孙阳
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技创新人才研究专项资金国家自然科学基金黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 5-氨基乙酰丙酸(ALA)诱导玉米幼苗抗冷性的生理效应
- 玉米(Zea mays L.)是黑龙江省第一大粮食作物，2016年全省玉米种植面积达5.82×106hm2，玉米产量为3544.1万吨，因此保证玉米产量对黑龙江省的重要性可见一斑。玉米是C4喜温植物，从发芽出苗到灌浆成熟...
- 孙阳
- 关键词：玉米生理机制
- 新型抗IL-1β和IL-17A双特异抗体的构建及特性鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的双特异性抗体（bispecific antibody，BsAb）具有双重的生物学功能。本实验旨在设计并原核表达抗人IL-1β和抗人IL-17A的双特异性抗体（BsAb1／17），获得具有生物活性的BsAb1／17，为深入研究和利用双特异性抗体奠定基础。方法利用重叠PCR方法构建VH1VL17-CL和VL1VH17-CH1基因片段，并且在所用引物的5’和3’端附加NcoI和BamHI的酶切位点。将重叠PCR产物进行胶回收后用NcoI／BamHI进行双酶切，酶切产物再次胶回收，将其连接到用NcoI／BamHI消化的pET-27b载体上。将重组质粒pET-27b—VH1VL17-CL（petA）和pET-27b—VLIVH17-CH1（petB）转化到Eco1iRosetta中。SDS—PAGE和Westernb1ot进行鉴定，用rea1—timePCR检测其阻断IL-1β刺激人T细胞表达细胞因子IL-1β的活性，人IL-6定量酶联检测试剂盒检测其阻断IL-17A刺激HeLa细胞表达人IL-6的活性。结果DNA测序结果证明成功构建了pET-27b-VHIVL17-CL（petA）和pET-27b-VL1VH17-CH1（petB）表达质粒。petA、petB诱导产物主要以包涵体形式存在，成熟蛋白纯化产物纯度超过90％以上，经SDS-PAGE分析表明表达产物的相对分子质量约为38×10^3，与理论值相符。Western b1ot和ELISA结果证实双特异抗体BsAb1／17对IL-1β和IL-17A均具有很好的亲和力。通过RT-PCR检测证明其具有阻断IL-1β刺激人T细胞大量表达细胞因子IL-1β的活性，并且具有阻断IL-17A刺激HeLa细胞产生IL-6的活性。结论成功构建了同时抗IL-1β和IL-17A的双特异抗体，并利用大肠杆菌表达系统高效表达较高纯度的具有生物活性的双特异抗体。
- 王秋颖徐黎明任桂萍彭中宜丁良君孙阳陈睿李德山
- 关键词：双特异性抗体原核表达
- 一株中和人IL-17免疫活性的单克隆抗体的制备
- 2011年
- 目的制备抗人IL-17单克隆抗体,并鉴定其中和活性。方法用hIL-17作为免疫和检测抗原,用间接ELISA法筛选分泌抗人IL-17抗体的杂交瘤细胞株,并对抗体进行中和活性鉴定。结果获得1株稳定分泌抗人IL-17单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型重链为IgG2b,轻链为κ;该株杂交瘤细胞腹水效价为1∶8.192×105;传30代及液氮中保存6个月,抗体效价稳定;Western Blot检测证明该单抗与人IL-17蛋白特异地结合;单抗亲和常数为8.192×10-9 mol/L;ELISA及Real-time-PCR检测证明该单抗能够有效地阻断人IL-17刺激Hela细胞产生IL-6的作用。结论所制备的抗人IL-17单克隆抗体具有高度的特异性、稳定性及中和活性,为针对IL-17为靶点的抗体药物的开发奠定了基础。
- 孙阳谷学佳叶贤龙徐黎明陈睿任桂萍王秋颖丁良军李德山
- 关键词：单克隆抗体中和活性IL-6
- SUMO融合系统表达人白细胞介素17及其活性的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:克隆、表达和纯化人白细胞介素17(hIL-17),并对其生物学活性进行研究。方法:采用RT-PCR的方法从活化的人T细胞中克隆获得hIL-17cDNA。构建了含羟胺切割位点的重组载体pHisSUMO-hIL-17,导入宿主菌Rosetta中,经IPTG诱导后得到表达。用Ni-NTA琼脂糖颗粒层析纯化融合蛋白,经羟胺切割,复性,通过Western blot实验进行确认,并从核酸水平和蛋白水平鉴定其活性。结果:克隆表达出了hIL-17,利用Ni-NTA琼脂糖颗粒层析纯化得到的纯品蛋白经体外活性实验表明,该蛋白具有刺激3T3-L1细胞和HeLa细胞分泌IL-6、IL-8、G-CSF的作用。结论:制备了具有生物学活性的成熟hIL-17蛋白,为进一步研究该分子在疾病中的作用奠定了基础。
- 朱慧萌谷学佳任桂萍孙阳彭中宜徐彤李德山
- 关键词：纯化活性试验
- 高效植物种子萌发、幼苗培育的水培装置
- 高效植物种子萌发、幼苗培育的水培装置，本实用新型属于植物水培设备领域，它为了提高水培的操作效率，避免洗根移苗过程对根系造成伤害以及使用定植海绵或棉花易造成茎下部腐烂的问题。该水培装置包括种子定植器、定植托盘和育苗盆，其中...
- 谢腾龙杨可攀孙阳曹鑫波左师宇顾万荣李晶魏湜
- 文献传递
