王一菱
- 作品数：56 被引量：223H指数：7
- 供职机构：郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：河南省自然科学基金国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 人消化系肿瘤染色质非组蛋白电泳图谱分析及免疫原性研究被引量：1
- 1990年
- 从人食管癌、胃癌、直肠癌、肝癌及胎儿肝和从距癌>5cm的癌旁作为对照组织的细胞核中,分别用0.4MNaCl盐提法、苯酚提取法和羟基磷灰石柱层析法提取染色质非组蛋白蛋白质,简称非组蛋白(NHP)进行电泳图谱分析并将不同方法提取的癌NHP作为抗原制备免疫血清做对比免疫组化反应。结果表明①用0.4MNaCl盐提之NHP的质和量更适于作为抗原制备免疫血清和进行免疫组化染色。②以上各种肿瘤NHP与其癌旁NHP之间均有质和量的差异。③不同肿瘤NHP具有组织特异性,然而各种瘤之间也具有相似的共性,即癌NHP之多加带主位于6万d～9万d;多变带区主位于4万d上下处(肝癌NHP之多变带区主位于5万d及8万d);而且肝癌NHP与胎肝NHP有相似处。结果提示癌NHP之多加或加深带可能与癌基因表达的激活有关;而缺如或减弱带可能与载有抗癌基因的染色体区带丢失或基因表达改变有关。
- 陈迪吴景兰王一菱白咸勇郑乃刚
- 关键词：消化系肿瘤
- 人表皮的生物工程适宜条件的探讨
- 目的探讨人表皮生物工程的适宜条件。方法以丝裂霉素C抑制增殖的NIH-3T3细胞作为滋养层。以热溶素分离表皮与真皮,并刮取真皮面的表皮细胞。将表皮应用4组不同浓度的胰蛋白酶(T)和EDTA(E) 消化液:组①:0．05％T...
- 杨小静李红文吴景兰王黎王一菱丁一
- 文献传递
- 针刺对豚鼠血淋巴细胞阿片样肽免疫组织化学反应影响的研究被引量：2
- 1988年
- 本文报道对64只豚鼠的血淋巴细胞,分别在电针、给予纳洛酮或外源性阿片样肽(OLP)等不同条件下,以PAP免疫组织化学法显示甲脑啡肽(MEK)、亮脑啡肽(LEK)及β-内啡肽(β-EP)的免疫反应(IR)。另对部分免疫组织化学标本,随后显示酸性非特异性酯酶(ANAE)。约96%的血淋巴细胞呈强弱不等的OLP阳性反应。甲脑啡肽强阳性反应淋巴细胞(MEK-IIRL)和β-EP强阳性反应淋巴细胞,与ANAE的点型淋巴细胞,均呈显著正相关;但LEK强阳性反应淋巴细胞与ANAE的点型淋巴细胞的相关不显著。电针豚鼠“足三里”穴后,MEK、LEK及β-EP的强阳性反应淋巴细胞计数均显著提高。将电针组、纳洛酮组和对照组的结果做比较,见3组间的OLP(包括脑啡肽和内啡肽)的强阳性反应淋巴细胞计数差别皆不显著。但当分别加10^(-7)mol/L MEK、LEK和β-EP体外孵育淋巴细胞后,纳洛酮对OLP强阳性反应淋巴细胞有抑制效应,纳洛酮组和电针组的OLP强阳性反应淋巴细胞计数均呈显著差异。在外加10^(-12)~10^(-3)mol/L MEK体外孵育淋巴细胞后,可见电针组比对照组在10^(-10)~10^(-3)mol/L浓度间MEK免疫反应呈现一个明显高峰,提示电针可能提高潜在未结合的MEK受体的活性。
- 吴景兰王一菱柴信美王希涛
- 关键词：针刺淋巴细胞免疫非特异性酯酶免疫组织化学
- 网滤和免疫实验技术分离人表皮干细胞群体的比较
- 2007年
- 目的:比较网滤法和免疫实验技术分离人表皮干细胞群体(SCP)的效果,并鉴定SCP的生物学特性。方法:对消化分离的人表皮单细胞悬液进行不同目数(240目、300目、350目)筛网过滤和ELISA及琼脂糖-4B(Sepharose-4B)柱层析的免疫实验技术分离SCP;以形态学、P63-免疫反应性(IR)/K19-IR生物标志和生物学特性进行SCP鉴定。结果:经300目/350目筛网过滤可分离出约50%的P63-IR细胞群体,应用2项免疫实验技术皆可分离出约90%的P63-IR/K19-IR的细胞群体;应用ELISA法分离出表皮细胞的接种数虽然低于仅经240目筛网过滤法,但表皮细胞融合时间却提前了5d(P均<0.05);而且融合后分化的表皮切片呈现复层,一些基层细胞呈现P63-IR阳性反应。结论:筛网过滤法分离效率虽较低,但操作简单;免疫实验技术分离效率较高,ELISA技术操作较方便,而Sepharose-4B柱层析技术较复杂。
