姚庆苹
- 作品数：40 被引量：31H指数：4
- 供职机构：上海交通大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学金属学及工艺航空宇航科学技术更多>>
- 张应变调控的circ-Plscr2/miR-17-92/Lamtor1通路在静脉移植血管重建中的力学生物学作用
- 2019年
- 目的临床上常用自体静脉血管作为冠状动脉旁路移植术的供体,然而动脉力学环境诱导移植后静脉内膜异常增生可能引起术后血管再狭窄甚至阻塞病变。本研究旨在探讨张应变通过内源性竞争机制(ceRNA)调控Lamtor1的表达从而影响静脉平滑肌细胞(venous smooth muscle cells,VSMCs)功能的机制。方法应用'套管法'构建大鼠静脉移植模型;FX5 000张应变加载系统对体外培养VSMCs施加10%张应变模拟移植静脉中VSMCs受到的张应变力学刺激。生物信息学方法预测与circRNA结合miRNA位点;RT-qPCR法验证移植静脉中circRNA miRNA cluster的变化;RNA干circRNA Lamtor1后检测其对VSMCs的增殖及分化的影响。结果 RN A-seq及qPCR验证结果表明,移植静脉中circRNA Plscr2表达显著升高。生物信息学预测与circ-Plscr2结合的miRNAs,通过miRNA芯片检测移植静脉中差异表达的miR-17-92及miR-29 cluster,TargetScan预测其共同的靶分子是Lamtor1。移植静脉中Lamtor1表达水平显著性上升,并且激活下游mTOR和p-mTOR的表达,进而磷酸化4EBP1及S6K。细胞张应变加载实验结果表明,张应变显著上调circ-Plscr2表达,下调miR-17-92及miR-29cluster,同时Lamor1表达显著上调,其下游p-mTOR/mTOR信号通路被激活。siRNA干扰circ-Plscr2后VSMCs增殖与迁移受到抑制,表型分化指标均升高;siRNA干扰Lamtor1后显著抑制VSMCs增殖能力并促进VSMCs向收缩表型转化。结论周期性张应变可能通过circ-Plscr2/miR-17-92/Lamtor1通路,激活下游mTOR信号通路参与调控VSMCs功能。
- 刘继婷鲍敏刘泽姚庆苹姜宗来齐颖新
- 关键词：移植静脉周期性张应变
- 周期性张应变通过mir-29a-TET1通路调控静脉血管平滑肌细胞表型转化被引量：1
- 2019年
- 目的移植静脉内膜增生引起的再狭窄是影响冠状动脉旁路移植术预后的主要原因,机械应力引起移植静脉血管平滑肌细胞(vein smooth muscle cells,VSMCs)异常增殖和迁移是其主要病理基础。VSMCs表型转化是功能改变的起始事件。但是张应力在移植静脉VSMCs表型转化的调控作用和机制尚未阐明。本研究通过高通量测序分析筛选到TET1,并探索了其在应力调控VSMC表型转化中的作用。方法首先应用全转录组测序结合miRNA测序技术检测移植静脉与对照静脉中转录组和miRNA变化。应用生物信息学方法构建TET1共表达基因网络并分析这些基因的功能,并预测可以调控TET1的miRNA。体外应用Flexcell5000细胞张应变加载系统对VSMCs加载10%幅度张应变,应用RT-PCR检测目标RNA表达;应用小RNA干扰技术转染VSMCs,Western blot检测转染后VSMCs收缩表型标志分子。结果测序发现TET1在移植静脉中表达降低,RT-PCR验证了这一结果。与TET1结合的miRNA有12个,测序结果提示mir-29a-3p升高倍数最大。权重基因共表达网络分析186个基因与TET1高度相关(k>0.4),再经过KEGG分析这些基因参与调控VSMC收缩功能,提示TET1可能参与了VSMC收缩表型与合成表型的转化。体外试验显示,张应变促进了mir-29a-3p表达,并抑制了TET1的蛋白水平,同时抑制了VSMCs收缩表型标志分子。转染mir-29a-3p的mimics和inhibitor,能够调控TET1和VSMCs收缩表型标志分子。结论 mir-29a-TET1通路在周期性张应变(应力)调控VSMC表型转化中发挥作用,为抑制移植静脉VSMC功能失调引起的再狭窄提供防治的力学生物学依据。
- 姚庆苹刘继婷刘泽陈毅齐颖新姜宗来
- 关键词：移植静脉周期性张应变
- ACTH通过激活p-ERK、p-Stat3促进血管平滑肌细胞的增殖
- 唐霞刘妍妍张萍姚庆苹沈宝荣齐颖新高立志姜宗来
- microRNA-34a在低切应力诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用被引量：3
- 2015年
