李素芹
- 作品数：56 被引量：119H指数：6
- 供职机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项江苏省社会发展科技计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 乙型肝炎表面抗原124aa分子在大肠杆菌中的高效表达被引量：4
- 1999年
- 利用聚合酶链反应特异性扩增编码乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）羧基末端１２４个氨基酸的基因片段，并将其在大肠杆菌中获得了高效表达。表达产物氨基末端有１个含６组氨酸肽段的２０氨基酸融合部分，分子量１６１７８Ｄａ，以包含体形式存在，约占细菌总蛋白的２２％。以ＨｉＴｒａｐ亲和层析纯化，纯度可达９５％以上。分别用抗ＨＢｓＡｇ多克隆抗体和抗ＨＢｓＡｇａ单克隆抗体进行ＥＬＩＳＡ检测表明，该蛋白具有ＨＢｓＡｇ反应原性。
- 房德兴李法卿谭维国陈华标金慧英李素芹
- 关键词：乙型肝炎表面抗原大肠杆菌HBSAG
- 急性镉中毒的肝脏损伤机制及金属硫蛋白的保护作用被引量：43
- 1998年
- 目的研究脂质过氧化和自由基在急性镉中毒性肝脏损伤中的作用及金属硫蛋白（ＭＴ）的保护作用。方法测定镉染毒后不同时间大鼠肝脏的ＭＴ和脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）的含量及抗氧化酶的活力，观察肝细胞超微结构的损伤，进行自由基（Ｈ２Ｏ２）的定位。结果大鼠急性染镉后ＭＤＡ高于对照组（Ｐ＜０．０５）；抗氧化酶活力在３小时显著受抑（Ｐ＜０．０５），６小时明显恢复；ＭＴ在３小时即有增加，６小时达正常组的６．７倍；肝细胞膜上Ｈ２Ｏ２的阳性沉积物３小时最严重，２４小时已消失，但此时细胞损伤最严重，４８小时肝细胞再生、修复。结论镉可引起肝脏脂质过氧化及自由基的大量产生，抑制抗氧化酶的活力，造成细胞的严重损伤。ＭＴ对肝脏抗氧化酶活力的恢复、脂质过氧化的减轻、自由基的清除及损伤的肝细胞的保护可能有重要作用。
- 金慧英胡惠民周雍周雍李法卿李素芹谭维国
- 关键词：急性镉中毒金属硫蛋白肝脏损伤
- 甲型肝炎病毒血症及体外增殖的实验研究
- 2003年
- 采用PCR、病毒分离及免疫电镜等技术,以甲型肝炎密切接触者及现症病人为研究对象,研究HAV感染机体后的病毒血症,病毒在血液系统中的消长动态及在人血白细胞和单核巨噬细胞中体外增殖和定位,探讨其与致病机理的关系。结果:机体感染HAV后,从病人血清中直接分离出HAV,外周血白细胞HAV抗原阳性,且在潜伏期中病毒即已侵犯外周血白细胞,抗-HAV-IgM阳性血清中有HAV RNA;并证实HAV可在体外培养的人血单个核细胞及单核巨噬细胞中增殖并传代。
- 李法卿金慧英房德兴谭维国李素芹陈华标
- 关键词：甲型肝炎病毒白细胞病毒血症体外增殖
- 耐药基因及病原体高通量检测技术研究
- 李越希李丙军潘英李素芹金慧英陈乐如周婷婷傅雅丽
- 所属科学技术领域：本项目属于传染病医学检验和基因芯片技术领域。目的、意义：病原菌引起的传染病发病率在所有疾病中占据首位。新发传染病耐药病原菌不断出现；抗生素滥用产生了多重耐药及超级耐药菌；基因工程及合成生物学技术，可将耐...
- 关键词：
- 关键词：耐药基因病原体检测
- 人促卵泡生成素基因序列的改构及在CHo细胞内的表达
- 背景：目前国内使用的FSH药物主要是进口的重组人FSH或者是天然人FSH,国产重组人FSH尚未研制成功。目的：构建稳定表达人FSH的CHO细胞株。方法：依据人促卵泡生成素的α亚基和β亚基的蛋白序列,优化设计并化学合成易于...
