潘明洁
- 作品数：27 被引量：27H指数：3
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省南京市医学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 丙型肝炎病毒C端截短21个氨基酸的NS5B蛋白的克隆、表达及鉴定
- 丙型肝炎病毒(HCV)属黄病毒科,是一单股正链RNA病毒,全长约9.6kb,包含一个开放阅读框,可以编码一个约3000个氨基酸的病毒前体蛋白。此蛋白在宿主信号肽酶和病毒编码的蛋白酶的作用下裂解产生病毒结构蛋白和不同的酶,...
- 杨华凤潘明洁吕敏李越希
- 关键词：丙型肝炎病毒氨基酸抗病毒药
- 文献传递
- 人促卵泡生成素基因序列的改构及在CHo细胞内的表达
- 背景：目前国内使用的FSH药物主要是进口的重组人FSH或者是天然人FSH,国产重组人FSH尚未研制成功。目的：构建稳定表达人FSH的CHO细胞株。方法：依据人促卵泡生成素的α亚基和β亚基的蛋白序列,优化设计并化学合成易于...
- 李越希潘明洁李素芹潘英
- 关键词：基因序列真核表达生物药
- 人神经生长因子CHO表达系统的构建
- 神经生长因子(NGF)具有神经营养、神经保护和促神经生长的作用。它控制神经细胞的分化和神经回路的分布。对非神经系统也有作用,被认为是非神经元组织在生理应激条件下的一种炎症介质。可以调节免疫细胞的活性,抑制某些肿瘤的有丝分...
- 戚菁潘明洁李越希
- STAT4基因多态性与乙型肝炎病毒感染相关性肝细胞癌易感性的关系被引量：2
- 2016年
- 目的分析信号传导与转录激活因子4（STAT4）基因多态性与中国人群肝细胞癌（HCC）易感性的关系。方法 154例乙型肝炎病毒（HBV）感染相关HCC为肝癌组,135例性别及年龄匹配的HBs Ag阳性患者为非肝癌组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法（PCR-RFLP）,检测STAT4 rs7574865位点的基因型,并经测序分析验证。Logistic回归分析比较不同基因型与HCC易感风险的关系。结果 STAT4 rs7574865位点3种基因型TT、GT、和GG型在肝癌组的分布频率分别是5.8%（9/154）、37.0%（57/154）和57.1%（88/154）,在非肝癌组分别是8.9%（12/135）、43.7%（59/135）和47.4%（64/135）。各基因型在两组间差异无统计学意义（P〉0.05）;以TT基因型作参照,携带rs7574865 GG型的个体HCC患病风险差异无统计学意义（OR=1.833,95%CI=0.729~4.611,P=0.221）。结论STAT4 rs7574865多态性位点可能与中国人群HBV感染相关HCC易感性无明显相关性。
- 潘明洁刘懿周乙华
- 关键词：乙型肝炎病毒单核苷酸多态性
- 石墨烯对氧化应激引起的毛细胞损伤的保护作用研究被引量：2
- 2021年
- 目的通过建立由H2O2诱导的HEI-OC1细胞氧化应激模型,验证石墨烯对氧化应激后毛细胞的保护作用,并探究石墨烯减轻毛细胞氧化应激损伤的可能机制。方法我们将二维石墨烯材料(2D-G)作为实验组,TC玻片(TCPs)作为对照组。首先用不同浓度的H2O2处理接种于两种材料上的HEI-OC1细胞,分别作用4h和12h后,通过CCK-8法检测两组细胞存活率的差异,与此同时,通过免疫荧光法(通过观察myosin7a抗体,即毛细胞特异性抗体的染色情况)观察两组细胞的存活情况。接下来我们利用DCFH-DA和Mito-sox两种荧光探针分别测定细胞内和线粒体内ROS(活性氧)水平,运用流式分析法和免疫荧光法对氧化应激后的两组细胞内ROS水平的变化进行了直接和间接的检测。随后,我们通过TUNNEL法检测发生氧化应激后两组细胞凋亡水平的差异。结果石墨烯能够显著提高短期/较长时间氧化应激后耳蜗毛细胞系HEI-OC1细胞的存活率;石墨烯能够显著降低氧化应激后HEI-OC1细胞内及线粒体内的ROS水平;石墨烯能够显著降低氧化应激后HEI-OC1细胞的凋亡水平。结论石墨烯能够显著降低氧化应激后耳蜗类毛细胞系HEI-OC1胞质及线粒体内的ROS水平,从而抑制凋亡现象,对氧化应激引起的耳蜗毛细胞损伤具有一定的保护作用。
- 董健菲陆玲林川耀刘勇周函朱成文潘明洁唐明亮高下
- 关键词：石墨烯氧化应激毛细胞损伤
- 丙型肝炎病毒C端截短21个氨基酸NS5B蛋白的克隆、表达及鉴定被引量：1
- 2008年
