焦永军
- 作品数:125 被引量:285H指数:7
- 供职机构:江苏省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白定量检测试剂盒
- 本发明公开了一种可定量检测发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白的试剂盒,该试剂盒包括针对发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白Gc的两个单克隆抗体,通过双抗体夹心ELISA法实现检测发热伴血小板减少综合征病毒糖蛋白的目的。本发明的...
- 朱凤才曾晓燕焦永军史凤娟刘静娴史智扬
- 一种抗StxII单克隆抗体
- 本发明公开了一种抗StxII单克隆抗体,所述单克隆抗体其重链氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2,轻链氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.4,其中重链可变区序列中的互补决定区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列...
- 焦永军曾晓燕郭喜玲史智扬汪华周明浩
- 文献传递
- 重要传染病快速检测试剂和治疗性抗体药物的研制
- 朱进焦永军冯振卿林红朱旭辉张誌曾晓燕唐奇郭喜
- 该项目针对严重威胁人类健康的30种传染病病原体和4种细菌毒素开展相关研究,研制35个抗原或抗体检测试剂,获得国家医疗器械注册证书17个,筛选24个人源或人源化的特异性中和抗体;申报国家发明专利21项,获得国家授权的发明专...
- 关键词:
- 关键词:传染病检测试剂
- 基于逆转录-环介导等温扩增技术快速检测发热伴血小板减少综合征病毒方法的建立被引量:5
- 2014年
- 目的建立1种快速、特异、灵敏的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)的检测方法。方法针对SFTSV M基因保守区域的核酸序列,设计逆转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)特异性引物,优化反应体系和条件。用毛细管电泳法和横向流动试纸条(LFD)法检测扩增产物,建立RT-LAMP检测方法。进行敏感性、特异性检验,并与Real-time RT-PCR法进行比较。结果以LFD法和毛细管电泳法检测RT-LAMP扩增产物具有相同的敏感性和特异性;RT-LAMP-LFD检测SFTSV的敏感性为10copies RNA分子/反应,且与其他病毒无交叉反应。RT-LAMP-LFD和Real-time RT-PCR检测临床标本阳性率差异无统计学意义(P>0.05),2种方法一致性好(Kappa=0.918)。结论建立的RT-LAMP方法快速、简单、操作简单,具有较高的敏感性和特异性,适合应用于基层单位和现场SFTSV的快速检测。
- 葛以跃赵康辰崔仑标戚宇华郭喜玲陈银焦永军史智扬周明浩
- 关键词:发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒
- 结缔组织生长因子ELISA定量检测方法的建立及初步应用被引量:1
- 2011年
- 目的:建立定量检测人结缔组织生长因子(CTGF)双抗体夹心ELISA方法,并应用此方法检测人血清中CTGF含量。方法:利用简易过碘酸钠法对纯化的抗CTGF单克隆抗体(mAbs)进行HRP标记后,行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度;以纯化的CTGF抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法。用该方法初步对正常人、HBsAg阳性非肝癌患者及HBsAg阳性肝癌患者血清中的CTGF水平进行检测。结果:最佳配对组合为抗CTGFmAb3H5和HRP标记的抗CTGFmAb4C5,最适工作浓度分别为40μg/ml和1/4000,该方法的平均批内、批间变异系数分别为4.59%和5.70%,灵敏度达1.46 ng/ml,平均回收率为(98.73±4.84)%。用本方法测定35例HBsAg阳性肝癌患者、76例HBsAg阳性非肝癌患者和40例正常人血清CTGF水平,与正常对照组[2.65(2.16~3.18)ng/ml]比较,HBsAg阳性非肝癌组[5.53(2.74~8.23)ng/ml]和HBsAg阳性肝癌组[8.27(4.81±13.65)ng/ml]血清CTGF水平均显著升高(P<0.001);且HBsAg阳性肝癌组与HBsAg阳性非肝癌组比较也明显升高(P=0.014)。结论:建立了一种可用于检测人CTGF的双抗体夹心ELISA方法。初步应用结果表明CTGF水平在HBsAg阳性肝癌患者血清中较HBsAg阳性非肝癌患者、正常人异常升高,提示CTGF分子有望成为HBsAg阳性肝癌早期预警标志物。
