毛建平
- 作品数:81 被引量:330H指数:10
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 小鼠淋巴细胞抗原CTLA-4的胞外肽段表达及纯化被引量:1
- 2010年
- 目的:真核细胞表达小鼠淋巴细胞抗原CTLA-4胞外段肽,研究表达肽段与抗原呈递细胞B7分子结合后减轻小鼠淋巴细胞刺激后的增殖抑制,从而启动T淋巴细胞进一步增殖。方法:从小鼠脾脏淋巴细胞获得总RNA,通过逆转录PCR扩增出CTLA-4全长基因,克隆并测序。依据胞外段序列和真核表达载体pcDNA3.1序列,合成引物扩增胞外片段,两者经内切核酸酶处理、连接构建重组表达pcDNA3.1载体,重组质粒经测序验证后,采用lipofectamine2000转染入小鼠肝癌细胞Hepa1-6,经G418筛选获得稳定表达细胞株。结果:获得小鼠CTLA-4胞外段真核表达载体和小鼠肝癌细胞Hepa1-6稳定表达转染细胞株,制备了CTLA-4胞外肽段,经His标签抗体和小鼠CTLA-4抗体Westernblot检测表达蛋白带均呈阳性。结论:获得CTLA-4胞外段肽,为进一步研究该肽的作用打下基础。
- 方静周颖李智慧达飞胡要磊毛建平
- 关键词:CTLA-4真核表达PCDNA3.1T淋巴细胞
- 致死剂量的γ线照射后小鼠胸腺淋巴细胞的凋亡规律及与bax、bcl-2和Bcl-X_L表达的关系被引量:15
- 2004年
- 目的 :观察致死剂量γ线照射后小鼠胸腺淋巴细胞凋亡特征及与Bax、Bcl 2和Bcl XL 蛋白和mRNA表达的关系 ,为急性重度以上放射病的治疗提供依据。方法 :清洁级C5 7小鼠 2 5 0只 ,随机分为 0、6、9、12、15和 2 0Gy 6个剂量组。经γ线全身 1次照射后 ,于照射后 1~ 2 8d和 3~ 12个月 ,活杀取胸腺和外周血 ,用原位末端标记 (TUNEL)和麦格 姬姆萨 (MGG)染色检测胸腺淋巴细胞的凋亡 ;用原位杂交和碱性磷酸酶免疫组化染色法 ,检测Bax、Bcl 2和Bcl XL mRNA和其蛋白的表达。结果 :(1)各剂量组小鼠外周血白细胞在照射后 6h ,出现一过性的升高 ,以后迅速下降。 6Gy照射后 7d降至最低 ,至照射后 2 8d基本恢复到正常水平。 (2 )不同剂量的γ线照射后 2 4h,胸腺淋巴细胞的凋亡率迅速升高 ;在 6~ 12Gy范围内与照射的剂量呈正比 ,≥ 15Gy照射后变化不明显。 (3) 6Gy照射后 2 4h,胸腺淋巴细胞的凋亡率达高峰 ,而后开始降低 ;但直至照射后 6个月和 12个月 ,凋亡率仍明显高于对照组。 (4 ) 6Gy照射后 3h ,胸腺淋巴细胞中Bax蛋白的表达即出现增加 ,至 2 4h达峰值 ,显示出时效关系 ;而Bcl 2蛋白于照射后 3h即明显下降 ,2 4h降至最低 ;Bcl XL 蛋白也在照射后 2 4h降至最低。bax和bcl 2mRNA的检测与蛋白水平的检测一致。结?
- 崔玉芳丁彦青徐菡姜竺君柳晓兰董波毛建平
- 关键词:胸腺凋亡BAXBCL-2
- mRNA结构靶点筛选新方法RASS的研究
- 尽管反义核酸、Ribozyme、DNA enzyme以及双链RNA干涉小分子与mRNA分子在一级结构上严格按Watson-Crick碱基匹配原则互补配对发挥作用,然而能有效结合发挥作用的却是那些接近mRNA分子高度折叠结...