- 构建HCV C端截短21个氨基酸的NS5B(HCV NS5B-C21)的重组原核表达质粒,并获得HCVNS5B-C21蛋白,为以其为靶位的抗HCV药物筛选等创造条件。利用PCR技术扩增HCVNS5B-C21基因,BamHⅠ和XhoⅠ双酶酶切后连接到经同样酶酶切的原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,获得阳性重组质粒pET-28a(+)-NS5B-C21,IPTG诱导表达,亲和层析法纯化目的蛋白表达产物经SDS-PAGE进行鉴定。成功构建了HCV NS5B蛋白表达载体pET-28a(+)-NS5B-C21,经诱导明显表达出6His-NS5B-C21,截短形式的6His-NS5B-C21表达产物的可溶性明显增加。HCV NS5B-C21蛋白在体外得到了有效表达,表达的蛋白主要存在于上清液中,纯化获得了NS5B-C21蛋白,为抗HCV药物筛选等奠定基础。
- 杨华凤潘明洁吕敏李越希
- 关键词：丙型肝炎病毒克隆
- 单纯疱疹病毒1型糖蛋白B胞外区基因片段的克隆、表达及初步鉴定被引量：1
- 2008年
- 构建单纯疱疹病毒1型糖蛋白B（HSV1gB）胞外区基因片段的重组原核表达质粒，并获得HSV1gB胞外区基因的表达。选用真核和原核细胞均偏爱的密码子，化学合成含信号肽序列的HSV1gB蛋白胞外区基因序列，用PCR方法扩增编码HSV1gB胞外区1～696aa的基因，利用DNA重组技术将其定向插入到原核表达载体pGEX4T-2上，转化大肠杆菌TG1菌株，经IPTG诱导表达及SDS-PAGE鉴定分析。SDS-PAGE检测显示，表达的HSV1gB／GST融合蛋白分子质量为96ku。利用亲和层析方法，纯化获得了表达的目的蛋白。ELISA结果表明表达产物具有较好的抗原性和特异性。可溶性重组HSV1gB蛋白的表达成功为单纯疱疹病毒亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 吕敏潘明洁杨华凤李越希
- 关键词：单纯疱疹病毒克隆
- 合并2型糖尿病的乙型肝炎病毒感染者和普通感染者肝细胞损害和病毒学标志比较被引量：6
- 2020年
- 目的 比较合并2型糖尿病的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染患者和普通HBV感染者肝细胞损害发生率和病毒复制水平.方法 纳入54例合并2型糖尿病的HBV感染患者(病例组),58例非糖尿病的HBV感染患者(对照组),统计分析两组患者丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)异常率以及HBV DNA水平的差异.结果 病例组和对照组患者性别构成比相似,病例组年龄(58.7±12.6岁)高于对照组(41.6±12.6岁),差异有统计学意义(P=0.000).病例组和对照组患者ALT异常率分别为9.3%和27.6% (P=0.013),ALT升高的中位值分别为62U/L和60U/L(P=0.934);两组AST异常率分别为9.3%和17.2% (P =0.215),AST升高的中位值分别为48U/L和65U/L(P=0.221).两组HBeAg阳性率分别为5.6%和8.6% (P =0.793).病例组HBV DNA水平为3.65±1.12lgIU/ml,高于对照组的3.01±1.81lg IU/ml(P=0.028).两组ALT和AST升高患者丙型肝炎抗体和戊型肝炎IgM抗体均为阴性.结论 与普通HBV感染者比较,合并糖尿病的HBV感染者病毒水平较高,而肝细胞损害发生率较低,提示糖尿病患者对病毒清除能力较弱.
- 程艳冬董晨杨东辉潘明洁许碧云毕艳朱大龙周乙华
- 关键词：乙型肝炎病毒病毒复制肝功能异常
- 重组人巨细胞病毒多价抗原及检测试剂的研制
- 李越希郭四新郁兴明王忠灿陶开华谭维国李法卿潘明洁潘英
- 人巨细胞病毒(HCMV)感染人体危害严重，可致胎儿畸形、器官移植失败、艾滋病患者死亡等。早期诊断是防治HCMV感染的重要手段，建立HCMV IgM抗体检测试剂，应用血清学方法进行早期诊断，对优生优育和防止器官移植的失败具...
- 关键词：
- 关键词：检测试剂人巨细胞病毒重组抗原
- 人神经生长因子在哺乳细胞CHO内的表达及鉴定
- 通过构建人神经生长因子的几种不同真核表达载体，并增加一些转录及翻译调控元件、更换信号肽序列，比较人神经生长因子的表达水平，从中选择适合高表达人NGF的真核载体。将构建的三种重组质粒pMD902-β-NGF，pcDNA3....
- 李越希戚菁李素芹李琳潘明洁
- 关键词：人神经生长因子基因克隆真核表达生物活性
