鲁晓瑄
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
- 供职机构：东南大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科委自然科学基金铁道部科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用分离的人X染色体探针对一例无脉络膜症家系的基因检测被引量：1
- 1993年
- 无脉络膜症是一种罕见的X连锁隐性遗传病。通常表现为进行性夜盲,视野收缩,40-50岁全盲。女性携带者一般无明显症状,但眼底镜可检出眼底的椒盐状或斑驳状病变。目前该病的生化基础和分子机制尚不完全被人们了解,逆向遗传学将为我们找到打开迷宫大门的钥匙。1985年Nussbaum首次将TCD基因定位于X_(q1.3-
- 严明单祥年鲁晓瑄倪黎陈金东王世浚王光璐高永庆张华
- 关键词：无脉络膜症基因X染色体探针
- 成人型多囊肾病的遗传研究被引量：1
- 1994年
- ３′ＨＶＲ是成人型多囊肾病基因诊断中最常用的探针。我们分析了５１个无亲缘关系健康学生和３个成人型多囊肾病家系的３′ＨＶＲ－ＲｖｕＩＩＲＦＬＰ，所得多态信息用计算机软件ＬＩＮＫ－ＡＧＥ和ＨＯＭＯＧ进行连锁分析和同质性检验。其中１个家系致病基因位点与３′ＨＶＲ不连锁，因而判定为ｎｏｎＰＫＤ１。剩下的两个家系中１个有明显的重组，但还不能判定为ｎｏｎＰＫＤ１，另１个与３′ＨＶＲ连锁，属于ＰＫＤ１。成人型多囊肾病的遗传异质性使它的基因诊断面临挑战，也影响了致病基因邻近的多态标志作为诊断工具的价值。
- 茅一萍鲁晓瑄张军高翼之王世浚曾建新吴惠珍陈筠林贞
- 关键词：多囊肾遗传病
- 小麂Sry基因的克隆和测序被引量：14
- 2003年
- 应用人的性别决定基因SRY(Sex determiningRegionYgene,SRY)中HMG框内的一对引物,对小麂细胞株的基因组DNA进行PCR扩增,得到雄性小麂细胞的220bp扩增产物,而在雌性小麂细胞中未发现扩增产物。将雄性小麂细胞的220bp扩增产物通过T-A互补法克隆到质粒pGEM-T载体中,筛选阳性克隆进行DNA测序。测序结果表明小麂Sry基因保守序列与人的SRY基因保守区相同碱基的比值为152/184,达到82.6%。提示小麂Sry基因与人的SRY基因存在着较高的同源性,说明SRY基因在进化过程中高度保守。
- 鲁晓瑄张悦单祥年
- 关键词：SRY基因性别决定小麂同源性
- HSV-TK/GCV自杀基因系统对人胰腺癌细胞的作用被引量：3
- 2004年
- 目的 运用自杀基因系统HSV TK/GCV治疗人胰腺癌细胞SW1990的实验研究 ,并证实旁观者效应。方法 通过脂质体介导的基因转移方法将含有单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (her pessimplexvirusthymidinekinasegene ,HSV TK)的复制缺陷型逆转录病毒载体GINaTK导入包装细胞PA317,然后利用细胞产生的假病毒颗粒感染人胰腺癌细胞系SW 1990细胞。在SW 1990 /TK细胞培养物中加入抗病毒前药GCV ,观察GCV对该细胞的杀伤作用及旁观者效应。结果 实验表明GCV对SW1990 /TK有显著的抑制及杀灭作用 ,同时表现出强烈的旁观者效应。结论 HSV TK/GCV自杀基因系统对胰腺癌细胞有生长抑制及杀伤作用 。
- 王静鲁晓瑄张丽珊陈道桢李淑锋
- 关键词：HSV-TKGCV自杀基因基因系统胰腺癌癌细胞
- 一个BMD家系中DXS164缺失突变的分析
- 1991年
- 用DXS164探针在一例BMD家系中发现有缺失突变。这一缺失跨越了pERT87-1至pERT87-15区域,缺失片段至少在50kb以上。用DMD基因内部的J-Bit和DMD基因两侧的C7和754探针确定缺失片段位于DXS164。本文还对这一家系中一正常男性可能存在754片段的重复进行了探讨。
