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果蝇miRNA的结构与功能及研究策略被引量：3: 2009年; miRNA是一类在动植物基因组中广泛存在的小分子非编码RNA,作为真核细胞转录后水平上基因表达的关键调控者,它通过与靶基因mRNA的特定位点结合,抑制mRNA的翻译或诱导mRNA的降解,从而介导生物体的许多重要生理活动。本文简要总结了模式昆虫黑腹果蝇Drosophila melanogastermiRNA的鉴定情况,综述了miRNA的结构特征、生物合成途径和作用机制。miRNA可能同时调节成百上千个靶标,其生物功能主要体现为:调节细胞分化与凋亡,调节器官和神经系统的发育,控制肌肉分化,保持能量动态平衡,调节昆虫变态或综合调节作用。miRNA具有"低丰度、短序列、难富集"的特点,miRNA基因的获得和功能鉴定研究的基本策略是实验生物学和生物信息学方法的有机结合。鉴定新miRNA及其靶标,深入研究其生物功能和基因进化等可能成为今后一段时间昆虫miRNA研究的重要内容。; 戚晓娴任太军李晓梅钟国华; 关键词：MIRNA 黑腹果蝇

小菜蛾泛素延伸蛋白基因的克隆与功能研究: 泛素(Ubiquitin)是一种广泛存在于真核细胞中的小分子量蛋白质，其基本功能是通过泛素-蛋白水解酶复合体通路(Ubiquitin proteasome pathway,UPP)高效并高度选择性降解蛋白质。昆虫泛素在调...; 李晓梅; 关键词：小菜蛾基因克隆原核表达 RNA干扰几丁质酶

RNA加尾和引物延伸法检测黑腹果蝇3种microRNA表达量被引量：3: 2011年; 采用RNA加尾和引物延伸real time PCR法实时定量检测了黑腹果蝇Drosophila melanogaster的bantam、mir-14、mir-2a共3种microRNA（miRNA）在各发育阶段组织中的相对表达情况,发现3种miRNA在不同发育时期的表达差异明显,其表达变化规律与文献报道基本一致,验证了该法的可靠性.这种＂加尾和引物延伸＂方法,仅需1~10 ng总RNA或等同物,检测范围可达7个数量级,为昆虫miRNA研究提供了可靠的定量检测方法.; 戚晓娴李晓梅陈永钟国华; 关键词：黑腹果蝇 MICRORNA

昆虫泛素基因和功能研究进展被引量：8: 2009年; 泛素(Ubiquitin)是一种广泛存在于真核细胞中的小分子量蛋白质,其基本功能是通过泛素-蛋白水解酶复合体通路(Ubiquitin proteasome pathway UPP)高效并高度选择性降解蛋白质。本文综述了昆虫泛素基因的克隆鉴定、表达特点、作用途径,重点介绍了昆虫泛素在调控转录因子、调节细胞周期和细胞凋亡、细胞生长以及信号转导中的作用。泛素调控机制、信号转导、生理功能及其影响因素,以及针对泛素设计特异性昆虫生长发育调节剂可能是今后昆虫泛素研究的重点。; 李晓梅任珍珍陈永钟国华; 关键词：泛素昆虫基因

小菜蛾泛素延伸蛋白基因的克隆与原核表达被引量：3: 2011年; 利用RT-PCR和RACE技术,以小菜蛾(Plutella xylostella)3龄幼虫的cDNA为模板,克隆获得泛素延伸蛋白基因Px-ubi(GenBank No.FJ527489),核苷酸序列全长537 bp,其中开放阅读框全长387 bp,编码129个氨基酸残基,预测分子质量为16.7 ku,等电点为9.1,与已知真核生物泛素延伸蛋白的同源性为92%～98%。RT-PCR结果显示Px-ubi在小菜蛾不同生长发育时期均有表达,其中卵期、3龄期和预蛹期含量较高,而成虫期含量较低。同源建模显示,Px-ubi的3D结构主要由1个α螺旋、4个β折叠以及β转角和不规则卷曲组成,4个β折叠两两反向平行排列在α螺旋的一侧。将该基因重组到表达载体pET-32a(+)中,获得重组载体pET32a-Px-ubi,并转入原核细胞中表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明,经IPTG诱导后,Px-ubi能在大肠杆菌BL21中高效表达,电泳检测到1条约16.7 ku的外源蛋白,与预测的蛋白分子质量吻合。; 李晓梅陈永李珣钟国华; 关键词：小菜蛾泛素基因克隆原核表达

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李晓梅