王英
- 作品数：10 被引量：8H指数：2
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- 结核杆菌ESAT6真核表达载体的构建及表达
- 王英薛玉芹陈勇唐沽王雪梅方强
- 密码子优化的结核分枝杆菌CFP-10真核表达载体构建及在Hela细胞中的表达
- 薛玉芹王英陈勇唐洁王雪梅方强
- 结核杆菌ESAT6蛋白的原核表达与纯化
- 研究背景:结核病是由结核分支杆菌引起的一种人兽共患传染病,随着流动人口剧增、结核菌与艾滋病毒双重感染和多重耐药结核菌病的挑战均增加了结核病防治工作的难度,使严重的结核病疫情更加复杂。卡介苗对儿童的保护力很好,而对成人的保...
- 王英薛玉芹陈勇唐洁王雪梅方强
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达
- 文献传递
- 结核分枝杆菌ESAT6疫苗的研究进展被引量：1
- 2013年
- 结核病是由结核分枝杆菌（MTB）引起的一种严重危害人类健康的重要传染性疾病。根据WHO发布的《2011年全球结核病（TB）控制报告》，患结核病的人数降到2010年的880万，结核病死亡数降到140万人，结核病死亡率在1990年和2010年之间下降了40％，除非洲之外，其他区域都可按期实现到2015年时使死亡率降低50％这一目标；但是流动人口剧增、结核菌与艾滋病毒双重感染和耐药结核菌病的增多均增加了结核病防治工作的难度，使得结核病疫情的形势依然严峻，防治任务仍然十分艰巨。在艾滋病感染患者中结核的发病率则更高，艾滋病毒携带者同时感染了结核分枝杆菌后，发生结核病的可能性是正常人的34倍。
- 王英王雪梅方强
- 关键词：结核分枝杆菌疫苗ESAT6
- 猪囊尾蚴病患者CD4^+ CD25^+调节性T细胞水平的变化被引量：3
- 2013年
- 目的检测猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞及其FOXP3的表达情况,探讨CD4+CD25+调节性T淋巴细胞在猪囊尾蚴感染中的免疫调控作用及意义。方法采用流式细胞仪检测11例猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的含量,同时观察CD4+CD25+T细胞中表达FOXP3群体的百分含量。结果囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量为6.11%,较正常人(3.94%)明显升高(P<0.05);患者外周血中CD4+CD25+T细胞表达FOXP3的细胞百分含量为15.67%,与正常对照组(11.09%)有显著性差异(P<0.05)。结论猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量显著升高,表明CD4+CD25+调节性T细胞可能参与猪囊尾蚴感染的免疫抑制。
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- 关键词：猪囊尾蚴病流式细胞术
- 结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因的克隆与序列分析
- 2013年
- 目的:克隆结核分枝杆菌减毒株H37Ra培养滤液蛋白10(CFP10)基因,并对其进行序列分析。方法:自结核菌H37Ra株抽提基因组DNA为模板,以已知结核菌H37Ra株CFP10基因设计引物。通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增出结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,将其克隆至pTG19-T载体后,经PCR和双酶切鉴定后进行DNA序列测定,并以BLAST在线软件进行序列比对分析。结果:PCR产物电泳显示扩增片段约为300 bp,测序获得的片段开放编码框由303 bp组成,与H37Rv株CFP10基因同源性为100%,推导出编码氨基酸序列同源性为100%。结论:成功克隆结核分枝杆菌H37Ra株CFP10基因,其基因序列与H37Rv株CFP10基因序列无差异。
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- 关键词：结核分枝杆菌克隆
- 结核杆菌ESAT6蛋白的原核表达与纯化
- 王英薛玉芹陈勇唐洁王雪梅方强
- 结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6的构建、鉴定及免疫效应评价被引量：4
- 2013年
- 目的构建结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6并探讨其诱导的免疫效应。方法将扩增自结核杆菌基因组的ESAT-6基因装入pVAX1载体构建pVAX1/ESAT-6重组质粒;经酶切、测序鉴定后,利用阳离子聚合物介导将重组质粒pVAX1/ESAT-6转染Hela细胞,分别以RT-PCR法检测ESAT-6 mRNA的表达、间接免疫荧光法检测ESAT-6蛋白表达。重组质粒经体内电转染免疫小鼠后,采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ及抗ESAT-6特异性抗体IgG的水平;流式细胞术检测小鼠淋巴细胞增殖水平;ELISPOT检测产生IFN-γ的淋巴细胞频数。结果构建的重组质粒pVAX1/ESAT-6经双酶切于3000 bp和300 bp处各见1条带,测序结果显示插入序列与ESAT-6基因序列无差异。重组质粒转染Hela细胞后,RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳于约300 bp处见目的条带,间接免疫荧光检测显示特异性绿色荧光。重组质粒免疫小鼠后,血清中抗ESAT-6特异性抗体IgG水平较对照组(空质粒组和生理盐水对照组)明显升高;血清中IFN-γ水平、小鼠脾淋巴细胞增殖水平及产生IFN-γ的淋巴细胞数明显均高于对照组(空质粒组和生理盐水对照组)。结论成功构建了结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6,该疫苗可有效诱导小鼠产生特异性细胞免疫和体液免疫效应。
- 王雪梅王英薛玉芹陈勇陶志勇夏惠唐洁方强
- 关键词：结核分枝杆菌ESAT-6DNA疫苗细胞免疫体液免疫
- 结核分枝杆菌H37Ra菌株ESAT6基因的克隆及序列分析
- 2014年
- 目的:从结核分枝杆菌H37Ra菌株克隆早期分泌性抗原靶6(ESAT6)基因并进行序列分析。方法:以结核分枝杆菌H37Ra菌株基因组DNA为模版,用PCR方法扩增ESAT6基因,将扩增产物连接到克隆载体pTG19-T中,并用PCR、单双酶切和测序进行鉴定,以BLAST软件进行序列比对分析。结果:从结核分枝杆菌H37Ra株成功克隆了ESAT6基因,测序表明该片段由288 bp组成,与GenBank所报告的H37Rv基因相比同源性为100%。结论:成功克隆了H37Ra株ESAT6编码基因,其序列与H37Rv标准株ESAT6编码基因完全一致。
- 王英薛玉芹王雪梅陈勇李江艳李倩唐洁夏惠方强
- 关键词：结核分枝杆菌克隆
- 结核分枝杆菌CFP-10的克隆与高效可溶性原核表达
- 薛玉芹王英陈勇唐洁王雪梅方强