- 詹峰曾晓燕张晓徐言张建平焦永军
- 关键词:肝细胞性肝癌结缔组织生长因子ELISA标志物
- 基于血凝素蛋白特异性抗体的H7亚型流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法建立
- 2023年
- 目的基于H7亚型流感病毒,制备针对于HA抗原的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA检测体系,为其在流感病毒快速检测试剂研发中提供技术储备。方法用H7亚型禽流感病毒HA重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤技术制备HA特异性单克隆抗体,筛选可在双抗体夹心ELISA技术平台上使用的配对抗体,初步探索该ELISA体系的检测特异性、敏感性和广谱性。结果共制备出6株HA特异性单克隆抗体,并成功筛选出捕获抗体8B11-C9及检测抗体7C3-G5的最佳配对。该双抗体夹心体系对HA重组蛋白的检测灵敏度可达到1.56 ng/mL,能有效检测出不同宿主来源的H7亚型流感病毒,与其他亚型流感病毒无交叉。结论成功制备出H7亚型流感病毒HA单克隆抗体,建立了H7亚型流感病毒特异性的双抗体夹心ELISA检测方法,为其快速检测试剂研发奠定了基础。
- 王泽敏祁贤鲍倡俊焦永军卫平民
- 关键词:HA蛋白双抗体夹心ELISA
- 检测I型志贺毒素双抗夹心法酶联免疫试剂盒及其应用
- 本发明涉及一种检测I型志贺毒素(StxI)双抗夹心酶联免疫检测试剂盒及其应用。本发明通过杂交瘤技术共获得4株针对StxI A亚单位的单克隆抗体,并将制备的4株单克隆抗体彼此配对,从中筛选出非竞争性的两株单抗,分别为8E7...
- 曾晓燕焦永军史凤娟史智扬
- 文献传递
- H7N9亚型禽流感病毒核蛋白NP原核表达载体的构建与表达被引量:1
- 2014年
- 目的构建甲型H7N9禽流感病毒NP基因的原核表达载体,并表达其编码重组蛋白。方法 RT-PCR法扩增H7N9病毒NP基因,克隆至原核表达载体PET28a(+)中,构建表达载体PET28a(+)-NP质粒;经PCR、双酶切、测序鉴定后,将PET28a(+)-NP质粒转化表达菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达NP重组蛋白。应用western blot法鉴定NP蛋白的表达。结果成功构建NP基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达出分子量为56kD的NP重组蛋白。结论实现了禽流感病毒H7N9NP重组蛋白在原核系统中的高效表达,为禽流感诊断试剂及单抗的研发工作奠定了基础。
- 张文帅张黎温恬迟莹黄超彭海燕焦永军史智扬
- 关键词:原核表达
- 甲型流感病毒高通量测序模板制备试剂盒及制备方法和应用
- 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种甲型流感病毒高通量测序模板制备试剂盒及其制备方法和应用。本发明所述试剂盒包含反转录引物混合物、反转录缓冲液、反转录酶、RNase H、第二链合成缓冲液及第二链合成酶。本发明根据甲型流感...
- 崔仑标葛以跃祁贤赵康辰郭喜玲戚宇华焦永军史智扬周明浩
- 文献传递
- 禽流感病毒H5N1亚型NS1蛋白的真核表达及其在细胞中的分布
- 2011年
- 为构建禽流感病毒(AIV)H5N1亚型非结构蛋白NS1的真核表达载体,并鉴定其在哺乳动物细胞中的表达与分布,本研究采用RT-PCR技术,从甲型流感病毒的总RNA中扩增NS1全长基因,并将其克隆于pXJ40中,构建真核表达载体pXJ40-HA-NS1。将该重组质粒转染293T细胞,通过western blot方法鉴定表达的NS1蛋白;并以免疫荧光技术观察NS1在H1299细胞中的分布与定位。Western blot结果显示NS1基因编码蛋白获得表达,免疫荧光检测显示NS1蛋白主要存在于细胞核中。本研究为NS1蛋白功能和H5N1亚型AIV致病机制的研究奠定了基础。
- 卞倩张文帅迟莹李燕焦永军
- 关键词:H5N1亚型禽流感病毒NS1真核表达