杨宛莹
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军第九七医院更多>>
- 发文基金：南京军区医学科技创新课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 光动力疗法联合瘤体输注树突状细胞对小鼠肝癌移植瘤的抑制作用及免疫效应的研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)联合瘤体内输注树突状细胞(dendritic cell,DC)的光免疫疗法(photody-namic immuno-therapy,PIT)对小鼠Heps肝癌移植瘤的抑制作用及免疫效应。方法体外培养昆明小鼠骨髓源性DC,4,'6-二脒基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)荧光染色液标记DC备用。128只昆明小鼠皮下接种Heps肝癌细胞建立肿瘤模型,随机分为对照组、PDT组、DC组和PIT组。对照组小鼠瘤体内注射生理盐水,PDT组单纯PDT治疗,DC组小鼠瘤体内注射DAPI标记的DC,PIT组PDT联合瘤体内注射DAPI标记的DC细胞。治疗后定期测量各组肿瘤体积,记录各组小鼠生存时间,荧光显微镜下计数DC组及PIT组小鼠淋巴结中荧光细胞数目,流式细胞仪测定各组小鼠外周血T细胞亚群,LDH释放法测定各组小鼠脾细胞杀伤活性。结果 (1)与对照组相比,PDT组与PIT组治疗后肿瘤生长明显受抑;(2)PDT组与PIT组小鼠生存时间延长;(3)高倍镜视野下DC组较PIT组荧光细胞数增多(P<0.05);(4)治疗后72 h,PDT及PIT组小鼠外周血CD8+T细胞百分率均明显高于对照组和DC组(P<0.01、P<0.01),其中PIT组较PDT组增高明显(P<0.01),(5)PDT组与PIT组小鼠脾脏细胞杀伤活性较对照组和DC组明显增强(P<0.01,P<0.01)。结论 PDT疗法能够抑制肿瘤生长并激发宿主免疫应答,联合输注DC可增强PDT对小鼠Heps肝癌移植瘤的抑制作用及免疫效应。
- 白爽张南征杨宛莹刘军权周忠海孙蕾清陈复兴
- 关键词：光动力疗法树突状细胞
- 光动力疗法对输入的NK细胞在荷Heps肝癌鼠瘤内分布的影响
- 2012年
- 目的探讨NK细胞输入后在荷Heps肝癌小鼠体内的分布规律,光动力疗法(PDT)对输入的NK细胞在肿瘤组织内分布的影响。方法 96只KM小鼠建立Heps肝癌移植瘤模型后随机分为对照组、细胞组(NK组)和光免疫组(PIT组),每组32只。对照组小鼠尾静脉输入生理盐水,NK组小鼠尾静脉输入4,'6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记的NK细胞,PIT组小鼠PDT处理后即刻输入DAPI标记的NK细胞。治疗后1、2、4、6和8 d摘取小鼠肝脏、脾脏、肺脏和肿瘤组织,在荧光显微镜下观察NK细胞在上述脏器的动态分布情况;治疗后2 d观察瘤组织的病理学变化;治疗后1、2、4、6和8 d摘除小鼠眼球取血以流式细胞仪检测外周血NK细胞百分率;治疗后6 d LDH释放法检测小鼠脾细胞杀伤活性。结果 (1)各治疗组,输入后1、2、4、6和8 d,NK细胞在小鼠肝脏、脾脏、肺脏和肿瘤组织中均有分布,其中以肿瘤组织内最多;NK细胞在瘤内浸润密度:以输入后2 d最高,而各时间点PIT组又显著高于NK组(P<0.05);(2)外周血中NK细胞含量:在治疗后1、2、4和6 d,PIT组较对照组明显增高(P<0.01);治疗后1、2和4 d,NK组较PIT组和对照组增高(与PIT组相比,P<0.05;与对照组相比,P<0.01);(3)效靶比为10∶1、20∶1和50∶1时,NK组和PIT组脾细胞杀伤活性均显著高于对照组,其中PIT组又显著高于NK组(P<0.01)。结论 NK细胞输入荷瘤小鼠体内后能选择性聚集于肿瘤组织内;PDT可增加输入的NK细胞在瘤内的浸润密度,增强小鼠脾细胞对Heps肝癌的杀伤活性。
