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机构

  • 3篇华南农业大学

作者

  • 3篇孙益嵘
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  • 2篇罗彪
  • 2篇朱磊
  • 2篇陈艺彩
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  • 1篇汪玲玲
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传媒

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  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2008
  • 2篇2007
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
Disrupted ompC Causes Osmosis Sensitivity of Escherichia coli in Alkaline Medium
2007年
The Escherichia coli strain DH42 is sensitive to high osmolarity in an alkaline medium. Using mini-Tn5 mutagenesis, construction of mutant strains by homologous recombination and subcloning of DNA fragment techniques, gene ompC was identified as the key factor that, once disrupted, caused osmosis-sensitivity of E. coli strain DH42 grown in an alkaline medium. Through P1 transduction, a mutant strain, D9 (W3110 ompC:kan), was constructed and growth comparison was performed between DH42 and D9 under different pHs and salt concentrations. The result showed that ompC was necessarily required for hyperosmotic adaptation of E. coli in the alkaline medium.
王玉琪汪玲玲孙益嵘陈艺彩朱磊郭丽霞罗彪王海洪
关键词:OMPCOSMOLARITYALKALINEPH
粪肠球菌(Enterococcus faecalis)β酮脂酰ACP合成酶Ⅱ同源蛋白功能分析被引量:3
2007年
FabB和FabF是大肠杆菌(Escherichia.coli)脂肪酸合成的关键酶.生物信息学分析显示,粪肠球菌基因组中有2个与大肠杆菌fabF同源的基因:fabF1和fabF2,缺少与fabB同源的基因.用粪肠球菌(Enterococcus faecalis)V583总DNA为模板,PCR扩增fabF1和fabF2基因,以pBAD24为载体,构建了重组质粒pHW13(fabF1)和pHW14(fabF2).体内体外研究显示:fabF1基因能互补大肠杆菌fabB突变,FabF1具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性;fabF2能互补大肠杆菌fabF突变,FabF2具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅱ(FabF)活性.同时发现粪肠球菌FabF2不同于大肠杆菌FabF,它还拥有微弱β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性,可使大肠杆菌fabB突变株产生少量的不饱和脂肪酸.上述结果表明,FabF类酶(FabF like enzyme)同样可以具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性.
王玉琪孙益嵘陈艺彩王海洪
关键词:粪肠球菌
大肠杆菌(Escherichia coli)体外脂肪酸合成反应的重建被引量:4
2008年
PCR扩增大肠杆菌参与脂肪酸合成的7个主要酶基因:fabD、fabG、fabH、fabA、fabZ、fabB和fabI,并构建相应的表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中分别诱导表达酶蛋白,并使用Ni-NTA琼脂糖纯化到7种酶蛋白.体外添加所需酶蛋白和辅因子,在不使用[2-14C]丙二酸单酰CoA的条件下,成功地实现了脂肪酸合成反应的重建,另外还建立了数个鉴定有关酶蛋白功能的标准反应,并用其鉴定了丙酮丁醇梭菌FabZ的功能.
冯赛祥朱磊罗彪孙益嵘王海洪
关键词:非变性聚丙烯酰胺凝胶
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