童雪影 作品数:8 被引量:18 H指数:3 供职机构: 湖北中医药大学 更多>> 发文基金: 武汉市科技攻关计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
骨桥蛋白在实验性腹主动脉瘤中的变化及意义 被引量:2 2012年 目的建造大鼠腹主动脉瘤模型,观察骨桥蛋白(OPN)在实验性腹主动脉瘤中的表达情况,探讨OPN在腹主动脉瘤发病中的意义。方法采用酶灌注法建造大鼠腹主动脉瘤模型,两周后取材并测量大鼠手术后腹主动脉的直径;苏木精-伊红(HE)染色检测主动脉的结构改变及炎性细胞浸润程度;特殊染色检测主动脉中层弹力蛋白变化情况;免疫组织化学技术、蛋白免疫印迹法(Western Blot)法检测动脉组织中OPN的表达量。结果成功建造大鼠腹主动脉瘤模型;腹主动脉瘤组的术后主动脉直径扩张率(220.3%)明显高于对照组(112.3%)和未处理组;HE染色结果显示腹主动脉瘤组中层弹力蛋白明显减少,炎性细胞浸润程度显著增高;免疫组织化学结果显示OPN在腹主动脉瘤组、对照组组及正常组中的表达分别为7.500×1011±9.233×1011、3.073×105±2.581×105、2.037×105±1.866×105(F=6.595,P<0.01);Western Blot法显示OPN在上述3组中的表达分别为2.777×105±2.817×105、4.524×103±1.357×103、2.110×103±1.985×103(F=9.489,P<0.01)。结论 OPN表达量的增加可能加速实验性腹主动脉瘤的发生发展。 童雪影 周洪莲 武亚丽 聂斌关键词:主动脉瘤 骨桥蛋白质 组织学技术 整合素β_3在大鼠腹主动脉瘤中的表达及意义 被引量:1 2013年 目的观察整合素β3在大鼠腹主动脉瘤模型中的表达情况,探讨其在腹主动脉瘤发病中的意义。方法弹力蛋白酶灌注法构建大鼠腹主动脉瘤模型并测量腹主动脉直径,计算直径扩张度;HE染色观察主动脉病理改变;免疫组织化学技术和实时定量PCR技术分别从蛋白水平和基因水平检测主动脉组织中整合素β3的相对表达量。结果腹主动脉瘤组主动脉扩张度明显高于生理盐水组和正常组(3.689±0.443比1.175±0.159和1),差异有统计学意义(P<0.05);HE染色腹主动脉瘤组主动脉结构紊乱并有炎症细胞浸润;免疫组织化学结果显示整合素β3在腹主动脉瘤组、生理盐水组和正常组中的表达分别为0.33±0.07、0.20±0.06和0.19±0.07(P<0.05);整合素β3mRNA在以上三组的相对表达量为36.23±5.65、1.14±0.30和1,差异有统计学意义(P<0.05)。结论整合素β3的高表达可能参与腹主动脉瘤的发生发展。 武亚丽 周洪莲 郑红波 童雪影关键词:腹主动脉瘤 整合素Β3 动物模型 骨桥蛋白及NF-κB的表达与大鼠腹主动脉瘤发生的相关性 目的构建大鼠腹主动脉瘤模型并观察大鼠腹主动脉瘤中骨桥蛋白(OPN)、核因子-κB(NF-κB)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达情况,从而探讨大鼠腹主动脉瘤发生的分子机制。
方法酶灌注法构建大鼠腹主动脉瘤模... 