王雪皎
- 作品数：9 被引量：13H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家攀登计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全反式维甲酸激活的人肺腺癌细胞基因的筛选被引量：1
- 1999年
- 目的：筛选人肺腺癌细胞中全反式维甲酸（ａｌｔｒａｎｓ－ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ，ＡＴＲＡ）激活表达的基因。方法：以我室构建的ＡＴＲＡ诱导前后人肺腺癌细胞系ＧＬＣ－８２的ｃＤＮＡ削减文库各克隆作为探针，与ＡＴＲＡ处理前后ＧＬＣ－８２的ｃＤＮＡ文库Ｌｉｂ．ＧＬＣ－８２，Ｌｉｂ，ＧＬＣ－８２．ＲＡ１，Ｌｉｂ．ＧＬＣ－８２．ＲＡ４进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，以筛选在ＡＴＲＡ处理后ＧＬＣ－８２ｃＤＮＡ文库中特异存在的ｃＤＮＡ片段。以筛选出的特异存在于ＡＴＲＡ处理后ＧＬＣ－８２ｃＤＮＡ文库中的ｃＤＮＡ片段作为探针，与胎儿各组织总ＲＮＡ进行Ｎｏｒｔｈｅｒ杂交，以检测其在胎儿各组织中的表达情况。结果：其中一克隆ＲＡ９７特异存在于ＡＴＲＡ诱导１天ｃＤＮＡ文库，核酸序列同源分析表明，ＲＡ９７与人２２号染色体长臂１３区－ＰＡＣ克隆ＰＡＣ４０８Ｎ２３同源性很强，其中一段（约６００ｂｐ）与ＰＡＣ４０８Ｎ２３几乎完全同源；此片段与可能的肿瘤抑制基因ＳＮＣ６同源性也相当强，其中一段（约３５０ｂｐ）与ＳＮＣ６几乎完全同源。ＲＡ９７在多种胎儿组织中均有表达，转录本有两个，分别为４．３ｋｂ和４．８ｋｂ。结论：获得一特异存在与ＡＴＲＡ诱导１天ＧＬ?
- 王雪皎张睿王秀琴郭明洲郭明洲蔡岩丁芳王明荣黎伯铨
- 关键词：维甲酸CDNA腺癌基因筛选
- 全反式维甲酸激活人肺腺癌细胞系GLC-82中-PIG-B高度同源基因—PIGB1被引量：1
- 1999年
- 目的 :探讨全反式维甲酸 (all transretinoicacid ,ATRA)诱导肿瘤细胞分化的分子机制。方法 :采用Southern和Northern杂交方法对本室用ATRA诱导人肺腺癌细胞GLC 82 ,经消减杂交所构建的cDNA消减文库进一步鉴定 ;序列分析后用RT PCR方法研究胎儿组织中的表达情况。结果 :分离到一为ATRA激活表达的基因—PIGB1,该基因与人PIG B (phosphatidylinositolglycanofcomplementationclassB)基因高度同源 ,在多种胎儿组织中均有表达。结论
- 王雪皎王秀琴张睿丁芳郭明洲刘芝华于振涛吴旻
- 关键词：全反式维甲酸肺腺癌
- 肺癌发生中的分子事件被引量：3
- 1997年
- 肺癌的形成及发展是多种遗传改变积累的结果,包括癌基因的激活、抑癌基因的失活及多种其意义尚未阐明的染色体异常。本文对这一领域近年来的发展作一综述。
- 王雪皎
- 关键词：肺肿瘤肿瘤发生癌基因
- 林县食管癌组织和非癌食管组织差异DNA片段的克隆研究被引量：5
- 1998年
- 目的寻找食管癌发生的相关基因，为食管癌易感个体的筛查和早期诊断提供分子标志物。方法对来源于食管癌高发区河南省林县的１２例配对食管癌组织和非癌食管组织ＤＮＡ，应用随机引物聚合酶链反应（ＡＰ－ＰＣＲ）技术分离差异ＤＮＡ片段，进行克隆、测序和序列分析。根据序列的酶切位点分析，选择ＤｒａⅠ和ＨｉｎｄⅢ内切酶，对配对的食管癌组织和非癌食管组织ＤＮＡ酶切，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析。结果１２例配对食管癌组织和非癌食管组织中，３例癌组织有１．０ｋｂ左右的差异随机扩增片段，而相应的非癌组织缺如。其中的１１Ｔ差异ＤＮＡ片断经测序和序列的同源性分析，基因文库内无同源序列。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交显示，配对的食管癌组织和非癌食管组织有明显差异。结论１１Ｔ差异ＤＮＡ片段是食管癌变过程中所发生的改变。是否为一个新的候选癌基因或癌基因标志物。
