导的Tpo基因转移对正常及实验性血小板减少小鼠的促血小板生成作用
- 2001年
- 目的 应用电脉冲介导的重组人血小板生成素 (rhTpo)基因的体内转移 ,探讨其对正常及实验性血小板减少小鼠的促血小板生成作用。方法 应用基因重组技术 ,构建真核细胞高表达质粒pcDI Tpo ,将 2 0 0 μgpcDI Tpo质粒注入正常及实验性血小板减少小鼠的股四头肌内 ,随后给予 10 0V、1Hz、40ms电刺激 6次 ,用RT PCR及Westernblot方法观察rhTpo基因在正常小鼠骨骼肌内的表达 ,ELISA法测定小鼠血浆Tpo水平。用细胞计数板计数小鼠外周血血小板。结果 成功构建了真核细胞高表达质粒pcDI Tpo。将pcDI Tpo转染小鼠后 ,在小鼠的骨骼肌内有rhTpomRNA及蛋白的表达 ,血浆Tpo水平由 (2 5 0± 76 )ng L升高至 (1185± 2 6 4)ng L。正常小鼠的外周血血小板由 (2 5 9± 2 7)× 10 9 L最高升高至 (6 40± 31)× 10 9 L ;注射卡铂后 ,转pcDI Tpo组小鼠的血小板最低下降至 (138± 2 4)× 10 9 L ,比转pcDI空载体组 [(98± 19)× 10 9 L]和单纯注射卡铂组 [(92± 16 )× 10 9 L]最低值高 ,同时血小板恢复时间提前 ,第 14天已恢复至 (2 38± 2 6 )× 10 9 L。结论 应用电脉冲介导的基因转移方法 ,可使rhTpo基因在小鼠骨骼肌内有效地表达 。
- 臧维苹魏旭东王申五王德炳
- 关键词：血小板减少基因表达
