郭喜玲
- 作品数:89 被引量:378H指数:10
- 供职机构:江苏省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学环境科学与工程哲学宗教更多>>
- 江苏省2008年手足口病病原分析被引量:2
- 2011年
- 肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16(CoxA16)为手足口病的主要病原体.江苏与山东、河南、安徽交界的区域是我国两大手足口病高发地区之一,本文对2008年4月上旬至6月中旬江苏12个市城乡63批次355份临床诊断为手足口病病人的咽拭子标本进行了病原分离,并对全部182个分离毒株进行鉴定,以了解江苏手足口病流行的病原特征.
- 李显唐震崔仑标单军单云峰葛以跃赵康成郭喜玲吴涛彭海燕陈银史智扬汪华
- 关键词:手足口病病原分析柯萨奇病毒咽拭子标本高发地区病原分离
- 一种恒温快速检测甲型H1N1流感病毒核酸的方法及试剂盒
- 本发明涉及一种检测病毒核酸的方法及试剂盒,属于生物技术领域。本发明是一种快速、等温的甲型H1N1流感病毒RNA扩增方法,整个反应有赖于AMV逆转录酶、T7RNA多聚酶和核酸酶H(RNase H)共同协作而完成,不需特殊仪...
- 崔仑标葛以跃史智扬祁贤郭喜玲赵康辰单军单云峰戚宇华汪华
- 大肠杆菌O157∶H7抗菌药物敏感性研究被引量:10
- 2001年
- 为了解E .ColiO15 7∶H7对抗菌药物的敏感性及其耐药谱的差异 ,我们选择了常见的 19种抗生素 ,对 1999年分离到的 89株O15 7∶H7进行药敏试验。结果显示O15 7∶H7对氨基甙类、头孢类、喹诺酮类、呋喃类的实验药物、多肽类的多粘菌素B以及氯霉素的敏感率高 ,基本在 90 %以上。在宿主动物中家禽类的菌株耐药率大于家畜类 ,家畜类宿主中猪的菌株耐药率大于牛、羊。无毒力基因菌株对抗生素的耐药率高于有毒力基因的菌株 (P <0 0 5 )。样本来源不同和基因型别不同的耐药结果均显示菌株对抗生素的耐药情况与其是否携带有毒力基因有关。
- 庄菱顾玲郭喜玲史智扬潘浩施平周伟忠张艺飓
- 关键词:E.COLIO157:H7药物敏感试验
- 腺病毒55型感染肺炎患者的病原学鉴定及全基因序列分析被引量:5
- 2017年
- 目的对1例不明原因肺炎患者进行病原学诊断,分析其病原学特征及重组特点,为其防治提供参考。方法采集患者的咽拭子标本,提取DNA,采用Real-time荧光定量PCR法检测病原体特异性片段;采用Hep-2细胞培养分离病毒;通过Sanger测序hexon基因进行型别鉴定,通过高通量测序技术对病毒进行全基因组测序,采用MEGA6.0软件进行序列比对,通过邻近归并法(Neighbor-Joining)构建种系发生进化树分析基因特征,运用Simplot软件进行序列重组分析。结果从患者咽拭子标本中检测并分离到腺病毒,hexon基因测序后进行比对分析,其与腺病毒B组55型及11型同源性较高;全基因测序显示该病毒与HAdV-55QS-DLL及Shanxi/QZ01/2011株同源性较高,在E1B、DNA-Polymerase、100Ka Hexon和Fiber编码区存在氨基酸变异;种系发生进化树显示该毒株与腺病毒14型同属一支,与腺病毒11型进化分支较近;相似性曲线及BootScan分析显示该病毒株于hexon编码区存在HAdV-11与HAdV-14型间重组。结论本例患者不明原因肺炎由腺病毒B组55型感染引起,该病毒由HAdV-11与HAdV-14重组产生,其生物学特性有待进一步研究。
- 朱小娟郭喜玲赵康辰葛以跃吴涛戚宇华陈银史智扬朱凤才周明浩崔仑标
- 关键词:不明原因肺炎分子特征
- 肠道病毒71型VP1蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2013年
- 目的:制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP1外壳蛋白单克隆抗体。方法:利用重组纯化的EV71-VP1蛋白为抗原免疫BALB/c鼠,按常规杂交瘤技术进行细胞融合,对阳性杂交瘤细胞进行筛选及亚克隆,获得1株能稳定分泌抗EV71-VP1抗体的杂交瘤细胞株6F2B9,细胞体外扩大培养后的上清用Protein G柱纯化,超滤后用BCA法测其浓度,用免疫球蛋白亚类鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体亚型,间接ELISA方法检测其效价和特异性,间接免疫荧光法检测其与EV71病毒的特异性结合能力。结果:本研究得到的抗EV71-VP1抗体DSE-136,纯化后浓度为1.9 g/L,免疫球蛋白亚类为IgG2b,轻链属于κ链;间接ELISA检测效价为1∶3.2×105;间接免疫荧光结果显示其可与EV71病毒特异性结合。结论:成功制备出1个效价高、特异性好的抗EV71-VP1单克隆抗体DSE-136,为VP1抗原诊断、疫苗研发及其效果评价奠定了基础。
- 包林张黎曾晓燕郭喜玲史凤娟黄明明梁淑仪汪华焦永军
- 关键词:肠道病毒71型VP1蛋白单克隆抗体
- 基于逆转录-环介导等温扩增技术快速检测发热伴血小板减少综合征病毒方法的建立被引量:5
- 2014年