- 郭明洲刘霜王秀琴王秀琴易粹琼吴卫东侯晓华张睿鲁凤民吴卫东吴
- 关键词：食管肿瘤DNA指纹法聚合酶链反应克隆
- 全反式维甲酸对人细胞线粒体基因表达的调控被引量：3
- 2000年
- 目的：探讨维甲酸在预防和治疗肿瘤中的作用机制，分离受维甲酸调控的靶基因。方法：采用ＡＰ－ＰＣＲ、测序、Ｎｏｒｔｈ－ｅｍ杂交及序列同源分析等方法。结果：首次发现ＡＴＲＭ可上调线粒体基因ＡＴＰ酶第六亚单位表达，这种表达上调开始于Ａ－ＴＲＡ诱导早期并持续整个诱导过程（７ｄ）。 Ｎｏｒｔｈｅｍ杂交结果证实 ＡＴＲＡ对线粒体基因 ＡＴＰ酶第六亚单位的上调作用。对线粒体基因组的转录调控区Ｄ－ｌｏｏｐ序列进行了初步分析发现，该转录调控区两处存在着与维甲酸受体反应元件核心序列高度一致的外翻重复序列（ｅｖｅｒｔｅｄ ｒｅｐｅａｔｅｄ ｓｅｏｐｎｃｅｓ），其间隔分别为 １２ｂｐ和 １３ｂｐ。结论：维甲酸受体与线粒体基因组维甲酸反应元件相互作用可能是其调控线粒体基因的表达。维甲酸除调控核基因外，亦可对线粒体基因进行直接调控。
- 张睿王雪皎王秀琴郭明洲丁芳刘芝华吴旻
- 关键词：全反式维甲酸线粒体基因表达肿瘤
- N-乙基马来酰亚胺敏感因子NSF与食管鳞癌细胞分化有关
- 2000年
- 目的 :克隆食管鳞癌细胞EC8712分化过程中受ATRA调控的靶基因。方法 :采用AP PCR技术从食管鳞癌细胞EC8712中克隆受ATRA调控的差异表达基因片段 ,并测序及作同源分析 ,采用Northern杂交进行验证。结果 :分离到在食管癌细胞分化过程中表达下调的一基因片段。该基因从ATRA处理一天开始表达被明显抑制 ,这种抑制持续整个诱导过程。该片段被克隆于 pGEM T载体并测序。同源分析结果表明 ,该基因片段与人N 乙基马来酰亚胺敏感因子 (NSF)基因高度同源 (IDENTITY :99% ) ,为人NSF基因片段。NSF基因在真核细胞囊泡转运系统中发挥着重要作用。结论 :参与囊泡转运的NSF基因在食管癌细胞分化过程中发挥着重要作用 ,NSF表达的抑制是囊泡转运系统转运活性下降的分子机制。
- 张睿王雪皎王秀琴周传农丁芳郭明洲刘芝华吴
- 关键词：食管鳞癌细胞分化
- 维甲酸激活表达的人肺腺癌细胞分化相关基因的筛选被引量：1
- 1998年
- 通过对维甲酸诱导的人肺腺癌细胞系GLC-82 cDNA消减文库的筛选,获得2个特异存在于维甲酸诱导1天cDNA文库中的cDNA片段RA97及RA107,测序后与最新GenBank提供的序列比较,RA97与人22号染色体长臂13区PAC408N23同源性很强,其中一段(约600bp)与PACA08N23完全同源,此片段与可能的肿瘤抑制基因SNC6同源性也相当强,其中一段(约350bp)与SNC6完全同源,提示这一cDNA片段可能与肿瘤发生有一定关系。RA107与多种基因部分同源,可能是某一基因超家族的一员。
- 王雪皎王秀琴蔡岩王明荣黎伯铨丁芳张睿郭明洲林晨吴旻
- 关键词：维甲酸肿瘤肺腺癌细胞分化
- RAI──一候选的人肺腺癌分化相关基因被引量：2
- 2000年
- 通过进一步分析采用全反式维甲酸（ａｌｌ ｔｒａｎｓ ｒｅｔｉｎｏｉｃ ａｃｉｄ， ＡＴＲＡ）诱导人肺腺癌 ＧＬＣ－８２细胞，经ｃＤＮＡ文库消减杂交构建的ｃＤＮＡ消减文库，得到一在ＡＴＲＡ诱导 ＧＬＣ－８２细胞分化过程中激活表达（ｒｅｔｉｎｏｉｃ ａｃｉｄ ｉｎｄｕｃｅｄ， ＲＡＩ）的基因的 ｃＤＮＡ片段，应 用菌落原位杂交技术在胎脑ｃＤＮＡ文库中进行筛选，克隆ＲＡＩ的全长ｃＤＮＡ序列并测 序．ＲＴ－ＰＣＲ分析表明，ＲＡＩ在多种胎儿组织中表达．结果表明，ＲＡＩ可能与细胞分化有 关，并在细胞基本生命活动中发挥重要作用．
- 王雪皎张睿王秀琴丁芳郭明洲刘芝华吴旻
- 关键词：肺腺癌分化维甲酸GLC-82细胞基因
- 介绍一种基因分离的新方法
- 2000年
- 于振涛郭明洲张睿王雪皎王秀琴吴旻
- 关键词：肺肿瘤基因分离AP-PCRDNA指纹图