- 杨宛莹张南征刘军权白爽周忠海陈复兴孙蕾清
- 关键词：自然杀伤细胞光动力疗法肿瘤
- 光动力疗法联合相关治疗研究进展被引量：4
- 2012年
- 目的:总结可增强光动力疗法(PDT)抗肿瘤免疫效应的相关治疗研究进展。方法:应用PubMed和CNKI数据库,以"光动力疗法、肿瘤、免疫疗法、靶向光敏剂、肿瘤疫苗和免疫抑制"等为关键词,检索2000-01-2011-08的相关文献。纳入标准:1)PDT联合的免疫疗法;2)靶向光敏剂;3)PDT光照剂量;4)PDT免疫抑制效应;5)PDT肿瘤疫苗。排除重复研究与本研究无关的文献,符合分析的文献32篇。结果:PDT处理后对宿主免疫系统的影响极为复杂,既能促进抗肿瘤免疫,在某些情况下又能抑制免疫;PDT联合免疫佐剂、细胞因子或免疫细胞可有效增强PDT抗肿瘤免疫反应;疫抑制效应具有条件性,可通过制备靶向光敏剂、调节光照剂量和去除负向调节性免疫效应分子及调节性T细胞等多种途径减弱甚至去除这种生物效应;PDT处理后肿瘤细胞裂解物具有免疫刺激作用,可用作肿瘤疫苗。结论:联合免疫疗法或其他方法来增强PDT抗肿瘤免疫效应、拮抗免疫抑制效应,可显著提高PDT抗肿瘤疗效。
- 杨宛莹张南征
- 关键词：光动力学疗法肿瘤免疫疗法免疫抑制
- 不同刺激因子对人CIK细胞功能影响被引量：12
- 2013年
- 本研究观察不同的细胞刺激因子共刺激对人CIK细胞增殖和功能的影响。用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMNC),按常规方法从PBMNC培养细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞),然后根据加入CD28 mAb、IL-15和IL-21将实验分为5组:对照组(CIK),CB28+IL-15+IL-21组,IL-15+IL-21组,CD28+IL-15组和CD28+IL-21组。用全自动五分类血液分析仪计数CIK细胞的增殖能力;用流式细胞术测定细胞刺激因子诱导的CIK细胞的粒酶B(granzyme B),穿孔蛋白(perforin)和CD107α等分子的变化;用ELISA法检测细胞因子IL-10、IL-12、INF-γ和TNF-α的含量;乳酸脱氢酶释放法测定细胞刺激因子共刺激的细胞对人肺癌细胞株A549(A549)、乳腺癌细胞株MFC-7(MFC-7)和人黑素瘤细胞株HME1(HME1)的杀伤活性。结果表明,在CIK细胞培养体系中加入不同的刺激因子,细胞增殖能力有明显的差异,以含CD28、IL-15和IL-21组细胞增殖倍数最高,在培养第10日时该组的增殖倍数为255.3±6.3,明显高于对照组,IL-21+IL-15组和CD28+IL-21组细胞增殖倍数分别为166.6±13.5、199.4±15.0和228.8±16.6(P<0.05),添加CD28和IL-15组则穿孔蛋白含量明显高于其他组。所有共刺激组的穿孔蛋白、粒酶B和CD107a表达百分率均明显高于对照组(P<0.05)。对A549、MFC-7和HME1细胞杀伤活性以含CD28+IL-15组最高(82.2%、59.3%和70.6%),明显高于对照组(60.9%、49.6%和48.4%)(P<0.05)。在CIK细胞培养体系中增加CD28+IL-15+IL-21组中细胞分泌IFN-γ量显著高于其他各组(P<0.05)。结论:不同刺激因子活化的CIK细胞的增殖能力、分泌细胞因子和杀伤活性有明显差异,在培养体系中增加相应的细胞刺激因子对细胞功能定向培养有一定意义。
- 刘军权朱云陈复兴周燏姬会春杨宛莹吕小婷张颂陶征中李昳