- 王黎李红文吴景兰王一菱郑乃刚
- 关键词：生物学鉴定生物标志表皮
- 大鼠肥大细胞异质性的免疫组织化学观察被引量：7
- 1989年
- 目前对肥大细胞研究的焦点之一就是肥大细胞的异质性。本实验对比观察了大鼠皮肤结缔组织肥大细胞(CTMC)和胃肠粘膜肥大细胞(MMC)在甲苯胺兰染色性和细胞内肽类胺类物质免疫反应性方面的异同。结果表明:经甲醛固定的皮肤CTMC用甲苯胺兰常规染色即可显示,面臂肠MMC需低pH并延长染色时间才能显示;结果可见几乎全部皮肤CTMC免疫组织化学染色,显示5—羟色胺免疫反应性,仅10％的CTMC显示P物质免疫反应性:胃肠MMC的35％显示5-羟色胺免疫反应性,未见P物质免疫反应性。结果提示肥大细胞异质性不仅表现在甲苯胺兰染色,而且也表现在免疫组织化学染色上。
- 丰艳吴景兰王一菱
- 关键词：肥大细胞免疫组织化学
- 不同质量浓度胰蛋白酶和EDTA细胞消化分离液对人表皮细胞生长的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨人表皮生物工程的适宜条件。方法:以NIH-3T3细胞作为滋养层,以热溶素分离表皮与真皮,将表皮应用4组不同质量浓度的胰蛋白酶(T)和EDTA(E)的消化液(A组:0.5g/LT加0.2g/LE,B组:2.5g/LT加0.2g/LE,C组:0.5g/LT加1g/LE,D组:2.5g/LT加1g/LE)消化为单个细胞。表皮细胞接种于含8种成分的DMEM-F12的完全培养液中。记录接种表皮细胞的克隆形成率、扩增倍数以及融合时间。结果:接种表皮细胞的克隆形成率和扩增倍数分别是:A组为(10.00±0.09)%和(500.00±9.63)倍,B组为(7.00±0.12)%和(350.00±6.16)倍,C组为(17.00±0.18)%和(850.00±8.83)倍,D组为(14.00±0.19)%和(700.00±9.55)倍,4组间差异均有统计学意义(P<0.05)。接种表皮细胞的融合时间:A组为第(10.00±0.82)天,B组为第(10.00±0.82)天,C组为第(11.50±1.29)天,D组为第(12.00±2.45)天。4组的接种表皮细胞克隆形成率与融合时间无关。结论:同一质量浓度的EDTA作用下,0.5g/L胰蛋白酶组比2.5g/L胰蛋白酶组更有利于表皮细胞克隆的形成和融合。
- 杨小静李红文郑乃刚王一菱吴景兰
- 关键词：克隆形成率
- 睡眠剥夺促进大鼠海马神经元凋亡及相关基因表达被引量：9
- 2004年
- 探讨睡眠剥夺引起的神经元凋亡与相关基因表达的变化。采用TUNEL染色观察了快眼动睡眠剥夺大鼠海马神经元形态学变化 ,应用原位杂交、Westernblot法检测了快眼动睡眠剥夺大鼠海马bcl 2 ,baxmRNA ,MAPKs表达的变化。结果表明 :快眼动睡眠剥夺大鼠海马CA1 ,CA3区神经元阳性凋亡细胞数明显增多 ,bcl 2 ,baxmRNA表达明显增强 ,ERK活性降低 ,JNK蛋白表达量较对照组明显增高。提示睡眠剥夺可引起大鼠海马神经元凋亡。与凋亡相关的bcl 2 。
- 程江涛章茜乔鹏王书春王一菱吴景兰王雨若
- 关键词：睡眠剥夺海马神经元凋亡基因表达
- 表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽诱导人白细胞c-fos基因表达的研究
- 1997年
- 由健康人外周血分离淋巴细胞及溶血处理后的全白细胞,以外源性表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽培育后取细胞悬液制成滴片和滴膜,用生物素标记的c-fos cDNA探针进行原位杂交和斑点印迹杂交.结果显示表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽两组c-fos原癌基因的表达均较对照组增强(P<0.05).
