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方媛: 作品数：27 被引量：7H指数：2; 供职机构：东华大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”上海市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术经济管理冶金工程更多>>

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消费者偏好不确定的虚拟产品供应链信息共享策略研究: 方媛

脑源性神经营养因子-绿色荧光蛋白融合基因载体的构建、鉴定及初步应用研究: 2009年; 目的构建脑源性神经营养因子（BDNF）绿色荧光蛋白（GFP）融合表达质粒，观察其融合蛋白的特性。方法将BDNFcDNA片段插入pcDNA3．1／NT-GFP—TOPO真核表达质粒，使其与GFP同处一个阅读框架中，测序鉴定后，转染培养的雪旺细胞，用免疫组织化学和蛋白质印迹（Western botting）观察外源性目的蛋白的表达情况，并用该质粒活体转染视神经切断的大鼠模型，观察所表达外源性蛋白的神经保护作用。结果测序证实质粒构建成功。Westernbotting结果显示，BDNF—GFP融合蛋白表达一相对分子质量为41×10^3。大小条带。荧光显微镜下可见BDNF～GFP转染的细胞发出绿色荧光，免疫组织化学染色后，可见绿色荧光与红色荧光完全重合。转染BDNF—GFP质粒和GFP质粒的大鼠视神经切断术后7d存活视网膜神经节细胞（RGC）分别为（1201±286）、（482±151）个／mm^2，存活百分比分别为（51．39±12．24）％和（20．62±6．46）％；28d时存活的RGC分别为（715±71）、（112±24）个／mm^2，存活百分比分别为（30．59±3．04）％和（4．79±1．03）％。两组存活百分比比较，差异有统计学意义（t=3．144，11．378；P〈0．01）。结论BDNF-GFP融合表达载体可以转录翻译为一融合蛋白，该蛋白可自发绿色荧光，并具有BDNF的生物学活性。; 方媛樊嘉雯莫晓芬孙兴怀郭文毅孔德升马端田洁; 关键词：基因疗法动物实验

急性高眼压模型兔眼不同眼压状态下视神经轴浆运输的改变: 2011年; 目的观察急性高眼压模型兔眼不同眼压状态下视神经轴浆运输的改变。方法成年新西兰大白兔24只，分为眼压20、30、40mmHg（1mmHg=0．133kPa）组和眼压为10～15mmHg的对照组，每组均为6只兔。采用前房穿刺灌注法联合压力持续监测法建立急性高眼压模型。实验开始时，兔眼玻璃体腔中注射罗丹明异硫氰酸（RITc）标记轴浆运输。持续3h高眼压后，过量麻醉处死兔后取下视神经。荧光显微镜下观察视神经轴浆运输情况的改变。采用德国Leica公司Q500IW图像分析软件对RITC进行灰度定量分析，并对各眼压组平均灰度值和筛板前、筛板区、筛板后350μm区域灰度值进行统计学分析处理。结果RITC在视神经中心呈顺行标记染色。不同眼压组轴浆运输情况不同，随着眼压升高，轴浆运输能力减弱，差异有统计学意义（F=159．3，P〈0．05）。筛板前区，各眼压组间灰度值比较，差异无统计学意义（F=0．2545，P〉0．05）。40mmHg组灰度值与对照组灰度值比较，在筛板区（t=5．684）和筛板后350μm区域（t=5．124）差异均有统计学意义（P〈0．05）；20、30mmHg组灰度值与对照组灰度值比较，差异无统计学意义（t=1．747，P〉0．05）。结论眼压40mmHg持续3h将导致视神经轴浆运输改变，轴浆运输障碍部位以筛板区及以后的区域为主。; 周佳郭文毅方媛杨强王中峰俞道义; 关键词：轴突运输

在体电穿孔辅助BDNF基因眼内双腔延缓RCS大鼠视网膜色素变性的实验研究: 张萌莫晓芬郭文毅方媛; 关键词：电穿孔视网膜色素上皮细胞视网膜神经节细胞视网膜色素变性

组织工程化神经导管促进成年大鼠视神经再生的研究: 方媛莫晓芬郭文毅田洁王艳荣先芳张萌孙兴怀

近8年复旦大学附属眼耳鼻喉科医院行玻璃体切割手术患者相关因素对比分析: 古湘瑜方媛

玻璃体手术后高眼压的临床分析研究: 目的:探讨玻璃体手术后出现高眼压的流行病学特点及危险因素。方法:2011年11月在我院接受玻璃体手术的270例患者272只手术眼中在术后一年的随访中眼压在25 mm Hg及其以上的术眼临床资料进行回顾性分析,着重分析高眼...; 方媛龙青清汪晓倩江睿徐格致孙兴怀

Rescue of photoreceptors by BDNF gene transfer using in vivo electroporation in the RCS rat of retinitis pigmentosa: 张萌莫晓芬方媛郭文毅吴继红张圣海

在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮细胞层和光感受器细胞层的实验研究: 2010年; 目的探讨在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮（RPE）细胞层和光感受器（PR）细胞层的可行性。方法147只健康雄性Spragne—Dawley（SD）大鼠根据电穿孑L刺激模式电压值分为5、10、15、20、25、30、35V组，右眼视网膜下腔注射增强型绿色荧光蛋白（EGFP）真核表达质粒pEGFP—N1为实验眼，左眼注射TE Buffer为对照眼。各组根据不同转染方向再分为RPE和PR两个亚组。各组除电压不同外，其余参数均为脉宽99ms，脉冲间期0．5s，连续5个脉冲。将带有负电荷的质粒在电场作用下，拟转染到RPE细胞层，反向置电极，拟转染到PR细胞层。转染后7d取各组视网膜铺片，荧光显微镜下观察EGFP表达强弱、范围及荧光细胞计数分析；采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）、实时逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）半定量观察EGFP蛋白和mRNA的表达。结果转染后7d，荧光显微镜观察发现，各组RPE亚组对照眼RPE细胞层内均未见特异性荧光表达，实验眼可见绿色荧光表达；各组RPE亚组对照眼视网膜铺片均未见荧光表达，实验眼视网膜铺片均可见转染了EGFP的RPE细胞。Western blot检测显示，随电压增加，EGFP蛋白与β-肌动蛋白条带灰度相对比值呈上升趋势。RTPCR检测显示，各组均产生阳性扩增条带，随电压增高，EGFP mRNA与GADPH mRNA扩增条带灰度相对比值逐渐增高。结论在体电穿孔方法可以有效辅助基因转染大鼠RPE细胞层。; 张萌莫晓芬郭文毅吴继红方媛张圣海李希; 关键词：色素上皮视网膜炎电穿孔光感受器

The use of the intraocular pressure-lowering drugs in the prevention of postoperative Ocular Hypertension after Pars plana vitrectomy-a 8 years trend: 古湘瑜方媛

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