沈岱菲
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：汕头大学医学院药理学教研室更多>>
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- Ghrelin对大鼠主动脉血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响
- 2013年
- 目的:研究Ghrelin对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)内游离钙离子浓度的影响,并揭示Ghrelin血管活性的调节机制。方法:组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs,Western blot验证生长激素促泌素受体(GHS-R1a)在VSMCs中的表达。钙荧光染料furo-2AM标记VSMCs,高速钙离子成像分析系统检测Ghrelin对静息状态胞内钙荧光强度(FI)的影响,并观察Ghrelin对KCl和AngII增强胞内钙FI作用的影响,以及腺苷酸环化酶抑制剂Sq22536和GHS-R1a拮抗剂(D-Lys3)-GHRP-6对Ghrelin作用的影响。结果:GHS-R1a在VSMCs内有表达。Ghrelin本身对VSMCs内钙FI无作用,也不能抑制KCl引起的VSMCs内钙FI升高,但可抑制AngII引起的VSMCs内钙FI升高,而这种抑制作用可被Sq22536和GHS-R1a逆转。结论:Ghrelin可抑制由AngII引起的大鼠主动脉VSMCs胞内钙离子的升高,机制可能和激活cAMP/PKA信号通路有关。
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- 关键词：GHRELIN血管平滑肌细胞细胞内钙
- 二步酶消化法分离大鼠主动脉血管平滑肌细胞及活性鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:建立一种有效、方便的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的酶解分离方法。方法:采用二步酶消化法分离VSM-Cs,显微镜下观察细胞形态,锥虫蓝染色观察细胞成活率,荧光显微镜检测细胞内钙荧光强度(FI)在KCl刺激下的变化,全细胞膜片钳记录电压-依赖性钾电流。结果:分离的VSMCs镜下呈典型的梭状或长条状,成活率达68.0%;VSMCs内钙FI在KCl刺激下可增高;并可记录到稳定的电压-依赖性钾电流。结论:本法可获得大量形态和结构良好的VSMCs,且胞膜离子通道功能良好。
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- 关键词：血管平滑肌细胞急性分离
- 核转录因子E47与心肌缺血再灌注诱导心肌纤维化之关系初探
- 核转录因子E47亦称Transcription Factor-3（TCF-3），是E2A基因编码的两个不同的碱性螺旋环螺旋（basic Helix-Loop-Helix，bHLH）转录因子（E12和E47）之一。E47以...
- 沈岱菲
- 关键词：心肌缺血再灌注心肌纤维化核转录因子动物模型
- 文献传递
- 缺氧抑制转化生长因子-β1诱导H9C2心肌细胞的表型转变
- 2015年
- 目的:观察转化生长因子(TGF)-β1和缺氧对H9C2心肌细胞表型转变的影响及其相互作用。方法:在H9C2中进行不同浓度(1、5、10、20、30 ng/m L)TGF-β1诱导和不同时间缺氧实验,分别观察H9C2中α-平滑肌肌动蛋白(SMA)表达,以及两者同时作用的影响。观察缺氧对TGF-β1下游信号通路Smad、MAPK家族和Rho A表达的影响。结果:予5 ng/m L TGF-β1作用24 h,可诱导H9C2中α-SMA表达增高,并达峰值;而单纯缺氧不能诱导H9C2中α-SMA表达增高。随着缺氧时间增加,α-SMA表达逐渐降至对照组水平。p-Smad2/3和p-Rho A会随着缺氧时间延长而逐渐减低。结论:缺氧可抑制TGF-β1诱导的H9C2表型转变,其机制可能是通过抑制其下游信号通路中p-Smad2/3和p-Rho A而起作用。
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- 关键词：缺氧
- 在心肌细胞中核转录因子E47与α-平滑肌肌动蛋白的关系初探
- 2015年
- 目的:观察缺氧/复氧(H/R)刺激对心肌细胞核转录因子E47及α-平滑肌肌动蛋白(SMA)表达影响及两者间关系,以探索H/R刺激对心肌纤维化影响。方法:用原代心肌细胞和心肌细胞株(H9c2)建立H/R模型,观察不同H/R时间点E47和α-SMA表达。用凝胶迁移实验在E47表达最高时间点检测其与α-SMA启动子E-box序列的结合活性。结果:E47蛋白及m RNA表达水平在原代心肌细胞和H9c2 H/R后均表达增高,以H3 h/R2 h时间点最高,随着复氧时间的延长,E47表达逐渐降低,而α-SMA及m RNA表达水平则无明显变化;即在心肌细胞E47与α-SMA启动子E-box序列无结合活性。结论:在心肌细胞中,E47与包含α-SMA启动子序列的E-box序列CAr G无结合活性,H/R诱导其短时表达增高并不能引起α-SMA表达增高。
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- 关键词：Α-平滑肌肌动蛋白
