苗书魁
- 作品数：32 被引量：44H指数：3
- 供职机构：新疆畜牧科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 口蹄疫病毒表位嵌合蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达被引量：3
- 2014年
- 为了将口蹄疫病毒(FMDV)中和表位展示在病毒样颗粒(VLP)表面,以猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白为骨架,用FMDV O/Mya-98/2010毒株G-H环替换PCV2自身中和表位,构建嵌合衣壳蛋白CaO。为分泌表达CaO蛋白,在芽胞杆菌穿梭质粒pHCMC05的多克隆位点中顺次插入枯草芽胞杆菌P43启动子和中性蛋白酶B分泌信号肽(nprBsp),构建分泌型大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒p7257-P43。然后将合成的CaO基因插入p7257-P43质粒nprBsp的下游,构建分泌表达质粒p7257-P43-CaO。将该质粒转化枯草芽胞杆菌WB800,氯霉素诱导表达。上清经SDS-PAGE检测,嵌合蛋白CaO在枯草芽胞杆菌中得到表达。Western-blot证实,该蛋白具有反应原性。免疫电镜可观察到直径约15nm±2nm的VLP,表明嵌合蛋白在体外能有效组装。
- 任晓冰窦小龙魏婕苗书魁冉多良马文戈
- 关键词：口蹄疫病毒猪圆环病毒2型枯草芽胞杆菌
- 一种家畜养殖用撒料小推车
- 本实用新型公开了一种家畜养殖用撒料小推车，属于养殖技术领域。一种家畜养殖用撒料小推车，包括饲料斗，饲料斗底面设置有放料机构；放料机构包括连通有放料管，放料管端部设置有挡板，挡板上端与放料管端部通过合页连接，挡板表面两侧对...
- 于丽娟狄江艾尔肯·艾沙张艳花才加甫买力肯苗书魁姜文拉扎特玛尔孜娅阿米妮古丽薛晓波
- 口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建被引量：3
- 2014年
- 为制备Asia 1型口蹄疫病毒（FMDV）双层结构病毒样颗粒，选择牛病毒性腹泻病毒（BVDV）流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169～270位氨基酸和 FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白 VP1的第1～211位氨基酸，两者之间设计柔性肽连接，人工合成 p14-柔性肽-VP1融合蛋白编码序列，全基因长990 bp。合成基因与枯草芽胞杆菌表达载体 p7257-P43连接，构建成表达质粒 p7257-P43-P14-VP1。转化枯草芽胞杆菌 WB800，经筛选、鉴定，获得表达 p14-VP1融合蛋白的枯草芽胞杆菌。该重组表达菌在含有40μg/mL氯霉素的 LB中培养后，菌体超声破碎可检测到目的蛋白。Western blot 结果显示，该蛋白能特异性识别Asia 1型FMDV抗体，具有良好的反应原性。电镜观察显示，融合蛋白组装为直径约50 nm大小的病毒样颗粒（VLP）。
- 窦小龙任晓冰魏婕苗书魁冉多良马文戈
- 关键词：ASIA1型口蹄疫病毒病毒样颗粒融合蛋白枯草芽胞杆菌
- 牛源荚膜血清A1型溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量：3
- 2020年
