詹升华
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院病理学教研室更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人促甲状腺激素受体真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达
- 目的：构建pcDNA3.1/(+/)人促甲状腺激素受体（hTSHR）基因真核表达载体，并在COS-7细胞中进行表达，为进一步研究hTSHR的生物学功能，以及利用hTSHR真核表达载体建立Graves病的实验动物模型奠定基...
- 詹升华
- 关键词：PCDNA3.1COS-7细胞转染动物模型
- 文献传递
- 表达人Fas配体的质粒治疗Graves病模型小鼠
- 2009年
- 目的:观察表达人Fas配体的质粒治疗Graves病模型小鼠的效果。方法:小鼠分为3组。对照组(10只)用空质粒pcDNA3.1(+)活化的脾细胞免疫后,以空质粒治疗;模型组和治疗组(各19只)均以人TSH受体(Human thyrotropin receptor,hTSHR)活化的脾细胞进行免疫,前者不予治疗,后者甲状腺注射表达hFasL的质粒pcDNA3.1(+)/hFasL。结果:模型组47.4%的甲状腺细胞出现增生、肥大,以及甲状腺滤泡腔胶质减少,与对照组相比,TT4、TRAb升高、TSH降低(P<0.05)。治疗组仅15.8%有类似甲状腺功能亢进改变,电镜下见细胞核异染色质边集,TT4、TSH、TRAb回复至对照组水平。结论:表达人Fas配体的质粒治疗Graves病模型小鼠取得一定效果。
- 随华刘纯张徽李秀娟何云张琳詹升华
- 关键词：GRAVES病基因治疗FAS配体
- TSHR在自身免疫性甲状腺疾病发病中的作用研究进展
- 2003年
- 促甲状腺激素受体 (TSHR)是自身免疫性甲状腺疾病 (AITD)的主要靶抗原 ,在AITD的发病中起重要作用。近年来利用TSHR多肽或核酸直接免疫动物成功地建立起了与人类AITD接近的动物模型 ,产生了活性TSHR抗体 ,甲状腺肿伴淋巴细胞浸润及Graves眼征 ,进一步证明了TSHR在AITD的发病中的作用。
- 詹升华
- 关键词：促甲状腺激素受体促甲状腺激素受体抗体自身免疫性甲状腺疾病动物模型
- pcDNA3.1/hTSHR真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：9
- 2004年
- 目的 :构建pcDNA3.1(+)人促甲状腺激素受体 (hTSHR)基因真核表达载体 ,并在COS 7细胞中进行表达。方法 :以限制性内切酶EcoRI和XbaI双酶切pBluescriptSK(- ) /hTSHR ,获得hTSHRcDNA的全长片段 ,在以低熔点琼脂糖回收纯化后 ,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆酶切位点中 ,构建重组体pcDNA3.1/hTSHR ,进行酶切、PCR及测序鉴定。通过脂质体介导 ,转染COS 7细胞进行瞬时表达 ,并用RT PCR和免疫细胞化学染色法检测hTSHR的表达。结果 :双酶切pBluescriptSK(- ) /hTSHR得到约 2 70 0bp含TSHR全长cD NA的片段 ,同预期片段的大小相符。所构建的pcDNA3.1/hT SHR经双酶切及PCR鉴定同预期大小相符 ;测序结果与Gen Bank中收录的hTSHR全长序列一致 ,表明真核表达质粒构建正确。以脂质体转染COS 7细胞后 ,用RT PCR和免疫细胞化学染色法检测表明 ,细胞可表达hTSHR。结论 :成功地构建真核重组表达质粒pcDNA3.1/hTSHR ,为进一步研究TSHR的功能 ,以及利用hTSHR真核表达载体建立Graves实验动物模型奠定了基础。
- 詹升华张徽刘纯
- 关键词：PCDNA3.1COS-7细胞转染动物模型
- 用hTSHR活化脾细胞免疫小鼠建立Graves病动物模型的研究被引量：2
- 2008年
