高长玲
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 供职机构：吉林大学人兽共患病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中法先进研究计划项目国际科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 旋毛虫新生幼虫WN1抗原基因的克隆及表达
- 应用旋毛虫人工感染猪血清对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行免疫筛选,对阳性克隆WN1序列进行生物信息学分析,结果表明,WN1 cDNA全长为474bp,含有一个354 bp的完整的开放阅读框架(ORF),编码的多肽由117...
- 高长玲付宝权刘明远原丽红吴秀萍张亚兰李莲瑞卢强陈启军P.Boireau
- 关键词：旋毛虫基因克隆
- 文献传递
- 旋毛虫新生幼虫脱氧核糖核酸酶Ⅱ基因家族的克隆与分析
- 本研究利用旋毛虫新生幼虫期特异性基因N5 cDNA 作为探针,对旋毛虫新生幼虫cDNA 文库进行核酸杂交筛选,将阳性克隆全部送测序公司测序。将测序结果进行序列分析,95 个阳性克隆均含信号肽,属于分泌蛋白;且根据信号肽不...
- 高长玲
- 关键词：旋毛虫克隆
- 文献传递
- 旋毛虫新生幼虫期特异性基因N10的表达及鉴定
- 2006年
- 根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK-CMV-N10序列设计引物,利用PCR技术将基因N10的信号肽去除后,用T/A法克隆到pMD-18T载体,转化至大肠杆菌NovaBlue,经鉴定及序列测定,结果显示成功克隆到N10基因。将重组质粒pMD-18T-N10进行酶切后连接到原核表达载体pET-28a中,重组质粒经鉴定后转化大肠杆菌BL21star(DE3),用IPTG诱导表达出与理论相符的融合蛋白,相对分子质量为38700,诱导4h的表达量占菌体总蛋白量的15%。从N10重组蛋白提取可溶性融合蛋白,对其生物学特性初步鉴定结果表明,具有类似脱氧核糖核酸酶的活性。
- 高长玲刘明远郭恒孙树民付宝权崔国祯卢强陈启军P.Boireau
- 关键词：旋毛虫
- 旋毛虫新生幼虫WN1抗原基因的克隆及表达
- 应用旋毛虫人工感染猪血清对旋毛虫新生幼虫cDNA 文库进行免疫筛选,对阳性克隆WN1 序列进行生物信息学分析,结果表明,WN1 cDNA 全长为474 bp,含有一个354 bp 的完整的开放阅读框架(ORF),编码的多...
- 高长玲付宝权刘明远原丽红吴秀萍张亚兰李莲瑞卢强陈启军P.Boireau
- 关键词：旋毛虫基因克隆
- 文献传递
- 旋毛虫新生幼虫WN1抗原基因的克隆及表达被引量：2
- 2005年
- 应用旋毛虫人工感染猪血清对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行免疫筛选,对阳性克隆WN1序列进行生物信息学分析。结果表明,WN1cDNA全长为474bp,含有1个354bp的完整的开放阅读框架(ORF),编码的多肽由117个氨基酸残基组成,其相对分子质量理论推导值为13200,等电点为4.25,N-末端的信号肽表明其可能为分泌性蛋白。GenBank数据库检索结果显示,此序列为一个新基因的全长cDNA。经PCR扩增WN1基因,将其克隆到原核表达载体pET28a,重组质粒经鉴定后,转化大肠杆菌BL21star(DE3)并诱导表达出相对分子质量为15000的重组蛋白,与理论设计完全相符。
- 高长玲付宝权刘明远郭桓孙树民吴秀萍卢强陈启军P.Boireau
- 关键词：GENBANK数据库开放阅读框架全长CDNA免疫筛选阳性克隆N-末端
- 旋毛虫肌幼虫p43cDNA的克隆及鉴定被引量：9
- 2005年
- 目的克隆旋毛虫肌幼虫p43cDNA并对其表达的融合蛋白酶活性进行鉴定与分析。方法用PCR技术从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因,克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希菌NovaBlue,序列测定后克隆到原核表达载体pET28a并转入表达菌DE3中。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后提取包涵体并复性,通过降解双链λDNA测定其融合蛋白脱氧核糖核酸酶II(DNase II)活性。结果成功克隆到p43 cDNA序列,该cDNA序列与美国发表的存在两个核苷酸的变异,分别为第210位的C变为T,第604位的A变为G。基于3名研究者从旋毛虫T.spiralis美国分离株获得的序列相同、6名国内研究者(含本课题组)从T.spiralis中国分离株获得的序列也相同,由此可以确定这两个核苷酸的变异为T.spiralis中国分离株特异性和特征性单核苷酸多态性(SNP)标记。p43重组蛋白能够降解双链λDNA,表明其有DNase II酶活性。结论成功克隆到p43cDNA,T.spiralis中国分离株的p43cDNA具有两个SNP标记,其表达的重组蛋白具有DNase II酶活性。
- 郭恒李莲瑞刘明远吴秀萍孙树民付宝权高长玲卢强陈启军P.Boireau
- 关键词：旋毛虫克隆
- 旋毛虫新生幼虫期特异性基因N10的表达及鉴定
- 根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK-CMV-N10序列设计引物,利用PCR技术将基因N10的信号肽去除后,用T/A法克隆到pMD-18T载体,转化至大肠杆菌NovaBlue,经鉴定及序列测定,结果显示成功克隆到N10基...
- 高长玲刘明远郭恒孙树民付宝权崔国祯卢强陈启军P.Boireau
- 关键词：旋毛虫PCR技术基因表达脱氧核糖核酸酶
- 文献传递