- [目的]为探明一起牛运输热的病原及生物学特性,[方法]研究采集病死牛心血、肺脏,对其进行细菌分离、生化试验和PCR鉴定,并对分离株进行毒力基因检测、致病性研究。[结果]结果显示,该分离菌为革兰氏阴性菌,呈球状或短杆状、两端钝圆、两极浓染。生化试验结果显示,分离菌能发酵葡萄糖、麦芽糖、阿拉伯糖、甘露醇、甘露糖、乳糖、木糖等碳水化合物,不发酵脲酶和吲哚,产生少量酸而不产气,符合溶血性曼氏杆菌的生化特性。PCR鉴定为荚膜血清A1型溶血性曼氏杆菌,并完成了毒力基因的检测。[结论]结果表明,引起该批牛运输热的病原为携带毒力基因的荚膜血清A1型溶血性曼氏杆菌,本研究结果为进一步研究溶血性曼氏杆菌的致病机制、防控措施等提供参考。
- 汪阳薛晶赵洁雅汪萍沈辰峰苗书魁梁纪元马文戈张杨夏俊杜玮
- 关键词：生物学特性
- 绵羊痘病毒新疆株的分离及结构蛋白P32基因序列分析被引量：3
- 2015年
- 【目的】对绵羊痘病毒当地流行毒株的分离和其结构蛋白P32基因的克隆和序列进行分析,明确引起新疆本地绵羊流行痘病的病毒种类,掌握当前流行毒株的变异情况,为绵羊痘的预防控制及将来研制高效安全疫苗提供科学依据。【方法】将两例疑似患有羊痘的绵羊肺脏组织病料接种于MDBK细胞进行病毒分离,细胞病变组织经处理后通过电子显微镜观察分离病毒。以分离病毒基因组DNA为模板,通过PCR扩增绵羊痘病毒结构蛋白P32基因,并对目的基因进行克隆和基因序列和蛋白生物信息学分析。【结果】两例病料组织接种MDBK细胞后均产生明显的细胞病变,电子显微镜观察可见到约200 nm大小、椭圆形有囊膜的典型痘病毒粒子。对两株病毒表面膜结构蛋白P32基因PCR扩增均可获得与预期大小一致的约972 bp片段,氨基酸序列分析表明分离毒株SPV/Miquang/2013和SPV/Kuche/2013病毒P32基因与绵羊痘病毒参考株同源性分别达96.9%-99.4%和97.5%-100%,生物信息学分析发现SPV/Miquang/2013株P32蛋白有两个关键氨基酸位点发生变异,即第78位谷氨酸突变为赖氨酸,第293位异亮氨酸突变为苏氨酸。【结论】从疑似病例中分离到两株病毒,通过电镜观察及P32基因扩增测序,与其他羊痘病毒比对后鉴定分离毒株为绵羊痘病毒,分别命名为SPV/Miquan/2013和SPV/Kuche/2013。SPV/Miquan/2013的P32蛋白同其他绵羊痘病毒的两个氨基酸位点发生明显突变。
- 魏婕薛英苗书魁窦小龙任晓冰马文戈黄炯
- 关键词：绵羊痘病毒
- 以二抗为基底猪瘟抗体ELISA检测方法建立被引量：1
- 2017年
- 为验证以鼠抗猪IgG为基底,用辣根过氧化物酶标记猪瘟E2蛋白,建立的猪瘟抗体ELISA检测方法的可行性,对影响ELISA试验结果的主要条件进行优化。结果表明,鼠抗猪IgG最佳包被浓度为1μg/ml,酶标猪瘟E2蛋白最佳稀释度为1:500,最佳封闭液为1%BSA。建立的方法对猪蓝耳病阳性血清、猪圆环病阳性血清、猪亚洲1型口蹄疫阳性血清、猪O型口蹄疫阳性血清均无交叉反应。通过对50份试验样本的检测,对比该方法与商品化IDEXX的猪瘟病毒抗体检测试剂盒的符合性,试验结果表明,该方法检测猪瘟抗体的相对敏感性为76.9%(30/39),相对特异性为90%(45/50)。
- 刘丽娅汪萍苗书魁
- 关键词：猪瘟抗体ELISA方法
- 小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其生物信息学分析被引量：2
- 2017年
- 目的原核表达小反刍兽疫病毒(peste-des-petits ruminants virus,PPRV)N基因,评价其抗原性,并进行生物信息学分析。方法参照GenBank中登录的PPRV(Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),IPTG诱导N基因原核表达,表达产物进行SDS-PAGE及Western blot分析。运用Expasy Protparam和SOPMA软件对PPRV N基因编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果成功表达了PPRV N基因,其融合蛋白相对分子质量约64 400,主要以包涵体形式存在,并可被PPRV羊免疫血清特异性识别。