- 关键词：共刺激CIK细胞细胞因子杀伤活性
- 抗CD28单抗和IL-15对CIK增殖和杀肿瘤作用的研究被引量：4
- 2012年
- CIK是肿瘤过继性细胞免疫治疗中的免疫效应细胞。为使CIK在实验室里能被更有效地诱导增殖并赋予其更强的杀肿瘤效应,我们在CIK常规培养环境中加入抗CD28单抗和IL-15,探讨抗CD28单抗和IL-15对CIK增殖和杀肿瘤效应。取人外周血单个核细胞(PBMC),预先以常规方法诱导CIK,然后加入抗CD28单抗和IL-15与CIK共培养。用全自动五分类血液分析仪计数CIK增殖率;用流式细胞术测定CIK中粒酶B、穿孔素和CD107a等分子的表达率;用ELISA方法检测CIK分泌IL-10、IL-12、INF-γ和TNF-α水平;用乳酸脱氢酶释放法测定CIK对人肺癌细胞株(A549)、乳腺腺癌细胞株(MFC-7)和人黑素瘤细胞株(HME1)的杀伤活性。PBMC经常规CIK诱导培养以后再加入抗CD28单抗和IL-15与对照组比较,前者细胞增殖率明显增强(P<0.05);在CIK培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15可促进颗粒酶B、穿孔素和CD107a等分子的表达率进一步增强(P<0.05);加入抗CD28单抗和IL-15,培养8d后CIK对A549、MFC-7和HME1细胞杀伤活性分别为82.2%、59.3%和70.6%,与对照组(分别为60.9%、49.6%和48.4%)相比差异有统计学意义(P<0.05);在培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15,培养8d后其细胞因子IFN-γ、TNF-α分泌水平显著高于对照组(P<0.05),组间IL-10和IL-12的分泌量未见显著差异(P>0.05)。实验说明在CIK培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15可增加CIK增殖率并提高其抗肿瘤效应。
- 刘军权朱云陈复兴周燏杨宛莹吕小婷张颂陶征中李昳唐莉
- 关键词：IL-15CIK增殖抗肿瘤活性
- 结直肠癌化疗联合自体多种免疫细胞治疗疗效观察被引量：3
- 2011年
- 目的比较结直肠癌患者自体多种免疫细胞联合化疗与单纯化疗后细胞免疫功能变化和生存期差异。方法83例结直肠癌患者分为化疗组43例，化疗联合自身多种免疫细胞治疗组（联合组）40例；用血细胞分离机采集患者自身外周血单个核细胞（PBMC），将PBMC按常规方法分别诱导培养CD3AK细胞、CIK细胞、树突状细胞（DC）、7gT细胞和NK细胞；用流式细胞仪检测治疗前后患者外周血的CD3（＋）、CD4（＋）、CD8（＋）、CD19（＋）、CD16（＋）CD56（＋）、CD4／CD8和3,gT细胞比值及PBMC中穿孑L素、颗粒酶B和CD107a阳性表达率。2组患者化疗方案都采用草酸铂＋亚叶酸钙＋5-氟脲嘧啶静脉输注；联合组在化疗基础上接受免疫细胞治疗。结果联合组治疗后的免疫细胞亚群比值和绝对值显著高于化疗组。联合组与化疗组Karnofsky评分差异有统计学意义。联合组患者治疗后PBMC的穿孔素、颗粒酶B及CDl07a均高于治疗前，并且治疗后这3种指标数值均皿著高于化疗组。联合组患者1午、2年和5年生存率分别为70．o％、20．0％和10．0％，高于化疗组（分别为23．2％、7．0％和4．6％）；其中Ⅱ期、Ⅲ期患者的1年、2年和5年生存率及Ⅳ期患者的1午生存率2组间比较差异有统计学意义，而Ⅳ期患者的2年、5年生存率2组间比较差异无统计学意义。结论化疗联合自身综合性免疫细胞治疗进展期结直肠癌能提高患者的免疫功能，延长生存期。
- 朱云刘军权张南征陈复兴陈玲张颂杨宛莹周忠海徐永茂
- 关键词：结直肠癌免疫功能免疫细胞