- 目的探讨micro RNA-34a(mi R-34a)在低切应力诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖中的作用。方法应用细胞联合培养平行平板流动腔系统对与VSMCs联合培养的内皮细胞(endothelial cells,ECs)施加1.5 Pa正常切应力(normal shear stress,NSS)和0.5 Pa低切应力(low shear stress,Low SS),加载时间为12 h。Western blotting检测联合培养VSMCs的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达,以此反映VSMCs的增殖能力。实时PCR检测联合培养VSMCs的mi R-34a表达变化。通过Target Scan、mi RWalk等网站预测mi R-34a的下游靶蛋白。Western blotting检测联合培养VSMCs的mi R-34a靶蛋白Forkhead转录因子J2(forkhead box j2,Foxj2)表达。通过mimics和inhibitor转染技术,分别上调和抑制VSMCs的mi R-34a表达,Western blotting检测Foxj2及PCNA的表达变化,验证mi R-34a和Foxj2之间的调控关系。结果与NSS相比,Low SS促进联合培养VSMCs的PCNA表达,并显著上调联合培养VSMCs的mi R-34a表达。通过Target Scan、mi RWalk等网站预测mi R-34a的下游靶蛋白为Foxj2。Low SS加载下联合培养VSMCs的mi R-34a靶蛋白Foxj2表达明显降低。静态条件下上调VSMCs的mi R-34a表达,靶蛋白Foxj2表达明显降低,PCNA表达显著升高;抑制VSMCs的mi R-34a表达,靶蛋白Foxj2表达明显上调,PCNA表达显著降低。结论 Low SS通过调控联合培养VSMCs的mi R-34a和靶蛋白Foxj2,促进VSMCs增殖。研究结果为进一步阐明动脉粥样硬化疾病的发病机制及药物治疗靶标提供新的力学生物学实验依据。
- 王聪聪姚庆苹马英英王凯旋齐颖新姜宗来
- 关键词：切应力血管内皮细胞血管平滑肌细胞细胞增殖
- 机械张应变诱导的大鼠血管平滑肌细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路相关基因的筛选
- 2007年
- 目的筛选机械张应变诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的相关基因。方法应用FX-4000T细胞应变加载系统,对大鼠主动脉VSMCs施加1Hz、10%张应变,Western blotting检测细胞在不同加载时间下Akt磷酸化水平的变化;用抑制消减杂交法(SSH),筛选给予PI3K的抑制剂Wortmannin和给予DMSO两组细胞在加载张应变24h后的差异表达基因片段,得到的消减杂交产物连接到T载体上,经过蓝白斑筛选,对所有阳性克隆进行菌液PCR筛选及测序,应用BLASTN进行序列比对。结果机械张应变改变了VSMCs磷酸化Akt水平;SSH所获得的54个克隆随机挑选30个送测序,得到10个不同差异表达序列标签(EST),发现6个EST代表的大鼠基因可能与机械张应变诱导的VSMCs PI3K/Akt信号通路相关,它们是:Highmobility group box1(HMGB1),Neural precursor cell expressed(Nedd4a),Cyclin-dependent kinase5(CDK5),Histonedeacetylase3(HDAC3),Ubiquitin-like1(Uble1a),Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H1(hnRNP)。结论SSH有效筛选到了机械张应变诱导的VSMCs PI3K/Akt信号通路的相关基因,为进一步研究机械张应变诱导的血管病理生理改变提供了资料。
- 姚庆苹严志强白玲姜宗来
- 关键词：血管平滑肌细胞
- 长链非编码RNA在张应力诱导的应力信号转导网络的作用
- <正>心血管疾病是严重危害人类健康的疾病,机械应力(包括切应力、张应力、正压力等)在多种心血管疾病的发生和发展过程中起重要作用。机械应力通过复杂的应力信号转导网络调控细胞的形态与功能。目前的应力信号转导网络主要关注的是蛋...
- 姚庆苹
- 文献传递
- SIRT6介导周期性张应变诱导的人脐静脉内皮细胞增殖
- <正>内皮细胞(endothelial cells,ECs)作为血管壁主要细胞成分之一,其功能状态对于保持血管正常结构和功能的稳定极为重要。研究显示,血管内皮结构和功能失调将引发一系列级联反应,对于动脉粥样硬化、冠心病、...
- 沈宝荣王继尧陈斯国姚庆苹张萍齐颖新严志强姜宗来
- 文献传递
- 周期性张应力诱导环状RNA 2524在移植静脉血管重建中的作用
- 目的移植静脉内膜增生引起的再狭窄是影响冠脉搭桥术预后的主要原因,机械应力引起移植静脉血管平滑肌细胞(VSMCs)异常增殖和迁移是其主要病理基础。环状RNA是一类特殊非编码RNA,在多种疾病中发挥重要作用。但是环状RNA在...
- 龙彩凤姚庆苹齐颖新
- 文献传递
- 周期性张应变调控VEGFA合成与分泌在大鼠血管平滑肌细胞功能变化中的作用
- 谢志伟姚庆苹张萍沈宝荣齐颖新姜宗来
- SIRT6在调控周期性张应变诱导血管平滑肌细胞分化中的作用
- 姚庆苹张萍王聪聪沈宝荣严志强姜宗来
- 关键词：周期性张应变血管平滑肌细胞分化转化生长因子-Β1
