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以TNFα为基础并靶向于白细胞介素15受体的融合蛋白的构建及功能研究(英文)被引量：1: 2004年; IL 1 5及IL 1 5R阳性细胞在成人T淋巴细胞性白血病 (ATL)、多发性骨髓瘤及炎症性自身免疫性疾病病理过程中起着重要作用 .应用基因重组技术 ,构建、表达靶向于IL 1 5受体的两种融合蛋白 ,为研制特异的可消除IL 1 5R高表达细胞的导向药物奠定基础 .将人IL 1 5成熟肽基因及IL 1 5R拮抗剂 (IL 1 5M)基因片段分别与人工改造的人肿瘤坏死因子突变体 (TNFαM)基因按正确的阅读框架融合 ,定向克隆在pET1 6b表达载体T7启动子的下游 ,得到质粒pET IL 1 5 TNFαM和pET IL 1 5M TNFαM .从大肠杆菌相应重组菌株中通过Ni2 + NTA亲和层析分别纯化出两种融合蛋白IL 1 5 TNFαM和IL 1 5M TNFαM .IL 1 5 TNFαM和IL 1 5M TNFαM对IL 1 5R阳性红白血病细胞K5 6 2的杀伤作用分别是TNFα的 4和 1 5倍 ,两种蛋白对IL 1 5R阴性细胞系Jurkat的杀伤作用则没有明显差异且均弱于TNFα .这些结果说明 ,两种融合蛋白特别是IL 1 5受体拮抗型蛋白IL 1 5M TNFαM对与IL 1 5 IL 1; 丁蕾刘芳毛晓华; 关键词：肿瘤坏死因子白细胞介素15 基因工程

新型融合蛋白hIL15M-TNFαM表达质粒的构建: 2004年; 目的　构建hIL15M -TNFαM融合毒素的表达质粒 ,为该融合毒素的功能研究及临床应用前景的分析评价奠定基础。方法　通过PCR删除hIL15 5′端前 8个氨基酸残基的编码序列获得人白介素 15突变体 (hIL15M ) ,将hIL15M基因片段与人工改造的TNFα基因按正确的阅读框架融合 ,定向克隆于表达载体pET16b。结果　经酶切分析 ,所构建的质粒均插入hIL15M -TNFαM融合基因。结论　利用 pET16b表达载体成功构建融合毒素hIL15M; 刘芳丁蕾毛晓华; 关键词：基因重组

美沙酮维持治疗的依从性及社会心理干预研究: 研究目的与内容：自从2004年4月中国正式开展美沙酮维持治疗以来，至今已取得了良好的效果，但同时也存在着依从性较差的问题，且在全国各地的治疗效果及保持率各不相同。本次研究的主要目的是：(1)深入调查无锡市美沙酮维持治疗门...; 丁蕾; 关键词：美沙酮维持治疗社会心理干预吸毒行为药物滥用; 文献传递

新型重组毒素hIL15M/TNFαM的构建、表达与活性测定: 2004年; 目的　构建、表达hIL15M TNFαM融合毒素 ,为研制可消除hIL15受体高表达细胞的特异性导向药物奠定基础。方法　人白介素 15突变体 (hIL15M)对靶细胞不具有激动作用 ,将该突变体与TNFα突变体 (TNFαM)编码基因直接融合克隆至pET表达载体 ,并纯化出融合蛋白hIL15M TNFαM ,MTT法测定该蛋白的细胞毒活性。结果　SDS PAGE分析表明 ,重组菌株诱导后可以表达出 3 0× 10 3与预期大小一致的特异蛋白带。纯化的hIL15M TNFαM对PHA激活的T细胞的杀伤作用是静止性T细胞的 13倍。结论　hIL15M TNFαM融合蛋白对高表达hIL15受体的细胞具有较强的杀伤性作用 ,提示其对由活化的异常T细胞增多所致的疾病具有潜在的治疗作用。; 刘芳丁蕾毛晓华

中国运输服务出口国际竞争力及影响因素研究: 随着经济全球化的不断发展，我国服务业对外开放日益深化，我国运输服务出口贸易得到了迅速发展，运输服务在服务贸易中的比重不断上升，其地位和作用日益提高。目前我国运输服务贸易在服务贸易中占比第二并处于世界第二的位置，运输服务出...; 丁蕾; 关键词：出口贸易运输服务国际竞争力熵值法

黏细菌总蛋白质组双向电泳条件的建立: 2004年; 目的 :建立可以对黏细菌蛋白质组进行阵列分离的双向电泳条件。方法 :以黏细菌模式菌株DK162 2为材料 ,不同方法制备DK162 2在营养性生长阶段的蛋白质组样品 ,双向电泳阵列菌体总蛋白。通过不同条件下电泳图谱的比较建立蛋白质组样品的制备方法和双向电泳的技术条件。结果 :两性离子去污剂CHAPS及还原剂的浓度是影响双向电泳图谱分辨力的重要因素 ;蛋白质组样品的处理必须在低温下快速完成 ,以避免蛋白降解。结论 :初步建立了黏细菌总蛋白质组的双向电泳条件。; 丁蕾谢维毛晓华; 关键词：黏细菌双向电泳菌体 2-DE

胶质细胞源性神经营养因子在链霉菌的分泌表达: 2002年; 目的 :构建胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)表达质粒 ,实现GDNF在链霉菌的分泌表达。方法 :从人基因组中克隆GDNF成熟肽编码基因 ,与链霉菌酪蛋白酶melC1启动子和信号肽DNA序列融合。melC1信号肽DNA与GDNF融合后无翻译框架的漂移 ,且GDNF的转录受控于melC1启动子。融合基因与链霉菌载体pIJ70 2连接并转化S .lividansTK2 4原生质体。结果 :经抗性筛选及限制性酶切分析获得重组质粒pIJMG。携带pIJMG的链霉菌培养上清存在约 15 0 0 0的特异性表达带 ,与GDNF成熟肽的分子质量吻合。结论; 毛晓华丁蕾李震缪峰张鉴堂; 关键词：胶质细胞源性神经营养因子链霉菌分泌

新型融合毒素hIL-15-TNF_α表达质粒的构建被引量：1: 2003年; 目的 :构建hIL 15 TNFα 融合毒素的表达质粒 ,为该融合毒素的功能研究及临床应用前景的分析评价奠定基础。方法 :将hIL 15成熟肽基因与人工改造的TNFα 基因按正确的阅读框架融合 ,定向克隆于表达载体pET16b。结果 :经酶切分析及DNA序列分析 ,所构建的质粒均插入hIL 15 TNFα 融合基因。结论 :利用pET16b表达载体可成功构建融合毒素hIL 15 TNFα; 刘芳丁蕾丁洁毛晓华; 关键词：白细胞介素15 肿瘤坏死因子基因表达分子克隆

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丁蕾