李小兰
- 作品数：76 被引量：251H指数：9
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 细胞周期蛋白在胃肠癌中的表达及临床意义被引量：3
- 2005年
- 目的探讨细胞周期蛋白在胃肠癌中的表达及临床意义。方法用间接免疫荧光双标法在激光扫描共聚焦显微镜下检测33例胃肠癌患者手术标本和内窥镜活检组织标本中cyclin蛋白的表达及其差异。结果在手术切除标本或内镜活检组织标本中,四种cyclin在胃癌和大肠癌中的表达均有一定的阳性表达率,与正常胃肠黏膜相比,具有显著性差异(P<0.05),而四种cyclin在胃癌和大肠癌中的表达率差异则无显著性意义(P>0.05)。cyclinD1、cyclinE、cyclinA和cyclinB1在手术前后肿瘤组织中的表达差异均有显著性意义(P<0.05)。结论cyclin蛋白在胃肠肿瘤的发生、发展中起重要作用。内镜活检组织cyclin的检测对胃肠肿瘤的早期发现有一定意义。
- 杨玉珍黄曼玲李小兰胡俊波龚建平
- 关键词：胃肠癌细胞周期蛋白激光扫描共聚焦显微镜
- Calcein-AM和Annexin V在流式细胞术检测早期细胞凋亡的敏感性比较
- 2006年
- 目的比较Calcein-AM与Annexin V用于流式细胞术检测活细胞早期凋亡时的敏感性,建立新的检测细胞早期凋亡的方法。方法将人类急性T淋巴细胞白血病细胞株(Molt-4)经喜树碱(CPT)、紫外线(UV)诱导后,分别采用Calcein-AM及异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V)染色,然后用流式细胞仪分析凋亡率,通过比较诱导后不同时间点的凋亡率来分析Calcein-AM和Annexin V对于检测细胞早期凋亡的敏感性。结果在喜树碱诱导模型中,加药后2 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而3 h后才能用Annexin V检测到;在紫外线诱导模型中,照射后1 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而要在2 h后才能用Annexin V检测到。结论Calcein-AM用于检测活细胞早期凋亡比Annexin V更为敏感,是一种稳定、可靠、灵敏度高并且较为经济的检测细胞早期凋亡的活细胞染料。
- 王佳冯永东陶德定李小兰肖薇刘双又余从年龚建平
- 关键词：流式细胞术凋亡膜联蛋白V
- 化疗对患者口腔黏膜细胞生长状态的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:了解化疗药物对患者口腔黏膜细胞的生长更新状态的影响。方法:选取21例因胃部肿瘤行胃大部切除术后接受化疗患者,其中10例为术后第1次化疗,11例为术后第6次化疗。用流式细胞术亚G1峰法和增殖抗原Ki67标记法分别检测口腔黏膜的凋亡率和增殖率,常规留取患者的血常规资料,通过统计学分析化疗患者的口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率与骨髓抑制之间的关系。结果:第6次化疗组的白细胞计数较第1次化疗组和健康对照组显著下降(P<0.01);第6次化疗组口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率较第1次化疗组和健康对照组显著下降(P<0.05)。结论:化疗可以影响口腔黏膜细胞的凋亡和增殖状态。
- 魏欣高纯朱真闯邹游李小兰陶德定龚建平
- 关键词：口腔黏膜细胞细胞凋亡细胞增殖化疗
- TAT-N24穿膜融合多肽对HepG2细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的观察TAT-N24穿膜融合多肽对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法用纯化的TAT-N24穿膜融合多肽处理HepG2细胞,使用流式细胞仪检测细胞周期;采用BrdU掺入法检测细胞DNA合成;采用Western Blot法检测细胞内相关蛋白的表达水平。结果空白组、对照多肽组和TAT-N24处理组细胞BrdU掺入阳性率分别为42.7±3.6%、38.2±2.8%和25.3±2.7%(P<0.05);G0/G1期细胞比例分别为52.6±4.7%、52.0±4.6%和68.6±4.7%(P<0.05);三组细胞AKT磷酸化水平无显著性差异。结论 TAT-N24穿膜融合多肽能有效阻滞肝癌HepG2细胞的细胞周期进程,抑制DNA合成。TAT-N24穿膜融合多肽有望被开发为有效的肿瘤分子靶向治疗药物。