- 目的建立1种快速、特异、灵敏的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)的检测方法。方法针对SFTSV M基因保守区域的核酸序列,设计逆转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)特异性引物,优化反应体系和条件。用毛细管电泳法和横向流动试纸条(LFD)法检测扩增产物,建立RT-LAMP检测方法。进行敏感性、特异性检验,并与Real-time RT-PCR法进行比较。结果以LFD法和毛细管电泳法检测RT-LAMP扩增产物具有相同的敏感性和特异性;RT-LAMP-LFD检测SFTSV的敏感性为10copies RNA分子/反应,且与其他病毒无交叉反应。RT-LAMP-LFD和Real-time RT-PCR检测临床标本阳性率差异无统计学意义(P>0.05),2种方法一致性好(Kappa=0.918)。结论建立的RT-LAMP方法快速、简单、操作简单,具有较高的敏感性和特异性,适合应用于基层单位和现场SFTSV的快速检测。
- 葛以跃赵康辰崔仑标戚宇华郭喜玲陈银焦永军史智扬周明浩
- 关键词:发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒
- 2001年徐州地区暴发性病毒性脑膜炎病原的研究被引量:3
- 2006年
- 目的确定引起2001年江苏省徐州地区无菌性脑膜炎流行的病原体。方法组织培养法从患者脑脊液分离病毒,标准血清中和试验鉴定分离毒株;中和试验检测双份血清中和抗体效价;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肠道病毒特异性基因片段。结果22份脑脊液中分离出4株柯萨奇B5型、2株柯萨奇B3型、1株艾可7型肠道病毒,分离阳性率31.8%。RT-PCR检测脑脊液21份,肠道病毒阳性11份,阳性率52.4%。19例双份血清中11例中和效价呈4倍以上增长或转阳,阳性率57.9%。结论此次江苏省徐州地区无菌性脑膜炎流行的病原体是以柯萨奇B5为主要血清型的肠道病毒。
- 李显郭喜玲史智扬倪大新汪华
- 关键词:肠道病毒属柯萨奇病毒感染
- 高通量测序H7N9禽流感病毒基因组模板制备方法的优化及应用被引量:4
- 2013年
- 目的:建立一种较优的高通量测序H7N9禽流感病毒基因组模板制备方法,用于H7N9禽流感病毒基因组监测。方法:分别以6碱基随机引物反转录生成单链cDNA,合成双链cDNA;流感病毒通用反转录引物U12反转录生成单链cDNA,6碱基随机引物合成双链cDNA;U12引物反转录生成单链cDNA,通用流感病毒全基因扩增引物混合物生成双链cDNA制备高通量测序模板、构建测序文库、测序并分析数据,比较3种方法对高通量测序效率的影响,并与传统Sanger测序方法比较其测序的准确性,选择其中较优的方法用于高通量测序。结果:以U12引物反转录cDNA,通用流感病毒全基因扩增引物混合物生成双链cDNA制备的高通量测序模板,在测序族生成数、覆盖率、单核苷酸多态性及读长等方面均优于另外两种方法。结论:本研究建立的H7N9禽流感病毒基因组模板制备方法用于高通量测序具有准确性高,周期短,成本相对较低,可同时检测多个样本等特点,可用于大规模H7N9禽流感病毒基因组监测。
- 赵康辰郭喜玲祁贤葛以跃朱政陈银樊欢朱叶飞史智扬汪华崔仑标周明浩
- 关键词:禽流感病毒高通量测序
- 应用插入序列PCR进行大肠杆菌O_(157):H_7基因分型的研究
- 2005年
- 目的对不同地区、不同宿主大肠杆菌O157H7分离株进行基因分型。方法应用插入序列PCR方法,对反应体系中dNTPs、引物以及镁离子浓度等反应条件进行优化。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳检测和分析。结果14株不同来源O157H7分离株根据插入序列PCR图谱可分为A、B、C、D四个基因型。不同地区O157H7菌株存在不同的基因型;同一地区、毒力基因谱相同的O157H7菌株基因型也不相同;不同宿主O157H7菌株也存在相同的基因型。结论插入序列PCR技术用于大肠杆菌O157H7的基因分型,简便、快速、敏感,对大肠杆菌O157H7的分子流行病学研究具有重要价值。
- 郭喜玲史智扬汪华曾晓燕顾玲李显
- 关键词:大肠杆菌聚合酶链反应
- 江苏省发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒血清流行病学调查被引量:67
- 2011年
- 目的调查江苏省人与动物发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)血清流行病学情况,为控制疫情提供流行病学线索。方法 2010年7-11月在江苏省南京江宁区、溧水县,常州溧阳市,无锡宜兴市,淮安盱眙县和连云港东海县共采集2853份血清,其中人血清1922份、动物(犬、羊、猪、牛、鹅、鼠和鸡)血清931份,运用双抗原夹心ELISA法检测血清中SFTSV总抗体,并进行不同地区SFTSV总抗体阳性率比较。结果本次调查2853份血清样本中SFTSV总抗体阳性血清121份,阳性率为4.24%,提示江苏省存在SFTSV的流行。在7种被调查的动物样本中,5种动物(犬、羊、牛、猪、鸡)血清样本SFTSV总抗体阳性,阳性率分别为6.40%、57.14%、31.82%、5.33%和0.98%;人血清中SFTSV总抗体阳性率为0.94%。血清中SFTSV总抗体阳性率存在地区差异。人群与动物SFTSV血清总抗体阳性率存在正相关关系。结论江苏省是SFTSV的流行区域,需加强SFTSV的预防意识及诊断能力。
- 张文帅曾晓燕周明浩焦永军温恬郭喜玲祁贤史智扬
- 关键词:发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒血清流行病学调查