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零下非结冰UW液、Celsior液和HTK液保存C3A细胞的效果比较: 2011年; 目的比较UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用C3A细胞的效果。方法制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组)。各组细胞于-0.8℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能。结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了零下非结冰保存72 h的C3A细胞的存活率〔(84.34±4.25)%,(83.53±3.73)%vs(75.65±3.01)%,P<0.001〕和细胞内ATP含量〔(5.54±1.44)μg/106个细胞,(5.51±1.31)μg/106个细胞vs(2.75±1.03)μg/106个细胞,P<0.001〕;抑制了LDH释放(P<0.001);更好地维持了细胞尿素合成功能〔(0.63±0.10)mmol/L,(0.62±0.06)mmol/L vs(0.39±0.04)mmol/L,P<0.001〕和白蛋白分泌功能〔(1.99±0.38)g/L,(1.96±0.24)g/L vs(1.50±0.18)g/L,P<0.05〕。UW液与Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异。结论同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液零下非结冰(-0.8℃)保存C3A细胞可以明显地提高复温后细胞存活率和细胞内ATP含量,降低低温损伤引起的LDH释放,有效地保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能。UW液同Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异,保存时间不宜超过72 h。; 张清华李庆勇蒋知新沙杭李安全林虎梁雪梅夏爱祥高毅; 关键词：生物人工肝零下非结冰 UW液 CELSIOR液 HTK液

白细胞介素-6对人冠脉平滑肌细胞妊娠相关血浆蛋白A分泌的影响: 2007年; 目的研究炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人冠状动脉平滑肌细胞(human coro-nary artery smooth muscle cell,HCASMC)分泌妊娠相关血浆蛋白A(pregnancy-associated plasma protein-A,PAPP-A)的影响。方法一期:培养HCASMC,至第5～7代时,分别加入10μg/L和0μg/L的IL-6,0μg/L组设为对照组,均分别孵育2,4,8,24,36h后,收集细胞培养液上清。二期:采用不同浓度的IL-6(0,5,10,50μg/L)(0μg/L组设为对照组)刺激HCASMC6h后分别收集细胞和细胞培养液上清。应用酶联接免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)方法检测细胞培养液上清内PAPP-A的表达量。结果一期,PAPP-A的表达量在2h时开始增加,4,8,24h和36h组浓度显著高于对照组(4h:P=0.008;8h:P=0.007;24h:P=0.023;36h:P=0.017),并随时间的延长而不断增加;二期,在实验剂量范围内,随IL-6剂量增加,PAPP-A的表达量不断升高,其中10μg/L和50μg/L组均显著高于对照组(10μg/L:P=0.015;50μg/L:P<0.001)。结论IL-6可使HCASMC表达不稳定斑块标记物PAPP-A的升高,说明炎症可能是急性冠状动脉综合征(acutecoronary syndromes,ACS)发生发展的机制之一。; 蒋知新李丽张清华高德禄谢声扬李安全; 关键词：急性冠脉综合征炎症白细胞介素-6 妊娠相关血浆蛋白A

零下非结冰UW液成功保存生物人工肝用L-02肝细胞被引量：1: 2010年; 目的比较零下非结冰(-0.8℃)与常规低温(4℃)分别用于人工肝用永生化L-02细胞保存的效果,探索零下非结冰保存肝细胞与细胞凋亡的关系。方法制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为以下2组:-0.8℃组(零下非结冰组),4℃组(对照组)。低温保存24、48h及72h后,分别测定细胞存活率、凋亡率、坏死率(流式细胞术)及ALT释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能。结果 -0.8℃(零下非结冰)较4℃明显提高了长时间低温保存L-02细胞的存活率[72h:(70.17±2.82)%vs(60.05±3.17)%,P<0.01],降低了细胞凋亡率[72h:(5.73±1.68)%vs(9.20±2.35)%,P=0.02],抑制了ALT释放[72h:(6.21±0.65)U/Lvs(8.68±1.18)U/L,P<0.01],更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能[72h:(1.01±0.14)mmol/Lvs(0.66±0.09)mmol/L,P<0.01]及白蛋白分泌功能[72h:(9.04±0.53)μg/mlvs(7.70±0.52)μg/ml,P<0.01]。2组间细胞坏死率差异无统计学意义[72h:(18.45±1.88)%vs(21.82±3.86)%,P>0.05]。结论零下非结冰可明显维持L-02细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡,有效保护肝细胞尿素合成和白蛋白分泌功能。; 蒋知新李庆勇张清华沙杭李安全林虎王丽丽高毅; 关键词：生物人工肝零下非结冰

