王建科
- 作品数:72 被引量:209H指数:8
- 供职机构:中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金吉林省自然科学基金吉林省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 鉴别诊断犬细小病毒疫苗毒和野毒株PCR-RFLP方法的建立
- 引言/目的:犬细小病毒病(Canine Parvovirus disease)是由犬细小病毒(Canine Parvovirus)引起的一种急性、高度致死性传染病,以出血性肠炎或非化脓性心肌炎为主要特征,具有感染率高、发...
- 易立程世鹏王建科罗彬杨莘
- 文献传递
- 乌苏里貉TLR8基因的分子克隆、序列分析及组织表达分析
- 2016年
- 为了解乌苏里貉TLR8基因特点及其在不同组织中的表达水平,本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆其c DNA全长序列,应用生物学软件分析该基因及预测其编码蛋白的特征,并对该基因在乌苏里貉不同组织中的表达水平进行检测。结果显示该基因全长3 191 bp,ORF全长3 117 bp,编码1 038 aa,含有Toll-like受体家族典型的结构域特征。同源性分析显示乌苏里貉TLR8基因核苷酸序列与犬同源性最高,达99.3%,与其他食肉目哺乳动物也具有较高的同源性,在89.2%-92.9%。组织表达分析显示TLR8基因在乌苏里貉各组织中广泛表达但表达量存在差异。本研究结果为进一步研究乌苏里貉抗病毒免疫及育种相关研究奠定了基础。
- 仝明薇易立程悦宁曹智刚王建科赵航林鹏程世鹏
- 关键词:乌苏里貉
- 毛皮动物犬瘟热、细小病毒性肠炎和脑炎防治技术指南被引量:3
- 2010年
- 为了预防、控制和消灭毛皮动物犬瘟热、细小病毒性肠炎和脑炎,依据《中华人民共和国动物防疫法》及有关法律法规,制定毛皮动物犬瘟热、细小病毒性肠炎和脑炎防治技术指南,指导毛皮动物犬瘟热、细小病毒性肠炎和脑炎防控。
- 程世鹏易立陈立志司方方王建科
- 关键词:毛皮动物犬瘟热细小病毒性肠炎传染性脑炎防控技术
- 布鲁氏菌SUMO-BCSP31重组表达菌的构建及免疫原性分析
- 目的意义:本研究欲对布鲁氏菌BCSP31的免疫原性进行分析,为利用其作为诊断抗原研制布鲁氏菌病的新型诊断方法提供科学依据。方法:利用原核表达的方法制备了布鲁氏菌BCSP31蛋白的可行性表达产物SUMO-BCSP31,并将...
- 杨艳玲郭利王建科孙娜温永俊
- 文献传递
- 犬瘟热病毒核衣壳蛋白分子生物学研究进展被引量:6
- 2010年
- 核衣壳蛋白在犬瘟热病毒中含量丰富,高度保守,能够保护病毒RNA避免降解,对病毒的持续感染产生影响,是重要的抗原物质。本文从N蛋白及其编码基因分子生物学结构、功能、应用等方面进行了阐述。
- 罗彬易立王建科程世鹏
- 关键词:犬瘟热病毒核衣壳蛋白分子生物学
- 犬瘟热病毒PS株的全基因组序列测定与遗传进化分析被引量:3
- 2012年
- 对犬瘟热病毒(CDV)PS株基因组进行全基因组序列测定与分析,以阐明该毒株的基因特征与遗传进化情况。利用RT-PCR方法分段扩增PS株全基因组序列,分别将产物克隆入pMD18-T载体中并进行测序,将所测序列拼接获得CDV PS株的全基因组cDNA。用DNAStar软件比较PS株全基因组序列与国内外犬瘟热病毒疫苗株和野毒株全基因组序列的同源性,然后用Mega4.0软件进行系统进化分析。测序结果显示,PS株全基因组序列的长度为15 690nt,该基因组推导的某些氨基酸位点发生了突变。与GenBank中登录的国内外参考毒株的同源性比较结果显示,PS株基因组与MKY-KM08分离株的基因序列同源性高达97.9%,与其他毒株的同源性为93.0%~97.0%;与CDV3疫苗株和Onderstepoort疫苗株的同源性最低,分别为93.2%和93.0%。基于全基因组序列绘制的系统进化树表明,所有CDV分离株分为疫苗株和野毒株2支,PS株和MKY-KM08株位于同一支,属于亚洲1型。结果表明PS株为野毒株,其全基因组序列与MKY-KM08株的全基因组序列亲缘关系最近。
- 许红丽易立王建科杨莘程世鹏
- 关键词:全基因组序列进化分析
- 水貂阿留申病研究进展
- 本文从病原学、流行病学、致病特点、病毒分子生物学特点、病毒免疫特点方面对水貂阿留申病的研究现状进行概述。
- 杨莘王建科易立许红丽罗彬程世鹏
- 文献传递
- 牛副流感病毒3型核衣壳蛋白基因的真核表达被引量:2
- 2012年
- 根据牛副流感病毒3型(BPIV-3)内蒙09株(NM09)全基因组序列(GenBank登录号:JQ063064)设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增出牛副流感病毒3型分离株的核衣壳蛋白(N)基因,通过NheI和NotI限制性内切酶位点亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/Zeo(+),获得真核重组质粒pcDNA3.1-N。采用Superfect转染试剂将重组质粒转染至BSR细胞中,转染后的BSR细胞经间接免疫荧光试验和RT-PCR方法检测,重组质粒pcDNA3.1-N在BSR细胞中能正确表达N蛋白。本研究结果为BPIV-3新型疫苗的研制奠定基础。
- 师新川温永俊王凤雪王炜王建科程世鹏武华
- 关键词:真核表达N基因
- 一种用于鉴别FPV和CPV的HRM引物组,含有该引物组的试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于鉴别犬细小病毒(CPV)和猫细小病毒(FPV)的HRM引物组,含有该引物组的试剂盒及其应用。所述的引物组由上游引物和下游引物组成,所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述的下游引物...
- 王建科程悦宁孙亚茹程世鹏林鹏易立仝明薇
- 文献传递
- 犬源干扰素刺激基因ISG15和IFIT2荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量:1
- 2020年
- 干扰素刺激基因在抗病毒及调节IFN信号通路的过程中具有重要作用。本课题组前期对犬瘟热病毒(CDV)感染宿主前后全转录组进行测序分析,发现干扰素刺激基因ISG15和IFIT2明显上调,为了进一步探究ISG15和IFIT2对CDV感染的影响,本研究设计合成了犬源ISG15、IFIT2和持家基因GAPDH的特异性引物,分别进行PCR扩增,构建质粒标准品,建立荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行检验。结果表明,犬源ISG15、IFIT2和GAPDH的荧光定量PCR标准曲线的相关性R^2均大于0.98,表明线性关系良好。ISG15、IFIT2和GAPDH的融解曲线均为单峰,扩增产物单一,且峰值一致,表明建立的荧光定量PCR方法特异性良好。组内与组间的变异系数均小于0.2%,表明该方法重复性较好。对CDV感染宿主细胞前后的ISG15和IFIT2 mRNA表达水平进行检测,发现CDV感染后ISG15和IFIT2的表达量升高,表明ISG15和IFIT2在CDV感染过程中发挥重要作用。该结果为针对CDV与干扰素抗病毒研究的开展提供重要的技术手段,并为进一步揭示CDV致病的分子机制奠定基础。
- 王改丽程悦宁张淑琴王建科王超孙娜易立程世鹏
- 关键词:犬瘟热病毒ISG15荧光定量PCR