- 邓豫王桂华金源李小兰陶德定李维娜龚建平胡俊波
- 关键词：HEPG2细胞分子靶向治疗
- RANTES及其受体在胃癌中的表达及其意义探讨被引量：5
- 2008年
- 目的探讨RANTES及其受体(CCR5)在胃癌和转移淋巴结组织中的表达及其与胃癌转移的关系。方法采用流式细胞仪CCR5/DNA和RANTES/DNA双参数法检测CCR5在胃癌以及RANTES在有癌组织转移的淋巴结中的表达情况。结果胃癌组织中CCR5的表达率[(21.53±3.10)%]明显高于癌旁组织[(10.10±1.30)%](P<0.05)。有肿瘤转移的淋巴结组织中RANTES的表达[(63.50±5.25)%]明显高于正常淋巴结组织[(44.40±4.76)%](P<0.05)。结论趋化因子RANTES及其受体可能参与了胃癌转移的调控。
- 曹志新徐向上王静李小兰陶德定龚建平
- 关键词：胃肿瘤RANTES肿瘤转移
- HAX1和EGFP共表达重组腺病毒载体的构建、鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的构建和鉴定HAX1和EGFP双基因共表达重组腺病毒载体。方法采用DNA重组技术，将目的基因HAX1克隆至含有报告基因EGFP的穿梭质粒pAdTrack—CMV中，并转化于大肠埃希菌DH5a；筛选出重组质粒pAdTrack—CMV—HAX1，并在BJ5183细菌中与pAdEasy-1质粒进行同源重组，产生重组腺病毒载体；用lipofectamine将其转染HEK293细胞，包装携带全长HAX1的重组复制缺陷型腺病毒pad—HAX1-EGFP，酶切和序列测定鉴定；用制备好的Ad—HAX1-EGFP感染HEK293细胞，流式细胞术检测其感染效率，RT—PCR、Western印迹鉴定外源基因HAX1的表达。BrdU检测感染了Ad—HAX1-EGFP的HEK293细胞增殖情况。结果pAdTrack—CMV—HAX1重组质粒构建成功。pAdTrack—CMV—HAX1质粒与pAdEasy-1质粒同源重组后与预期结果相符。构建好的Ad—HAX1-EGFP能有效感染HEK293细胞；外源基因能在239细胞中有效表达。HAX1高表达的HEK293细胞其增殖率得以提高。结论成功构建了表达HAX1和EGFP共表达的重组腺病毒载体，HAX1能够促进结肠癌细胞HEK293细胞的增殖。
- 李小兰徐向上李兆明王桂华魏欣罗学来刘慎沛肖徽陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：重组腺病毒增殖
- 肠外瘘对患者口腔黏膜细胞凋亡和增殖的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:通过测定口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率来评估肠外瘘对患者营养状况的影响。方法:选取25例肠外瘘住院患者为实验组,同时设12例健康人作对照组。用流式细胞术亚G1峰法和增殖抗原Ki67标记法分别检测口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率。通过统计学分析两组之间口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率的差异。并检测实验组的血液生化指标来比较该实验方法与传统的营养评估方法的优缺点。结果:肠外瘘患者口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率明显低于健康对照组,肠外瘘患者口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率的降低早于血液生化指标的改变。结论:口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率的变化与肠外瘘导致的营养障碍密切相关,其检测可以作为一种新的灵敏、可靠的营养评估方法。
- 邹游李小兰肖徽陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：口腔黏膜细胞凋亡增殖营养肠外瘘
- 腧穴经络识别方法
- 一种腧穴识别方法，在于包括以下步骤：(1)参考中医经络图谱和指压反应法，定出被识别腧穴的位置；(2)将Ca<Sup>2+</Sup>传感针插入被测部位，连接好PCa<Sup>2+</Sup>测试仪连线。记录该测量仪的测量...