童雪影关键词:腹主动脉瘤 骨桥蛋白 NF-ΚB MMP-2 文献传递 Mfn2基因突变体诱导大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡 被引量:2 2011年 目的:探讨线粒体融合素2(Mfn2)基因蛋白激酶A(PKA)磷酸化位点突变对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,感染组分别以携带全长Mfn2基因的重组腺病毒(Adv-Mfn2)、携带不同Mfn2基因PKA磷酸化位点突变体的重组腺病毒(Adv-Mfn2-S442A,Adv-Mfn2-S442D)和仅含有半乳糖苷酶基因的对照腺病毒(Adv-LacZ)感染损伤的颈总动脉段,以注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为未感染对照组,同时以假手术组作为正常对照组,分别于术后5 d、14 d取材,应用免疫组化检测外源基因的表达,原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,苏木精-伊红染色行组织形态学分析。结果:术后5 d,免疫组化证实Adv-Mfn2、Adv-Mfn2-S442A、Adv-Mfn2-S442D 3组Mfn2蛋白表达水平明显增加,TUNEL染色显示Adv-Mfn2、Adv-Mfn2-S442A组凋亡细胞数较对照组、Adv-LacZ组和Adv-Mfn2-S442D组明显增加(P<0.01);与Adv-Mfn2组相比,Adv-Mfn2-S442A组凋亡细胞数更多(P<0.01)。术后14 d,苏木精-伊红染色显示Adv-Mfn2组、Adv-Mfn2-S442A组内膜/中膜面积比明显低于对照组、Adv-LacZ组和Adv-Mfn2-S442D组(P<0.01);且Adv-Mfn2-S442A组内膜/中膜面积比值较Adv-Mfn2组更低(P<0.01)。结论:高表达Mfn2基因可促进大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞凋亡,且Mfn2-S442A促凋亡作用更强,而Mfn2-S442D无此作用。 廖华 曾经纬 张远恒 王新夺 童雪影 陈光慧 郭小梅关键词:颈动脉疾病 基因突变 凋亡 球囊损伤 大鼠腹主动脉瘤发生与骨桥蛋白及核因子-κB表达的关系 被引量:6 2012年 目的构建大鼠腹主动脉瘤模型并观察大鼠腹主动脉瘤中骨桥蛋白(OPN)及核因子-κB(NF-κB)的表达,探讨大鼠腹主动脉瘤发生的分子机制。方法将30只大鼠分为3组,每组10只,用酶灌注法灌注30min构建大鼠腹主动脉瘤模型;测量动脉直径;苏木素-伊红(HE)染色及特殊染色检测主动脉的结构改变及炎性细胞浸润;免疫组织化学技术、Westernblot法检测动脉组织中OPN、NF-κB及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果成功构建大鼠腹主动脉瘤模型;腹主动脉瘤组术后直径扩张率明显高于对照组(P〈0.01),并且中层弹力蛋白明显减少,炎性细胞浸润程度显著增高;免疫组织化学结果显示OPN、NF-κB及MMP-2在腹主动脉瘤组中的表达均明显增加(P〈0.05)。Westernblot结果同样显示OPN、NF-κB及MMP-2在腹主动脉瘤组中的表达均明显增加(P〈0.01),OPN、NF-KB及MMP-2呈正相关。结论在大鼠腹主动脉瘤模型中,OPN可能通过NF-κB途径上调MMP-2的表达,进而加速细胞外基质的降解,最终导致主动脉瘤的发生发展。 童雪影 周洪莲 武亚丽 聂斌关键词:腹主动脉瘤 骨桥蛋白 核因子-ΚB 基质金属蛋白酶-2 大鼠心室肌缝隙连接蛋白增龄性变化对心律失常发生率的影响 被引量:1 2011年 目的研究大鼠心室肌缝隙连接蛋白(Cx43)增龄性改变及增龄导致室性心律失常发生率增高的原因。方法随机取3~6月龄(幼年组)、9~12月龄(青年组)、18~21月龄(中年组)及24~26月龄(老年组)F344健康雄性大鼠,通过监测其肢体导联心电图,记录其心律失常发生情况。