生物人工肝用肝细胞低温保存的现状与进展: 2010年; 大量功能好的肝细胞是生物人工肝支持系统(bio-artificial liver support system,BLASS)的核心,是制约BLASS临床广泛应用的瓶颈.探索出一种实用的肝细胞低温保存方法,建立一个随时可用(ready to use)的肝细胞库是BALSS普遍推广的基础.目前肝细胞低温保存分为4℃或零下非结冰保存和-80℃或-196℃深低温冻存两大类,两大类保存方法各有优缺点.影响肝细胞低温保存的因素很多,如保存(冻存)液、(冻存)保护剂等.有关肝细胞在低温保存过程中死亡的机制尚未完全阐明,但大量研究发现细胞凋亡是除了坏死之外低温保存肝细胞死亡的另一个重要的途径.; 蒋知新沙杭李庆勇张清华李安全林虎高毅; 关键词：生物人工肝细胞凋亡

零下非结冰保存L-02细胞的效果及与细胞凋亡的关系被引量：1: 2010年; 目的采用UW液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用L-02细胞,与常规低温(4℃及0℃)比较,探索零下非结冰保存肝细胞的效果以及同细胞凋亡的关系。方法制备好的UW液保存的L-02细胞悬液分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组)。低温保存24h、48h及72h后,分别测定细胞存活率及凋亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能、白蛋白分泌功能。结果零下非结冰(-0.8℃)较常规低温(0℃及4℃)明显提高了低温保存L-02细胞的存活率〔72h:-0.8℃(70.17±2.82)%vs4℃(60.05±3.17)%〕,降低了细胞凋亡率〔72h:-0.8℃(5.73±1.68)%vs4℃(9.20±2.35)%〕。零下非结冰明显抑制了LDH的释放〔72h:-0.8℃(113.88±5.64)U/Lvs4℃(170.47±11.80)U/L〕,更好地维持了L-02细胞的尿素合成功能〔72h:-0.8℃(1.01±0.14)mmol/Lvs4℃(0.66±0.09)mmol/L〕及白蛋白分泌功能〔72h:-0.8℃(9.04±0.53)μg/mlvs4℃(7.70±0.52)μg/ml〕。结论与0℃及4℃相比,零下非结冰(-0.8℃)可明显提高L-02细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡,有效的保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能。; 李庆勇张清华蒋知新李安全夏爱祥李丽陈玲高毅; 关键词：生物人工肝零下非结冰

CRP对内皮细胞株ECV304细胞分泌PGI2、PAI-1的影响: 目的探讨C反应蛋白（CRP）对内皮细胞株ECV304细胞释放前列环素（PGI2）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的影响。方法用不同浓度的CRP与ECV304细胞培养不同时间后,用ELISA法检测培养液中PGI2的...; 赖晓辉高德禄张金树陈倩孙宇李安全李玲; 关键词：前列环素纤溶酶原激活物抑制剂-1; 文献传递

零下非结冰UW液保存人工肝用C3A细胞: 2010年; 目的探索零下非结冰(-0.8℃)保存C3A肝细胞的效果以及同细胞凋亡的关系。方法UW液(University of Wisconsin Solution)保存的C3A细胞分为以下2组:-0.8℃组,4℃组。低温保存24h、48h及72h后分别测定细胞存活率及凋亡率、AST释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能。结果零下非结冰(-0.8℃)72hC3A细胞存活率(86.49±2.80)%高于4℃(77.83±3.40)%,P<0.001;细胞凋亡率(1.26±0.84)%低于4℃(9.16±1.99%,P<0.001;AST释放(5.30±0.42)U/L低于4℃(8.18±1.05)U/L;细胞尿素合成功能(0.68±0.06)mmol/L优于4℃(0.40±0.07)mmol/L,P<0.001;白蛋白分泌功能(2.06±0.22)mg/ml优于4℃(1.68±0.18)mg/ml(P=0.002)。结论0.8℃的UW液可明显提高低温保存C3A细胞存活率,有效地保护细胞尿素合成和白蛋白分泌功能。; 张清华李庆勇蒋知新李安全沙杭林虎高毅; 关键词：人工肝温度零下非结冰 UW液