PPRV N蛋白含524个氨基酸,相对分子质量约57 900,亲水性氨基酸占57.63%,疏水性氨基酸占42.17%,碱性氨基酸占12.21%,酸性氨基酸占14.12%,等电点理论值为5.11;亲水性平均系数为-0.296,不稳定系数为48.20;二级结构存在242个α螺旋(占46.18%),42个β转角(占8.02%),164个无规则卷曲(占31.3%),76个延伸链(占14.50%)。结论原核表达的PPRV N蛋白具有良好的特异性和抗原性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了参考。
- 苗书魁任方汪萍米晓云陆桂丽魏玉荣魏婕马文戈王延黄炯
- 关键词：小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达生物信息学分析
- 模拟应用条件检测小反刍兽疫活疫苗的病毒含量
- 2017年
- 为确保小反刍兽疫活疫苗在免疫接种时的效果。本试验模拟野外操作环境,在不同稀释液、不同温度和不同放置时间条件下,检测并比较小反刍兽疫活疫苗病毒含量。结果表明,以PBS、含1%冷水鱼明胶的生理盐水、生理盐水分别稀释疫苗,1%冷水鱼明胶的生理盐水更适合作为小反刍兽疫活疫苗的稀释液。疫苗以三种不同的稀释液稀释后,在4 h内,25℃或37℃条件下,不会影响其效价。
- 苗书魁米晓云陆桂丽夏俊魏玉荣魏婕王延马文戈汪萍黄炯
- 关键词：病毒含量
- 盐胁迫下两个亚麻品种幼苗的生理生化特性被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨两个亚麻品种(‘双亚5号’和‘范妮’)幼苗对盐胁迫的生理反应。方法:当‘双亚5号’和‘范妮’的种苗长出第二片真叶时,对其进行不同浓度的NaCl胁迫(0、70、100、150、200、250mmol/L),处理7d后研究其不同盐浓度胁迫下的丙二醛含量、过氧化物酶和过氧化氢酶活性、酯酶同功酶和过氧化物酶同功酶谱带变化。结果:获得了盐胁迫下‘双亚5号’和‘范妮’幼苗的生理生化数据和图谱。结论:在100mmol/LNaCl胁迫后,‘双亚5号’幼苗POD和CAT酶活性均达到峰值;在200mmol/L和100mmol/LNaCl胁迫后,‘范妮’幼苗的POD和CAT酶活性分别达到最大值。对于各组处理,‘范妮’幼苗的POD和CAT酶活性均明显高于‘双亚5号’幼苗的。因此,认为‘范尼’幼苗比‘双亚5号’幼苗更具耐盐潜力。
- 李文婷姜丽计巧灵苗书魁
- 关键词：NACL胁迫丙二醛含量CAT活性酯酶同功酶
- 泰勒焦虫重组蛋白TaSP-Tams1-SPAG1间接ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2013年
- 以真核表达的焦虫表面抗原重组蛋白TaSP-Tams1-SPAG1作为ELISA板包被抗原,通过方阵实验确定抗原包被浓度,探索抗原包被时间、温度、一抗及二抗血清稀释度及作用时间,建立牛环形泰勒焦虫表面抗原重组蛋白ELISA方法。结果得出TaSP-Tams1-SPAG1的最佳包被浓度为10μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100,ELISA阳性反应的临界值为OD492nm≥0.348,重复试验变异系数小于12%,所建立的ELISA方法不与牛巴贝斯虫及牛瑟氏泰勒虫血清发生反应。TaSP-Tams1-SPAG1为抗原建立的ELISA方法特异性强,敏感度高,重复性好,为牛环形泰勒焦虫病的准确检测及防治提供技术支持。
- 魏玉荣易忠马文戈郭会玲向银珍米晓云陈智魏婕苗书魁吴国梁祁巧芬埃尼瓦尔.太外库力黄炯
- 关键词：泰勒焦虫重组蛋白ELISA