各组心室肌分别用苏木素伊红、马森三色复合染色,运用冰冻切片免疫荧光染色结合激光扫描共聚焦成像技术,免疫印迹技术检测总Cx43(Total—Cx43)及去磷酸化Cx43(NP—Cx43)分布及量的改变。结果老年组16只大鼠心律失常发生率为75%(12只),高于其他3组(均P〈O.05),其心室肌细胞肥大,排列稀疏、错乱,结缔组织增生。Total—Cx43表达量随增龄依次减少,各组与幼年组比较,差异有统计学意义(P〈0.05),且细胞分布由端端整齐排列渐趋杂乱。中年组大鼠NP—Cx43表达较幼年及老年组明显减低(P〈0.05)。结论老年组大鼠易发室性心律失常可能与其心室肌重构,细胞及其端端缝隙连接蛋白排列紊乱,Total—Cx43表达量降低,NP—Cx43表达量增加有关。 王杏芬 张存泰 徐仁德 阮磊 全小庆 操明 童雪影 杨艺关键词:心室 连接蛋白类 心律失常 骨桥蛋白的增龄性变化对骨质疏松症的影响 被引量:3 2015年 目的研究骨桥蛋白在青年、中年、健康老年人及存在骨质疏松老年人中血清中含量改变,探讨其增龄性变化及在骨质疏松患者中的作用。方法随机单盲法收集太和医院干部病房健康青年、中年、无骨质疏松组老年人及存在骨质疏松老年人血清标本各20份(各组均以骨密度测定结果作为入组标准),收集所有标本电解质(主要为钙、磷值)、骨密度值,并进行Westernblot法检测其中所有标本中骨桥蛋白的表达。结果青中年组电解质中钙、磷值均正常范围,老年组两组中钙、磷值波动较大,有正常范围亦有明显偏低者,与骨密度值无明显相关性。在Westernblot实验中,骨桥蛋白在健康老年组和患病老年组中呈阳性表达,而在青中年组呈阴性,具有明显统计学意义(P<0.05);骨桥蛋白在老年组和骨质疏松老年组之间的表达亦存在统计学差异(P<0.05)。结论老年组较青中年组中骨桥蛋白量明显增高,提示骨桥蛋白存在增龄性变化。骨桥蛋白含量在骨质疏松老年患者中明显增高,提示骨桥蛋白在人体老化后含量增高,并对骨质代谢造成影响,进而存在某种正向反馈机制,进一步加重骨质疏松症进展。 童雪影 唐祖胜 陈敏 潘庆敏关键词:增龄 骨桥蛋白 骨质疏松 改良大鼠腹主动脉瘤模型的建立 被引量:3 2014年 目的研究一种简便、稳定、可靠的构建大鼠腹主动脉瘤模型的方法。方法选用SD雄性大鼠50只,随机分为弹力蛋白酶(Elastase)组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组、生理盐水组、正常组,每组10只。五组大鼠分别于术中进行不同处理,术后14 d观察各组大鼠的存活率,计算腹主动脉的直径扩张率,取腹主动脉组织进行HE染色,维多利亚蓝弹力纤维染色以及平滑肌凋亡实验。结果 Elastase组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组、生理盐水组、正常组大鼠的术后存活率分别为:80%,100%,70%,100%,100%;腹主动脉的直径扩张率分别为:220.3%,100%,220.3%,112.3%,100%;HE染色:Elastase组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组的各层结构分界不明显,动脉壁破坏明显,其中CaCl2组和CaCl2+Elastase组炎症细胞浸润增多;维多利亚蓝弹力纤维染色:Elastase组和CaCl2+Elastase组主动脉壁结构紊乱,中膜弹力纤维减少或消失,胶原纤维增多。平滑肌凋亡实验:Elastase组和CaCl2+Elastase组中凋亡小粒明显增多。结论注入20 U Elastase并用浸润有CaCl2溶液的纱布包绕腹主动脉所制作的大鼠腹主动脉瘤模型,较为符合人腹主动脉瘤的病理改变。 武亚丽 童雪影 郑红波 周洪莲关键词:腹主动脉瘤 动物模型