- 任恕周宜开孔鄂生洪大清李小兰许冰喻风兰
- 文献传递
- 香烟烟雾提取物对人呼吸道上皮细胞DNA损伤和凋亡的影响被引量：9
- 2006年
- 背景与目的:香烟烟雾可以致多种细胞发生DNA损伤已有报道证实。本研究旨在进一步阐明香烟烟雾提取物(cigarettesmokeextract,CSE)作用于正常人类支气管上皮细胞系(normalhumanbronchialepithelialcells,NHBE)和肺腺癌细胞系SPC-A1后引起的DNA损伤和凋亡情况。方法:不同浓度的CSE作用于NHBE和SPC-A1细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测两种细胞活性。荧光标记的磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)抗体特异性标记细胞核内DNA双链断裂(DNAdouble-strandbreaks,DSBs)处的γ-H2AX,然后用流式细胞仪定量检测并分析DNA损伤。用免疫印迹检测γ-H2AX表达。同时,亚G1峰法(SubG1peak)和AnnexinⅤ-FITC/碘化丙啶双染色流式细胞术检测CSE诱导的细胞凋亡。用激光共聚焦显微镜观察细胞损伤和凋亡形态学变化。结果:MTT结果显示,随CSE浓度和作用时间增加,细胞活性均逐渐降低。CSE可引起细胞DNA双链断裂,γ-H2AX最大值在作用后4h左右,然后逐渐降低。DNA损伤后平均12h可以出现凋亡。另外,激光共聚焦显微镜观察到两种细胞内的γ-H2AX量在细胞受到CSE刺激后快速大量的积聚,呈现典型细胞损伤的形态学变化,较为明显的凋亡形态学特征4h后方可出现。结论:CSE能直接引起NHBE和SPC-A1细胞的DNA损伤和凋亡,且存在着浓度和时间依赖关系。
- 付强成静韩中博李小兰陈小燕张鹏肖徽陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：Γ-H2AX凋亡
- 宫颈癌细胞株和正常间质细胞株受X线照射后的辐射效应被引量：4
- 2007年
- 目的用宫颈癌、正常血管内皮和正常成纤维细胞株体外模拟宫颈癌实质和间质组织,研究其受到不同剂量放射线照射后的辐射效应。方法采用宫颈腺癌细胞株HeLa,宫颈鳞癌细胞株SiHa、C33A、Caski,人脐静脉内皮细胞株ECV304,及小鼠成纤维细胞株NIH/3T3细胞,分别用6MV的X线（300cGy/min）照射6和10Gy,24和48h后收集细胞,行PI染色,流式细胞术检测凋亡率和细胞周期变化。结果细胞株受到照射后,C33A凋亡率最高,而SiHa凋亡率最低,其余细胞株（包括ECV304与NIH/3T3细胞）均介于两者之间;各宫颈癌细胞株及NIH/3T3照射10Gy后48h的凋亡率较6Gy稍高（P〉0.05）,而ECV304照射10Gy后48h的凋亡率（13.04%±1.08%）比照射6Gy（6.51%±0.61%）明显升高（P=0.001）;各细胞株受到不同剂量照射后,均表现出明显的G2/M期阻滞,且阻滞细胞百分比随照射剂量增加而增加;受到照射后一般在24-48hG2/M期阻滞细胞百分比最高。结论高剂量照射可以提高血管内皮细胞的凋亡率,并导致剂量依赖性的G2/M期阻滞,为预测宫颈癌的高剂量放疗提供理论依据。
- 庄亮于世英黄晓园李小兰熊华郑祖安冷彦
- 关键词：宫颈癌细胞照射G2/M期阻滞
