左珊珊
- 作品数：5 被引量：21H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 裂殖弧菌△4去饱和酶与盐生巴夫藻△5延长酶双基因共转促进EPA向DHA转化的研究
- 二十二碳六烯酸(DHA,22：6n3)是一种重要的多不饱和脂肪酸(polyunsatumted fatty acids, PUFAs),能够在一定程度上预防和治疗某些疾病,对人体健康非常重要。由于缺乏某些酶,人体无法自己...
- 左珊珊
- 关键词：细胞转染
- 文献传递
- 连续3步缺口修复构建人β肌动蛋白-人凝血因子Ⅶ杂合基因座
- 2012年
- 目的:为了获得稳定高效表达凝血因子Ⅶ的哺乳动物细胞株,构建一个利用人β肌动蛋白(hACTB)基因座完整的上下游调控序列指导人凝血因子Ⅶ(hFⅦ)基因组序列在人胚胎肾细胞特异性高效表达的hACTB-hFⅦ杂合基因座。方法:采用3步连续缺口修复的方法。首先,以pBR322载体作为骨架,插入预先合成的6个同源臂,构成能进行3次连续基因抓捕的载体。然后在大肠杆菌内利用Red同源重组系统介导的缺口修复技术:第一步,从含hACTB基因座的细菌人工染色体(BAC)上亚克隆10 kb的hACTB基因3′端完整侧翼序列;第二步,从hFⅦBAC上亚克隆13 kb的从起始密码子(ATG)到终止密码子(TAG)的hFⅦ基因组序列;第三步,从hACTB BAC上亚克隆20kb的hACTB基因5′端完整侧翼序列,并使这3个基因片段自动无痕地连接在基因抓捕载体上,形成全长约50 kb的hACTB-hFⅦ杂合基因座。结果:经过PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,构建的杂合基因座达到了原来hACTB基因座中hACTB基因组编码序列从起始密码子到终止密码子被hFⅦ从起始密码子到终止密码子的基因组序列基因组序列精确置换的目的。结论:连续3步缺口修复构建杂合基因座细胞表达载体的技术,将为细胞高效表达大载体的制备提供一种全新的思路和方法。
- 张伟张伟林艳丽周艳荣左珊珊吴晓洁熊福银刘芳尤平
- 关键词：细菌人工染色体
- DHA与EPA的研究进展被引量：21
- 2012年
- 二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,22∶6n3,DHA)和二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,20∶5n3,EPA)均属于n3类多不饱和脂肪酸(Polyunsatumted fatty acids,PUFAs),能够在一定程度上预防和治疗糖尿病、类风湿性关节炎、自身免疫紊乱等疾病,对人体健康非常重要,因而受到越来越多的关注。本文对DHA与EPA的生理功能、合成机制及其在微藻和真菌中合成的研究现状进行了综述,并对利用转基因技术在哺乳动物体内生产EPA和DHA的前景进行了展望。
- 左珊珊林艳丽张伟
- 关键词：二十二碳六烯酸二十碳五烯酸
- 一种在哺乳动物细胞中生产DHA的方法
- 本发明公开了一种促进哺乳动物细胞生产DHA的方法。该方法下述步骤：1)制备DHA生产能力提高的哺乳动物转基因细胞系；2)以花生四烯酸为底物培养所述的哺乳动物转基因细胞系，获得细胞内DHA积累量提高的哺乳动物细胞。其中制备...
- 陈红星林艳丽周艳荣吴晓洁熊福银孙晓艳左珊珊
- 文献传递
- 一种在哺乳动物细胞中生产DHA的方法
- 本发明公开了一种促进哺乳动物细胞生产DHA的方法。该方法下述步骤：1)制备DHA生产能力提高的哺乳动物转基因细胞系；2)以花生四烯酸为底物培养所述的哺乳动物转基因细胞系，获得细胞内DHA积累量提高的哺乳动物细胞。其中制备...
- 陈红星林艳丽吴晓洁周颜荣熊富银孙晓燕左珊珊
