朱海波
- 作品数：14 被引量：26H指数：3
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 蓝氏贾第鞭毛虫检测方法的研究进展被引量：3
- 2010年
- 蓝氏贾第鞭毛虫是一种重要的水源性人兽共患的寄生原虫，可致人和动物的腹泻。传统的检测方法主要为粪便检查，随着免疫学与分子生物学技术的应用，其免疫学检测和分子生物学检测近年来有了较大的发展。该文就上述研究进展进行综述。
- 朱海波李国清
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫病原学检测免疫学检测分子生物学检测
- 用于检测蓝氏贾第虫人畜共患基因型的HRM引物及其应用
- 本发明公开了一种用于检测蓝氏贾第虫人畜共患基因型的HRM引物及其应用。HRM引物的核苷酸序列为：TPI1：5'-CTTCATCGGYGGTAACTT-3'，TPI3：5'-GGCACGCTTMGCCTTCTT-3'；TP...
- 李国清张萍李结刘远佳李雅文朱海波米多
- 猴源环孢子虫巢式PCR检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 环孢子虫是一类可引起人和动物腹泻的重要寄生性原虫。为建立猴源环孢子虫的巢式PCR检测方法,根据该环孢子虫18S rDNA基因序列,设计一对保守引物N18SA/N18SS和一对特异性引物CYJS/CYJA,通过阳性质粒摸索该检测方法的最佳反应条件,进行特异性和敏感性试验,并应用该方法对87份猴粪样本进行了临床检测。结果显示该巢式PCR能特异性地扩增出猴源环孢子虫目的片段,与微小隐孢子虫、阿米巴原虫等8种DNA无交叉反应,最低能检测0.2 fg的阳性质粒DNA,对临床样本的检出率比传统方法（饱和蔗糖漂浮法和改良抗酸染色法）提高2.3%~3.4%。可见,该巢式PCR方法具有较高的特异性和敏感性,对于环孢子虫病的诊断和分子流行病学调查具有重要的应用价值。
- 高振永李国清岳彩玲程家林朱海波李结
- 关键词：巢式PCR
- 犬源环孢子虫的ITS-1序列鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的对犬粪中新发现的环孢子虫进行分子鉴定。方法在GenBank中登录的环孢子虫18S和5.8S rDNA序列的保守区设计一对引物ITS-1+F/ITS-1+B,扩增犬源环孢子虫ITS-1+序列;将扩增产物纯化并连接到质粒载体pMD19-T,克隆转入感受态细胞JM109,挑选阳性克隆测序并进行相似性比较和种类鉴定。结果犬源环孢子虫ITS-1+序列长为547bp,包含58bp的18S rDNA序列,333bp的ITS-1序列和156bp的5.8S rDNA序列。其中的18S rDNA和5.8S rDNA与艾美耳科原虫的相似性最大;其中的ITS-1序列与人源环孢子虫、牛源环孢子虫、狒狒源环孢子虫均不相同。结论该犬源环孢子虫可能为环孢子虫属的一个新种。
- 岳彩玲李国清程家林高振永朱海波李结
- 关键词：PCR分子鉴定
- 一种利用多重PCR检测鸭粪中三种原虫的方法
- 本发明涉及PCR检测领域，具体涉及一种利用多重PCR检测鸭粪中三种原虫的方法，其中所述原虫为贝氏隐孢子虫、环孢子虫和菲莱氏温扬球虫。本发明检测方法是根据鸭环孢子虫ITS-1基因，菲莱氏温扬球虫18S rRNA基因和贝氏隐...
- 李国清程家林岳彩玲高振永刘霞朱海波
- 一种利用多重PCR检测鸭粪中三种原虫的方法
- 本发明涉及PCR检测领域，具体涉及一种利用多重PCR检测鸭粪中三种原虫的方法，其中所述原虫为贝氏隐孢子虫、环孢子虫和菲莱氏温扬球虫。本发明检测方法是根据鸭环孢子虫ITS-1基因，菲莱氏温扬球虫18S rRNA基因和贝氏隐...
- 李国清程家林岳彩玲高振永刘霞朱海波
- 文献传递
- 犬源蓝氏贾第虫的分离鉴定及巢式PCR检测方法的建立
- 贾第鞭毛虫是一种普遍存在的肠道寄生原虫,可感染世界各地的家畜和野生动物包括人类,引起人和动物的腹痛和腹泻。本论文首次对广东犬粪中发现的贾第虫包囊进行了形态学观察和分子鉴定,并建立了相应的巢式PCR检测方法。
首先对...
- 朱海波
- 关键词：贾第鞭毛虫基因型巢式PCR检测
- 两株犬源贾第虫tpi基因的基因型分析被引量：2
- 2011年
- 采用巢式PCR鉴定广东两株犬源贾第虫(GD1和GD2)的基因型。运用碘液染色对犬粪便中贾第虫进行鉴定,提取DNA后经巢式PCR扩增tpi基因,扩增产物测序后用BLAST和DNAStar软件进行同源性和系统发育分析。结果表明,通过tpi基因分析,GD1与L02120的同源性为100%,种系发育树上位于同一分支;GD2与DQ220289的同源性为99.1%,种系发育树上两者在同一分支。广东犬源贾第虫GD1为人畜共患的A1型,GD2为犬的D型。
- 张萍朱海波李结李金平刘远佳郭建超孟祥龙李国清
- 关键词：贾第虫巢式PCR
- 菲莱氏温扬球虫18S rDNA基因的扩增与克隆分析被引量：3
- 2010年
- 菲莱氏温扬球虫是鸭球虫病的重要病原之一,为了寻找种特异性的遗传标记,本研究采集广东省某鸭场的新鲜鸭粪,通过Sheather’s蔗糖漂浮法收集球虫卵囊,经形态学鉴定为菲莱氏温扬球虫;提取该球虫DNA样品,经过PCR扩增,首次获得了该虫的18S rDNA基因部分片段;对该基因进行了克隆和测序,比较了该虫株与其他原虫的亲缘关系。结果显示,对菲莱氏温扬球虫序列与艾美耳科其他球虫关系较近,系统进化树分析属于艾美耳科的另一分支。表明18S rDNA基因在鸭菲莱氏温扬球虫的分类鉴定上是一种有效的分子标记。
- 程家林李国清徐前明岳彩玲高振永朱海波刘霞
- 关键词：形态学RDNAPCR
- 广东首株犬源贾第虫的基因型鉴定被引量：7
- 2011年
- 为了对广东首株犬源贾第虫进行分离鉴定,采用常规方法分离犬粪便中的贾第虫包囊,通过显微镜观察对其进行形态学鉴定,并以小亚基核糖体RNA(16SrRNA)基因和谷氨酸脱氢酶(gdh)基因作为遗传标记,采用PCR方法对其进行了扩增、克隆、序列测定和分析。将扩增序列与GenBank中登录的参考序列进行比对,并用DNAStar软件建立系统进化树,以确定该贾第虫的基因型。结果显示,显微镜观察的结果与所报道的蓝氏贾第虫的形态一致;PCR扩增产物经10g/L琼脂糖凝胶电泳检测,出现299和432bp的片段,与预期结果一致;16SrRNA基因的序列分析结果显示该犬源贾第虫的基因型为A型,对gdh基因序列的进一步分析显示该基因型为A1亚型。结果表明本次分离的犬源贾第虫属于蓝氏贾第虫人兽共患的基因型。关键词:犬;蓝氏贾第虫;
- 朱海波李国清张萍李结李金平蔺智兵
- 关键词：蓝氏贾第虫基因型