- 张志平黄鹰张丽珊鲁晓瑄高翼之王世浚
- 关键词：肌营养不良基因缺失基因重组
- 抗戊型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建与筛选被引量：5
- 2003年
- 目的 :构建人抗戊型肝炎病毒 (HEV)噬菌体抗体库 ,筛选人源中和性抗HEV的单克隆抗体 (mAb)。方法 :取抗HEV抗体阳性的 6例HE患者静脉血 ,分离淋巴细胞 ,提取细胞总RNA后逆转录。用一组人IgGFab基因特异性引物 ,分别扩增IgGκ0轻链与重链Fd段基因。将κ轻链与Fd段基因先后克隆入噬菌体载体pComb3的相应位点 ,经电穿孔法转化大肠杆菌XL1 Blue ,再以辅助噬菌体VCSM13超感染 ,构建人抗HEV噬菌体抗体库。采用独特的 5轮筛选法 (逐渐降低抗原包被量 ,严格洗脱条件 ) ,以固相化的 4种含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原 ,筛选人噬菌体抗体库 ,并以ELISA鉴定噬菌体抗体。结果 :经数次电转化构建了容量为1.9× 10 7重组率为 80 %的κ轻链基因库 ;容量为 1.8× 10 7重组率为 2 0 %的Fab基因库。以含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原特异淘筛 5次 ,出现特异富集。ELISA鉴定第 5轮筛选产物 ,得到 4株与HEVORF2重组混合抗原具有较高亲和力的Fab噬菌体抗体 ,可能为中和抗体。结论 :成功地构建了人抗HEV噬菌体抗体库 ,并获得人源抗HEV特异性噬菌体抗体。
- 魏华张建琼吕海芹孟继鸿鲁晓瑄谢维
- 关键词：噬菌体展示抗体库戊型肝炎病毒
- 一步法分离提取组织细胞总RNA被引量：1
- 1993年
- 提取纯度高,完整性好的总 RNA 对完成Nor(?)hern 印迹,cDNA 合成及体外翻译等过程至关重要。总 RNA 的分离提取多采用胍—热酚法或胍—氯化铯法。我们参照国外实验室有关方法,采用异硫氰酸胍—酚—氯仿混合物,建立了一步法从肿瘤组织中快速提取细胞内总RNA 的新技术。结果表明一步法优于常规总RNA 分离提取方法。
- 李明发郑谷项凤青鲁晓瑄单祥年
- 关键词：RNA一步法总RNA
- 负选择法分离无脉络膜症的基因探针
- 1993年
- DNA探针是进行遗传病基因诊断的常用工具,分离新的基因探针对研究遗传病的发病机理和进行基因诊断有着重要的意义。报告一种较为简单的分离基因探针的方法——负选择法。用这种方法,从人X染色体基因文库中分离出特异性区域的DNA探针S、_8S_(10)、S_(21)、S_(36)、S_(52)。其中S_(21)探针检测到1例无脉络膜症家系的基因缺失,为无脉络膜症的基因诊断又提供了一个新的标记。
- 鲁晓瑄单祥年严明陈金东倪黎王世浚
- 关键词：基因探针基因文库无脉络膜症
- Swyer综合征的分子遗传学分析
- 1992年
- 本文采用一组覆盖Y染色体长短臂及着丝粒部位的特异性DNA探针,对6例Swyer综合征患者进行了较全面的Southern印迹分析。研究结果表明,除了1例Swyer病人缺失了pDP34的检测片段外,在所有的患者中,未发现其Y染色体性别决定区内有任何可检测片段的丢失。因此,这些46,XY或47,XYY女性等Swyer综合征患者的病因可能有以下两种可能:一是Y染色体上的性别决定基因TDF或X染色体和常染色体上与性别决定有关的基因发生突变,致使这类病人发生性别反转;二是这些病人的Y染色体缺失了包括TDF在内的微小片段,但没有相应的探针将其检测出来。
- 单祥年陈金东鲁晓瑄严明黄瑛王世浚
- 关键词：性反转综合征核酸分子杂交
