李敏芳
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 叶酸受体介导的壳聚糖-pGPU6/GFP/Neo纳米粒靶向转染肿瘤细胞的特点被引量：2
- 2010年
- 目的:研究叶酸受体介导下的壳聚糖-pGPU6/GFP/Neo纳米粒在叶酸受体表达程度不同的肿瘤细胞中的靶向转染特点。方法:制备叶酸偶联壳聚糖pGPU6/GFP/Neo纳米粒(folate-chitosan-pGPU6/GFP/Neo,FA-CS-DNAnano)和壳聚糖pGPU6/GFP/Neo纳米粒(chitosan-pGPU6/GFP/Neo,CS-DNAnano),红外光谱扫描鉴定其合成,透射电镜观测纳米粒的形态特征及直径大小。纳米粒转染叶酸受体表达阳性的人类卵巢癌细胞系SKOV3、乳腺癌细胞系MCF-7和宫颈癌细胞系HeLa,流式细胞术检测细胞转染效率,MTT法检测纳米粒的细胞毒性。结果:成功制备FA-CS-DNAnano和CS-DNAnano,纳米粒接近球型、表面光滑、结构均匀;FA-CS-DNAnano直径为(78.1±0.3)nm,CS-DNAnano直径为(138.4±0.7)nm。FA-CS-DNAnano在SKOV3和MCF-7细胞的转染效率明显高于CS-DNAnano[(24.3±0.7)%vs(0.7±0.1)%,(16.8±1.2)%vs(0.3±0.1)%;均P<0.01],而在HeLa细胞中两者转染效率无明显差异(P>0.05)。FA-CS-DNAnano转染前后MCF-7、SKOV3和HeLa细胞的活力分别为(87.9±2.4)%、(91.4±1.0)%、(97.4±1.1)%和(63.0±2.5)%、(90.6±1.3)%、(99.3±1.6)%。结论:对于叶酸受体强阳性表达的SKOV3和MCF-7肿瘤细胞,叶酸偶联壳聚糖是良好的靶向基因转运载体。
- 杨琰卢实李敏芳王泽华
- 关键词：叶酸壳聚糖卵巢肿瘤宫颈肿瘤
- 叶酸受体-α在卵巢癌耐药细胞株中的表达及其介导的多药耐药的靶向逆转被引量：3
- 2011年
- 目的:研究叶酸受体-α(folic acid receptor-α,FR-α)在卵巢癌多药耐药细胞株中的表达水平,并探讨FR-α靶向的MDR1小干扰RNA(siRNA)纳米粒对卵巢癌多药耐药细胞的逆转效果。方法:采用体外浓度梯度递增法建立卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3-ts,应用激光共聚焦法检测FR-α的表达水平。复凝聚法将叶酸修饰壳聚糖载体包裹靶向MDR1的PGPU6/GFP/Neo/PshRNA真核表达质粒(PshRNA-MDR1),形成叶酸修饰壳聚糖PshRNA-MDR1纳米粒(FA-CS-PshRNA)。采用RT-PCR、Western blot检测叶酸修饰前后,纳米粒转染细胞后MDR1 mRNA及蛋白的表达,MTT法检测SKOV3-ts半数抑制浓度(IC50)的变化。结果:激光共聚焦法显示,耐药细胞株SKOV3-ts胞膜层有FR-α强表达,经叶酸修饰后,FA-CS-PshRNA纳米粒较CS-PshRNA能更有效降低靶细胞SK-OV3-ts的靶基因MDR1 mRNA和P-gp蛋白表达(P<0.01),并逆转SKOV3-ts细胞针对紫杉醇的IC50(0.3830±0.0096 vs 0.0353±0.0006,P<0.01)。结论:经FR-α介导,FA-CS-PshRNA能更有效敲除MDR1的表达,靶向逆转卵巢癌多药耐药。
- 杨琰卢实钟俊李敏芳王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤多药耐药
- 肿瘤转移抑制基因nm23-H1对不同宫颈癌细胞侵袭和增殖的作用被引量：10
- 2009年
- 背景与目的:nm23-H1是一种多效性基因,其抑癌作用有一定的组织特异性。本研究目的在于探讨nm23-H1对不同宫颈癌细胞增殖和侵袭的作用。方法:将真核表达载体pcDNA3.1-nm23-H1转染入宫颈癌细胞,Transwell小室法检测转染前后细胞侵袭性改变。MTT法绘制生长曲线,比较细胞增殖能力。流式细胞仪检测细胞周期改变。结果:与亲本细胞Caski、SiHa和空载体转染细胞Caski-3.1、SiHa-3.1相比,pcDNA3.1-nm23-H1转染细胞Caski-N和SiHa-N的侵袭力和增殖受到明显抑制(P<0.05),G2/M期和S期细胞比例降低(P<0.05),而G0/G1期细胞比例明显增加(P<0.05)。nm23-H1对HeLa细胞增殖、侵袭及细胞周期均无明显影响(P>0.05)。结论:nm23-H1对不同宫颈癌细胞的增殖和侵袭等细胞表型可产生细胞特异性的抑制作用。
- 杨琰卢实李敏芳王泽华
- 关键词：转染宫颈肿瘤增殖细胞周期
