温雅
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
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- 骨髓基质细胞条件培养液调节神经干细胞分化有效成分的蛋白质微阵列分析被引量：9
- 2008年
- 目的检测骨髓基质细胞条件培养液(N-CM)中诱导神经干细胞(NSCs)向神经元方向分化的细胞因子,探讨骨髓基质细胞(BMSCs)调节NSCs分化的机制。方法将收集到的N-CM混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,用这两部分培养液分别培养NSCs,确定其中能促进NSCs分化为高比例神经元的部分并进行大鼠蛋白质微阵列检测。结果N-CM分子量大于5kD的部分可以促进NSCs分化为高比例神经元,并通过蛋白质微阵列检测,与单纯骨髓基质培养液相比,有7种细胞因子的表达量上调了1.5倍,分别是CINC-3、CNTF、IFN-γ、IL-1α、MCP-1、TIMP-1和VEGF。结论BMSCs分泌的可溶性分子对NSCs分化为神经元有促进作用,其中某些分子量大于5KD的细胞因子可能在这一调节作用中发挥效应。
- 顾平马芹颖王彦永温雅王铭维崔冬生刘力耿媛
- 关键词：神经干细胞骨髓基质细胞条件培养液蛋白质微阵列超滤浓缩
- 骨髓基质细胞条件培养液通过p38信号转导通路诱导中脑神经干细胞分化被引量：2
- 2007年
- 目的:骨髓基质细胞条件培养液能够诱导中脑神经干细胞分化为高比例神经元,但具体机制尚不十分清楚。选择p38信号转导通路作为观察切入点,剖析其在诱导分化途径中所扮演的角色。方法:实验于2006-04/2007-03在河北省脑老化与认知神经科学实验室完成。①实验方法:将SD大鼠麻醉后处死,分离股骨和胫骨,冲洗骨髓腔,将洗出的细胞悬液离心,悬浮后接种,培养48h后弃去未贴壁细胞,更换新的培养基,6d左右可进行传代,约铺满85%瓶底后弃去培养液,更换为含2%B27的Neurobasal培养液,24h后经过离心的上清液即为骨髓基质细胞条件培养液。取新生SD大鼠中脑,机械分散成单细胞后离心弃上清,加入培养液分散过滤,接种时加入含2%B27的DMEM/F12培养基和20μg/L碱性成纤维细胞生长因子,7d左右的单个神经干细胞便可增殖形成球体。将第2～3代神经干细胞球种植于预先包被多聚赖氨酸的培养皿中,贴壁后更换培养液。设立对照组和抑制剂组,均加入骨髓基质细胞条件培养液,此外抑制剂组还加入p38信号转导通路抑制剂SB203580至终浓度4μmol/L。②实验评估:第7天进行免疫细胞化学染色,检测表达微管相关蛋白2的神经元与表达胶质原纤维酸性蛋白的星形胶质细胞在分化细胞中所占的比例。结果:①神经干细胞分化过程中的形态学变化及p38信号转导通路抑制剂的影响:加入抑制剂后24h,光镜下可见神经干细胞长出的细胞有两种类型:一类细胞体积较小,边缘整齐,立体感强,周围有光晕并在两极有突起,免疫荧光染色显示这类细胞微管相关蛋白2呈阳性表达,即为神经元;另一类细胞突起较粗大,不规则,多聚集在神经干细胞球的中央,呈放射状排列,免疫荧光染色表明这类细胞为胶质原纤维酸性蛋白阳性的星形胶质细胞。②神经元及星形胶质细胞在分化细胞中所占的比例:p38信号转导通路抑制剂作�
- 顾平温雅马芹颖王彦永崔冬生王铭维
- 关键词：转导干细胞细胞分化
- 骨髓基质细胞条件培养液诱导神经干细胞分化的信号转导机制被引量：3
- 2009年
- 研究MAPK信号转导通路在骨髓基质细胞条件培养液诱导神经干细胞分化中的作用及机制。用骨髓基质细胞条件培养液培养神经干细胞,并在培养体系中加入MAPK信号转导通路抑制剂PD98059(ERK1/2通路抑制剂)、SB203580(p38通路抑制剂)和genistin(JNK通路抑制剂),7天后经免疫荧光染色鉴定其后代中神经元和星形胶质细胞的比例,并将骨髓基质细胞条件培养液进行蛋白质微阵列检测。结果发现与对照组相比,PD98059和SB203580组神经干细胞分化为神经元比例降低,而星形胶质细胞比例增高,蛋白质微阵列测检发现骨髓基质细胞条件培养液中含有IL-4、IL-6、LIX和TNF-α4种细胞因子。研究结果显示骨髓基质细胞分泌的IL-4、IL-6、LIX和TNF-α4种细胞因子可能通过ERK1/2和p38信号转导通路调节神经干细胞的分化。