- 史学义吴景兰丁一王一菱丰艳
- 关键词：C-FOS白细胞表皮生长因子甲硫氨酸脑啡肽
- 电针对豚鼠肾上腺环核苷酸免疫反应性的影响
- 1990年
- 应用PAP法对电针组(足三里穴)和对照组共38只豚鼠肾上腺环—磷酸腺苷免疫反应性(cAMP-IR)和环—磷酸乌苷免疫反应性(cGMP—IR)进行了观察。免疫阳性反应呈棕黄色颗粒,主要分布在细胞质和细胞膜内。电针组与对照组比较观察结果可见:电针组肾上腺cAMP—IR和cGMP—IR有显著性增强(P?0.05),而髓质cAMP—IR和cGMP-IR有增强,但不明显(P?0.05)。两组皮质cAMP—IR和cGMP—IR均比髓质强(P?0.05)。以上结果可表明电针“足三里”穴能引起肾上腺cAMP—IR和cGMP—IR显著性增强,髓质有增强。本文还对肾上腺cAMP-IR和cGMP-IR与髓质脑啡肽的相关性进行了分析。
- 柴信美吴景兰王一菱王希涛
- 关键词：肾上腺针刺
- 野生型DNA聚合酶β转染Eca-109细胞后增变基因表型变化被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨野生型DNA聚合酶β(polbeta)转染人食管癌Eca-109细胞后对其增变基因表型的效应。方法:将经过鉴定的重组pcDNA3.1质粒(插入野生型,wt)-polbeta转染培养的人食管癌Eca-109细胞。将Eca-109细胞分为3组:转染实验组(E)、空质粒转染对照组(C1)和未转染对照组(C2)。应用原位杂交技术显示wt-polbeta和wt-p53的杂交信号,免疫细胞化学染色显示POLB-免疫反应性(IR)和多药耐受(MDR1)-IR,免疫印迹显示wt-polbeta和突变(mt)-polbeta的带型,细胞化学技术检测各组细胞的增殖与分化细胞的比率。结果:polbeta免疫印迹结果显示E组呈现增强的wt-polbeta主带,C1、C2组呈现很弱wt-polbeta主带和显著突变的(mt)-polbeta主带(P<0.01);polbeta免疫细胞化学结果显示E组的强信号定位于细胞核内,C1、C2组信号皆很弱(P<0.01)。E组的wt-polbeta及wt-p53原位杂交的信号强于C1、C2组(P<0.01)。E组MDR1的免疫反应性和增殖与分化细胞的比率低于C1、C2组(P<0.01)。结论:wt-polbeta转染的Eca-109细胞呈现wt-polbeta及wt-p53表达上调而mt-polbeta及MDR1表达下调的增变基因表型减弱。
- 郑乃刚高涵昌吴景兰裴迎新王一菱董子明
- 关键词：转染ECA-109细胞
