朱恒梅
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
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- NADPH氧化酶在TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质积聚中的作用
- 目的观察TGF-β1对肾小管上皮细胞(NRK-52E) NADPH氧化酶表达、反应性氧基(reactiveoxygenspecies, ROS)产生、肾小管上皮细胞转分化、细胞外基质代谢的影响,探讨NADPH氧化酶在TG...
- 张海燕姜宗培常洁朱恒梅余学清
- 文献传递
- NADPH氧化酶在TGF-β_1诱导大鼠小管上皮细胞表达炎症因子中的作用被引量：5
- 2008年
- 【目的】观察转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及白细胞介素-6(IL-6)表达的影响,并探讨NADPH氧化酶在其中的作用。【方法】以大鼠肾小管上皮细胞株(NRK-52E)为研究对象,采用TGF-β1(10ng/mL)刺激0h,2h,4h,8h,12h,24h分别收取RNA;刺激0h,12h,24h,48h,72h分别收取细胞上清液;部分实验中培养的细胞在刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI(0.1,1,5,10μmol/L)预处理1h,然后含10ng的TGF-β1无血清DMEM/F12培养液分别培养12h(收集RNA)和24h(收集细胞上清液)。所有实验重复3次。细胞内活性氧(ROS)的产生采用激光共聚焦显微镜观察。NADPH氧化酶p22phox、gp91phox、p47phox和p67phox亚单位以及MCP-1和IL-6mRNA的表达采用RT-PCR检测。细胞上清液中MCP-1的含量采用ELISA检测。【结果】TGF-β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达,8h为对照的2.43倍(P<0.01),24h达3.59倍(P<0.01)。但对p22phox、gp91phox和p47phox亚单位mRNA表达无显著影响。TGF-β1可显著增加细胞内ROS产生,DPI预处理后ROS产生较TGF-β1刺激组降低了43.69%(P<0.05)。TGF-β1可显著上调MCP-1和IL-6mRNA及蛋白的表达。DPI预处理可明显逆转TGF-β1诱导的MCP-1和IL-6的上调表达。【结论】TGF-β1可促使细胞ROS产生增加。TGF-β1可能通过NADPH氧化酶依赖的ROS介导了大鼠肾小管上皮细胞MCP-1及IL-6的上调表达。
- 张海燕姜宗培常洁李晓艳朱恒梅余学清
- 关键词：NAD(P)H氧化酶单核细胞趋化蛋白-1
- NADPH氧化酶介导血管紧张素Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化及细胞外基质积聚被引量：4
- 2007年
- 目的 探讨NADPH氧化酶在血管紧张素（Ang）Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞转分化以及细胞外基质积聚中的作用。方法 体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24 h后,随机分为以下4组：正常对照组,AngⅡ（10^-7 mol/L）组,AngⅡ＋Los（洛沙坦,10μmol/L）组及AngⅡ＋DPI（NADPH氧化酶活性抑制剂,10μmol/L）组。应用荧光染料（DCF）及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧（ROS）的产生。RT-PCR检测NADPH氧化酶亚单位p47phox以及纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）1、α平滑肌肌动蛋白（SMA）、E钙黏蛋白（cadherin）mRNA的表达。Western印迹检测p47phox、α-SMA的蛋白表达。结果 （1）外源性AngⅡ可显著增加大鼠腹膜间皮细胞ROS的产生,刺激15 min后,ROS的表达较对照组上升了（3．64±0．53）倍。DPI和洛沙坦可显著抑制AngⅡ刺激后ROS的产生（P＜0．05）。（2）AngⅡ刺激腹膜间皮细胞后, NADPH氧化酶亚单位p47phox mRNA和蛋白的表达均呈上升趋势。洛沙坦和DPI可阻断由AngⅡ诱导的p47phox表达上调（P＜0．05）。（3）AngⅡ诱导α-SMA表达的上调以及E-cadherin mRNA的下调,洛沙坦和DPI可部分逆转AngⅡ的这种作用。（4）AngⅡ刺激8 h后可明显上调PAI-1的mRNA表达,为正常对照组的（3．06±0．77）倍。洛沙坦和DPI可明显阻断PAI-1的表达上调（P＜0．05）。结论 NADPH氧化酶依赖产生的ROS介导了AngⅡ诱导的腹膜间皮细胞转分化及细胞外基质积聚。阻断AngⅡ的作用及抑制NADPH氧化酶的表达和活性可作为防治腹膜纤维化的潜在治疗靶点。
- 常洁姜宗培张海燕朱恒梅余学清
- 关键词：腹膜NADPH氧化酶间皮细胞
- NADPH氧化酶在转化生长因子β1诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用被引量：4
- 2007年
- 目的探讨NADPH氧化酶在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）转分化中的作用。方法用TGF-β1（10μg/L）刺激NRK-52E细胞不同时间,观察α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI- 1）及Ⅰ型胶原（Col-Ⅰ）的表达。部分实验中细胞在TGF-β1刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI预处理1 h。用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧（ROS）的产生。用RT-PCR方法检测NADPH氧化酶p22phox、gp91phox、p47phox和p67phox亚单位mRNA的表达。α-SMA、E-cadherin、PAI-1及Col-ⅠmRNA及蛋白的表达分别采用RT-PCR、Western印迹和细胞免疫化学检测。结果TGF-β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达,8 h及24 h时分别为对照组的2.43倍及3.59倍（P〈0.01）。TGF-β1可显著促进细胞ROS的产生,5 min时已是对照组的2.5倍（P〈0.05）。DPI预处理同时可显著逆转TGF-β1诱导NRK-52E细胞ROS的产生（P〈0.05）、α-SMA的表达上调、E-cadherin的表达下调以及PAI-1和Col-Ⅰ的表达上调。结论TGF-β1可促进NRK-52E细胞增加ROS的产生。ROS介导了TGF-β1诱导NRK-52E细胞的转分化,促进肾脏纤维化。
- 张海燕姜宗培常洁李晓艳朱恒梅董秀清余学清
- 关键词：转化生长因子Β1NADPH氧化酶肌成纤维细胞转分化
- NADPH氧化酶在血管紧张素Ⅱ诱导的腹膜纤维化中的作用
- 目的观察血管紧张素Ⅱ对腹膜间皮细胞NADPH氧化酶表达、反应性氧基(reactiveoxygenspecies,ROS)产生、细胞外基质代谢的影响,探讨NADPH氧化酶在血管紧张素Ⅱ诱导的腹膜间皮细胞细胞外基质积聚和腹膜...
- 常洁姜宗培张海燕朱恒梅余学清
- 文献传递