- 马芹颖温雅顾平王彦永王铭维崔冬生刘力
- 关键词：MAPK信号转导通路神经干细胞骨髓基质细胞
- ERK1/2信号转导通路对骨髓基质细胞条件培养液诱导大鼠中脑神经干细胞分化作用的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨ERK1/2信号转导通路在骨髓基质细胞条件培养液(BMSCs-CM)诱导大鼠中脑神经干细胞(NSCs)分化中的作用。方法:将神经干细胞球种植干预先包被多聚赖氨酸的35 mm的培养皿中.神经干细胞球约30 min后贴壁.自然分化组将培养液换为含2%B27的neurobasal培养液,对照组换为BMSCs-CM.抑制剂组将培养液换为含有信号转导通路抑制剂PD98059(5μmol/L)的BMSCs-CM.7 d后采用免疫荧光染色方法观察NSCs后代细胞中神经元和星形胶质细胞的数量比例与形态差别。结果:用成年大鼠BMSCs-CM体外培养新生大鼠中脑NSCs.自然分化组NSCs分化的神经元为(15.7±10.3)%[低干对照组的(51.17±10.30)%.P<0.05],星形胶质细胞为(66.9±14.8)%[明显高于对照组的(23.26±5.60)%.P<0.05]。而抑制剂组神经元所占比例为(39.48±7.29)%[明显低于对照组.P<0.01].星形胶质细胞的比例为(31.01±8.96)%[明显高干对照组,P<0.01]。结论:BMSCs-CM可以提高神经干细胞分化为神经元的比例.并且同时降低了其分化为星形胶质细胞的比例,这两种作用很可能是通过ERK1/2信号转导通路实现的。
- 顾平王彦永马芹颖温雅崔冬生刘力王铭维张振清
- 关键词：骨髓基质细胞条件培养液神经干细胞
- 骨髓基质细胞分泌蛋白的蛋白质质谱分析被引量：1
- 2010年
- 目的通过Shotgun蛋白质组学分析,初步检测骨髓基质细胞(BMSCs)条件液中可能含有的蛋白质。方法将BMSCs条件液混匀后经超滤浓缩分为大于5kD和小于5kD两部分,并培养神经干细胞(NSCs),观察其后代中神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的比例,鉴定出能调节NSCs分化的部分,并进行Shotgun蛋白质组学分析。结果BMSCs条件液分子量大于5kD的部分可以调节NSCs向神经元和少突胶质细胞方向分化,这部分条件液先经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)发现大部分蛋白集中在14kD以上,将蛋白条带酶解以后,经Shotgun分析共鉴定到456种蛋白质,其中154个相似蛋白质,17个假想蛋白质,56个未知蛋白质,剩余的229个蛋白质中大多为细胞骨架蛋白、分泌蛋白、信号转导蛋白、酶类和转运蛋白等。结论BMSCs分泌的多种蛋白质对NSCs的分化起调节作用,明确了BMSCs条件液中可能含有的成分。
- 马芹颖顾平王彦永王铭维崔冬生温雅刘力
- 关键词：骨髓基质细胞神经干细胞
- 骨髓基质细胞条件培养液诱导神经干细胞分化的信号转导机制研究
- 目的：神经干细胞(NSCs)是具有分化为神经元细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞的能力，可自我更新并提供脑组织细胞的干细胞。NSCs的出现为临床治疗神经退行性疾病以及神经系统损伤带来了新的希望。但无论是体外还是体内研究的结...
- 温雅
- 关键词：骨髓基质细胞神经干细胞细胞分化信号转导神经退行性疾病神经系统损伤
- 文献传递
- 旋覆花内酯通过调制miR-155介导的炎症反应对缺血性脑组织发挥保护作用
- ABL在脑缺血中的抗炎作用是否是通过调制miR-155表达而实现的，目前仍不清楚。本研究将分三部分对上述问题进行探讨，现将各部分内容概述如下: 第一部分 旋覆花内酯对小鼠脑缺血诱发的炎症反应的影响 目的:观察ABL在...
- 温雅
- 关键词：脑缺血炎症反应
- 文献传递