- 李越希潘明洁李素芹潘英
- 关键词：基因序列真核表达生物药
- 碱处理法在人神经生长因子注射液制备中的应用被引量：1
- 2006年
- 目的进一步提高人神经生长因子(hNGF)注射液的安全性,寻找碱处理灭活制品中可能存在脂包膜和非脂包膜病毒的最佳工艺。方法在hNGF注射液中间品中加入脂包膜和非脂包膜病毒,通过调整其pH值、蛋白质浓度等参数后,在25℃下的不同时间,监测其灭活病毒效果。结果在pH(12.0±0.1)、(25±1)℃条件下存放2h,可有效灭活加入的脂包膜和非脂包膜病毒,且其他相关指标也达到要求。结论碱处理法是同时灭活生物制品中脂包膜和非脂包膜病毒的1种经济、有效的方法。
- 李法卿李素芹金慧英谭维国李越希
- 关键词：碱处理病毒灭活
- 金黄色葡萄球菌外膜蛋白FnBPA表达及单克隆抗体的制备
- <正>目的:金黄色葡萄球菌(又称金葡菌)是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,它寄生于人类皮肤和鼻粘膜表面,占医院感染和社区获得性感染的大部分。金葡菌也是引起食物中毒的重要因素。目前对金葡菌的检测方法有传统...
- 许桂丽蔡冉周洁张素芬袁敬宇尚彦红徐悦玥马颖周婷婷潘英李素芹李越希
- 文献传递
- 单纯疱疹病毒Ⅱ型gC2蛋白在CHO细胞中的表达、纯化及其免疫活性被引量：1
- 2014年
- 目的在CHO细胞中表达单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)Ⅱ型gC2蛋白,纯化后检测其免疫活性。方法利用ANTHEWIN等软件分析GenBank中HSVⅡ型gC2的氨基酸序列,筛选抗原表位富集、且亲水性较好的蛋白胞外区片段,选择真核和原核生物均偏爱的密码子,通过OptimumGene软件对基因进行序列优化,化学合成全新的基因序列HSV2-gC2,PCR扩增后,插入pMCE5载体,构建重组表达质粒pMCE5-gC2,转染至CHO细胞中进行真核表达。表达的重组gC2蛋白经亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。将纯化的重组gC2蛋白分别于第0、2、4周经腹腔免疫小鼠,以免疫PBS作为对照,采用间接ELISA法检测免疫小鼠的血清抗体水平;酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测免疫小鼠脾淋巴细胞分泌IFNγ(代表Th1细胞因子)和IL-4(代表Th2细胞因子)的细胞频率。结果重组表达质粒pMCE5-gC2经菌落PCR、双酶切(EcoRⅠ/NotⅠ)及测序证实构建正确;纯化的重组gC2蛋白相对分子质量约为90 000,纯度约为85%,浓度为40μg/ml,可与小鼠抗His单克隆抗体特异性结合;通过3次免疫,小鼠产生了高水平的血清抗体,与免疫前相比,差异均有统计学意义(P<0.001);免疫小鼠脾细胞经特异性抗原刺激后,分泌IFNγ和IL-4的细胞频率分别为(13.46±2.832)/106和(19.2±2.48)/106个细胞,均显著高于对照组(P<0.001)。结论在CHO细胞中表达了重组gC2蛋白,纯化的蛋白能够激发小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答,为进一步研制HSV亚单位疫苗奠定了基础。
- 周洁蔡冉徐悦玥潘英李素芹尚彦红许桂丽袁敬宇马颖张素芬李越希
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞免疫活性
- 重组人组织因子的表达纯化及复性研究
- 2016年
- 利用基因工程技术表达重组人组织因子(Human tissue factor,h TF),并进行纯化及复性研究。构建插入目的基因的p ET28a(+)-h TF重组质粒,转化到大肠杆菌中,获得重组菌,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)诱导其表达,菌体经超声裂解、离心收集包涵体,用8 mol/L尿素溶解包涵体、Ni-NTA纯化,采用透析复性和柱上复性两种方式获得复性的重组人HTF。柱上复性和透析复性均获得具有生物活性的重组人h TF,但柱上复性的复性率为72%,明显高于透析复性的复性率16%。成功构建高表达人重组h TF的工程菌,通过柱上复性获得高纯度具有生物活性的重组人h TF蛋白,为h TF的研究奠定了基础。
- 徐艺菲李佳萌齐永陈红霞潘英李素芹李素梅陈晨王新国张玉彬李越希
- 关键词：纯化复性
- 牛嗜肝DNA病毒的研究——利用RIA和ELISA在牛奶中检出HBsAg相关抗原被引量：1
- 1998年
- 分别利用人乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）放射免疫测定（ＲＩＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对某奶牛场４０份牛奶样本进行了测定，结果在样本低稀释时有５份呈现阳性或可疑。肯定了我国牛群中存在新的嗜肝ＤＮＡ病毒种。牛奶中的ＨＢｓＡｇ相关性抗原与人ＨＢｓＡｇ的交叉反应性较低，这同其它哺乳动物嗜肝ＤＮＡ病毒与人乙型肝炎病毒的低同源性相一致。
- 房德兴李法卿谭伟国陈华标李素芹金慧英
- 关键词：DNA病毒乳牛牛奶