- 目的:用人促甲状腺激素受体活化的脾细胞免疫同源雌性BALB/c小鼠建立Graves病动物模型。方法:第一阶段,将6～8周龄的雌性BALB/c小鼠随机分为2组(a组和b组),分别用重组质粒pcDNA3.1/hTSHR和空质粒pcDNA3.1免疫,第3和6周加强免疫2次。18周时分别处死两组小鼠,分离其脾细胞。第二阶段,分别取a组和b组小鼠的脾细胞免疫同源的两组6～8周龄的雌性BALB/c小鼠(实验组和对照组),4周后光镜和电镜检查甲状腺组织,并测定小鼠血清TT4、TSH和TRAb水平。结果:实验组约44%小鼠甲状腺组织见明显增生,滤泡上皮细胞增多、变大呈立方形,部分突向滤泡腔内;散在免疫细胞侵润。电镜下见滤泡上皮细胞胞浆内有丰富的线粒体和粗面内质网,腔面有发育良好的微绒毛。实验组血清TT4高于对照组(7.13±1.02与6.43±0.57μg/dl)(P<0.05)、TSH水平低于对照组(0.070±0.032与0.098±0.020μIU/ml)(P<0.05)。其中4只小鼠可能发生了甲状腺功能亢进,1只小鼠可能发生了亚临床甲状腺功能亢进。结论:hTSHR活化脾细胞免疫BALB/c小鼠可以有效地产生类似人类Graves病的动物模型。
- 何云刘纯张徽张琳詹升华李秀娟随华
- 关键词：GRAVES病促甲状腺激素受体脾细胞免疫
- 采用人促甲状腺激素受体活化的脾细胞免疫小鼠建立甲状腺相关眼病动物模型的研究被引量：4
- 2006年
- 目的采用人促甲状腺激素受体活化的脾细胞免疫同源BALB/c小鼠建立甲状腺相关眼病(TAO)动物模型。方法将23只BALB/c小鼠预处理后用完全随机设计的方法分为2组:重组质粒免疫组(A组)18只,空质粒免疫组(B组)5只,分别接受重组质粒pcDNA3·1/hTSHR和空质粒pcDNA3·1免疫,免疫后第3、6周加强免疫2次。18周后处死所有小鼠,机械分离脾细胞,取眼眶组织做病理学观察。另取26只BALB/c小鼠用完全随机设计的方法分为2组:活化脾细胞免疫组(C组)16只和未活化脾细胞免疫组(D组)10只,分别接受A组和B组的脾细胞免疫。4周后处死所有小鼠,取眼眶组织作病理学观察,用放射免疫法测定血清总甲状腺素水平,免疫放射法测定血清促甲状腺激素水平,酶联免疫吸附法测定血清促甲状腺激素受体抗体。结果A组:约25%小鼠眼眶组织出现黏液变性、水肿,无明显纤维组织和脂肪组织增生,肌纤维无变性断裂。C组:约50%小鼠眼眶组织出现明显黏液变性、水肿,局部纤维组织和脂肪组织增生,肌纤维透明变性断裂;电镜下可见滑面内质网扩张,肌原纤维排列紊乱。B组和D组:小鼠的眼眶组织均无形态学改变。脾细胞免疫后4周,血清总甲状腺素:C组(7·130±1·017)μg/dl与D组(6·431±0·573)μg/dl相比显著升高,差异有统计学意义(P=0·036);血清促甲状腺激素:C组(0·070±0·032)μIU/ml与D组(0·098±0·020)μIU/ml相比显著降低,差异有统计学意义(P=0·020);血清促甲状腺激素受体抗体:C组(0·202±0·067)与D组(0·151±0·055)相比无显著升高,差异无统计学意义(P=0·055)。结论采用人促甲状腺激素受体活化的脾细胞免疫同源BALB/c小鼠所构建的动物模型与人TAO的组织学特征非常接近,是一种可行、有效的方法。促甲状腺激素受体和针对该受体的T淋巴细胞在其自身免疫反应过程中具有重要作用。
- 张琳刘纯张徽何云詹升华
- 关键词：格雷夫斯病受体促甲状腺素
- 表达人Fas配体的质粒用于治疗小鼠甲状腺相关眼病
- 2008年
- 目的探求表达人Fas配体(hFasL)的质粒在甲状腺相关眼病(TAO)小鼠模型中的治疗作用。方法小鼠分为3组。对照组(10只)用空质粒pcDNA3.1(+)活化的脾细胞免疫后,以空质粒治疗;模型组和治疗组(各19只)均以人TSH受体(hTSHR)活化的脾细胞进行免疫,前者不予治疗,后者行眼球后注射表达hFasL的质粒pcDNA3.1(+)/hFasL。结果模型组52.6%的眼眶组织出现了肌纤维变性及溶解断裂、脂肪组织增生、水肿等TAO样改变,与对照组相比,TT4升高、TSH降低(P<0.05)。治疗组仅15.8%有类似TAO改变,电镜下见有凋亡细胞,TT4、TSH回复至对照组水平。TRAb在3组间均无差异。结论眼球后注射表达hFasL的质粒治疗TAO小鼠取得了一定效果。
- 李秀娟刘纯张徽随华詹升华
- 关键词：格雷夫斯病疾病模型基因疗法