- 毛建平
- 关键词:MRNA靶点反义核酸基因药物
- 文献传递
- 龙脑液导致癌细胞凋亡的实验研究
- 细胞的死亡有两种主要方式,即细胞坏死与细胞凋亡(apoptosis)。细胞凋亡是近年来逐渐被认识的一种细胞死亡方式,在生物进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。凋亡过程的紊乱可能与许多疾病的发生有直接或间...
- 毛建平方静李菲菲马琼付辉
- 关键词:肺鳞癌鼻咽癌凋亡
- 文献传递
- 长片段PCR扩增DNA损伤监视枢纽元件atm基因cDNA
- 1999年
- 毛细血管扩张-共济失调症(ataxia-telangiectasia,AT)是由位于染色体11q22-11q23的atm基因缺陷所致累积多组织器官损伤的人类遗传病。atm功能异常与肿瘤发生、免疫缺陷及生殖障碍密切相关。我们对atm基因进行了克隆。1材...
- 孟祥兵巩波毛建平董燕孙志贤
- 关键词:ATM基因克隆DNA损伤CDNAPCR扩增
- 人AHH1 T淋巴细胞辐射死亡与凋亡的关系及其意义
- 2003年
- 应用原位末端标记(TUNEL)和麦格-姬姆萨(MGG)染色和MTF比色法研究辐射诱导的人AHH-IT淋巴细胞死亡与凋亡的关系、细胞活存及其意义。结果表明,经2~10 Gy γ-线照射后4~48 h,随着照射剂量的增加和照后时间的延长,淋巴细胞凋亡指数明显升高,显示出较好的剂量和时间效应关系;而相同剂量照射后,淋巴细胞活存率随照射剂量增加而明显减少。上述结果表明,在一定照射剂量范围内,凋亡是辐射诱导淋巴细胞死亡的重要原因之一。
- 崔玉芳张莹张飒柳晓兰王利红毛建平杨怡谷庆阳徐菡应丽娟孙启鸿
- 关键词:原位末端标记MTT比色法
- 炎症反应中的microRNAs及其在TLR信号通路中的调控作用被引量:6
- 2013年
- MicroRNAs(miRNAs)在炎症反应中发挥重要的调节作用,其作用机制及调节特点在免疫系统中具有独特性。近年大量研究发现,miRNA能与Toll样受体/核因子κB(TLR/NF-κB)信号通路中众多靶基因mRNA结合,在免疫识别和炎症反应中发挥调控作用。本文就miRNA在炎症反应中的特点,特别是miRNA对TLR/NF-κB信号通路的调控作用进行了综述。
- 方静杜丽付辉李菲菲韩立坤毛建平
- 关键词:微RNAS炎症TOLL样受体NF-ΚB
- 辐射诱发的人AHH-1 T细胞损伤特点及机制探讨
- 目的:探讨辐射诱发的人AHH-1 T 细胞损伤的特点及其与线粒体跨膜电位和活性氧产生之间的关系。方法:AHH-1 T 细胞经6GyCo γ射线照射后在6、12、24、48和72小时分别进行细胞存活率检测(MTT)、细胞凋...
- 王子兵崔玉芳郭瑛徐菡姜竺君靳巍董波毛建平
- 文献传递
- mRNA靶点筛选方法研究进展被引量:18
- 2003年
- mRNA靶点筛选问题是反义核酸领域的一个难题。近年来出现了多种筛选mRNA上可接近位点以确定靶位点的方法 ,包括mRNA实测分析法和计算机模拟分析两大类。其中mRNA实测分析法又包括多种针对自然折叠mRNA的实验分析技术 ;即基因walk技术 ,RNaseH作图技术、寡核苷酸微阵列技术 ,酶作图法确定二级结构技术 ,核酶导向型随机RNA库位点筛选技术和随机寡核苷酸库结合逆转录位点筛选技术。这些方法在鉴定RNA可接近位点及反义核酸的设计方面均有重要作用。
- 王全会毛建平
- 关键词:MRNA反义核酸
- 寡核苷酸文库小片段序列的高效快速测定方法
- 本发明涉及生物学领域,发明了寡核苷酸文库小片段序列的连接测定方法:通过将文库小片段序列连接进行序列测定,达到1次序列测定反应可以获得10至30条左右文库小片段序列的目的,相当于发明前10至30次序列测定反应功效,其费用约...
- 毛建平王利红王全会柳晓兰
- 文献传递