生物人工肝用C3A细胞在零下非结冰时的保存被引量：4: 2010年; 目的:探讨零下非结冰保存肝细胞的效果及其与细胞凋亡的关系.方法:UW液保存的C3A细胞悬液分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存24、48及72h后,采用流式细胞术分别测定细胞存活率及凋亡率,同时测定LDH、乳酸释放,细胞内ATP含量、尿素合成功能及白蛋白分泌功能,同时观察细胞形态.结果:零下非结冰组较0℃非结冰组及对照组明显提高了低温保存72h的C3A细胞的存活率(86.49%±2.80%vs81.50%±2.83%,77.83%±3.40%,均P<0.05),降低了细胞凋亡率(1.26%±0.84%vs5.34%±1.20%,9.16%±1.99%,均P<0.05);明显抑制了低温保存72h乳酸以及LDH释放(乳酸:10.38μg/106cells±1.40μg/106cellsvs12.02μg/106cells±1.64μg/106cells,17.41μg/106cells±2.40μg/106cells;LDH:80.10U/L±11.10U/Lvs120.04U/L±14.32U/L,148.98U/L±15.37U/L,均P<0.05);更好地维持了低温保存72hC3A细胞内ATP含量、尿素合成功能、及白蛋白分泌功能(均P<0.05).形态上,零下非结冰组保存细胞死亡比例少,细胞接触良好,未见对照组及0℃非结冰组细胞膜周围出现"毛刺"样改变及细胞内的"空泡样"改变.结论:在零下非结冰条件下保存肝细胞,建立一个"血库样"(readytouse)肝细胞库,可以有效促进生物人工肝的发展.; 李庆勇张清华蒋知新沙杭林虎李安全龙炫辉高毅; 关键词：生物人工肝零下非结冰细胞凋亡

两种方法测定血沉结果比较与评价被引量：6: 2009年; 目的比较两种不同方法测定红细胞沉降率(简称血沉)的结果,探讨全自动血沉仪的临床应用价值。方法随机抽取56例住院患者,同时采用全自动血沉仪法和传统魏氏法测定1h血沉。结果经统计学处理,两种方法的相关系数为0.72,两者测定结果一致;但当血沉大于20mm/h时,两种测定方法比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论全自动血沉仪法在测定正常标本时和魏氏法有较好的相关性,但在血沉升高的样本,则需要结合魏氏法进一步测定。; 祝丙华李安全张金树王静高玉然高德禄; 关键词：红细胞沉降率魏氏法自动血沉仪

甲型H1N1患者循环血白细胞VCS参数分析: 2010年; 目的探讨VCS(Volume Conductivity Scatter)参数在甲型H1N1患者白细胞中的变化及其辅助诊断价值。方法用Beckman Coulter LH750型全自动血液分析仪,分别测定基因扩增法确诊甲型H1N1患者(实验组)和健康人群(对照组)白细胞VCS的参数。结果甲型H1N1患者VCS参数MMV(171.615±9.156)明显高于对照组(157.157±10.026)(P<0.001);MLS(62.003±6.916)比对照组(54.263±3.817)明显增加(P<0.001);MNS(114.946±1.603)较正常对照组(154.263±3.817)明显减低(P<0.001)。结论甲型H1N1患者白细胞VCS参数改变不同于健康人群,对早期诊断有一定参考价值。; 李安全周珊李庆勇高德禄蒋知新王飞清祝丙华龙炫辉; 关键词：流感流感病毒A型 H1N1亚型

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李安全

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