- 细胞学联合组织学在子宫内膜病变无创筛查中的应用价值被引量：9
- 2016年
- 目的:探讨联合应用组织学及细胞学的方法筛查子宫内膜病变的临床应用价值。方法:选取62例有异常阴道出血或B超提示子宫内膜异常需行诊断性刮宫的妇女,术前使用一种特制的带有负压吸引装置的子宫内膜取样器进行宫腔细胞学采样,将细胞学及无创组织学的结果与诊断性刮宫后病理结果比较,分析其取材满意度、诊断符合率、出血量及疼痛程度。结果:子宫内膜取样器取材满意率为98.4%,细胞学诊断的敏感性、特异性及符合率分别达到83.3%、93.9%和91.8%;子宫内膜取样器中组织物获得率91.9%,通过取样器获得组织学的患者与其细胞学联合,诊断敏感性、特异性及准确率达到84.6%、95.8%和93.4%。子宫内膜取样器取材操作中出血量平均为(1.2±0.9)ml;诊断性刮宫取材满意率为100%,出血量平均为(6.3±8.3)ml。结论:可通过子宫内膜取样器获得子宫内膜的宫腔细胞学及组织学标本,从而做到简单、安全、可靠地筛查子宫内膜病变。
- 张英兰赵雨吕昌帅郎景和
- 关键词：子宫内膜病变
- 哌立福辛联合顺铂对卵巢透明细胞癌ES2细胞系凋亡及Caspase-3和PARP表达的影响
- 2015年
- 目的:探讨哌立福辛(perifosine)与顺铂(cisplatin)联合对人卵巢透明细胞癌ES2细胞系凋亡及Caspase-3和PARP表达的影响。方法:以不同浓度(0、2、4、6、8和10μmol/L)哌立福辛作用于人卵巢透明细胞癌ES2细胞系48h。CCK-8法检测细胞增殖抑制情况。以哌立福辛最小有作用剂量与不同浓度(0、10、40、70和100μmol/L)顺铂联合处理细胞48h,以金氏公式筛选出协同抑制作用最明显的联合剂量,以该联合剂量处理ES2细胞48h后,DAPI染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡情况;用Giemsa染色检测细胞有丝分裂指数;Western blot法检测细胞中Caspase-3(cleaved)及PARP(cleaved)蛋白的表达情况。结果:CCK-8法检测提示,哌立福辛作用48h时对ES2细胞的最小作用剂量为4μmol/L。金氏公式计算结果提示,4μmol/L哌立福辛+40μmol/L顺铂联合用药协同抑制细胞增殖作用最强(q=1.21);与哌立福辛或顺铂单独作用相比,DAPI染色发现联合用药组镜下可见大量的核碎裂及凋亡小体;流式细胞仪检测发现,联合用药能协同增加细胞凋亡率(q=1.32,P<0.01)。Giemsa染色结果显示,联合用药能协同抑制细胞有丝分裂(P<0.01)。Western blot检测发现,联合用药能明显增加细胞中Caspase-3(cleaved)蛋白的表达,降低PARP(cleaved)蛋白的表达。结论:哌立福辛与顺铂联合能协同通过增加Caspase-3(cleaved)蛋白表达及降低PARP(cleaved)蛋白表达,促进人卵巢透明细胞癌ES2细胞发生凋亡。
- 吕昌帅张英兰郎景和
- 关键词：顺铂CASPASE-3PARP凋亡
- 核仁素表达下调对宫颈癌细胞Hela生物学行为的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨核仁素表达下调对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响。方法实验分4组:3个靶向人核仁素基因的实验组(siN1组、siN2组、siN3组)及1个阴性对照组(NC组)。体外化学合成各组siRNA并转染HeLa细胞;利用荧光实时定量RT-PCR法和Western blotting法分别从mRNA和蛋白水平检测核仁素基因的干扰效率,并筛选出干扰效率最高的片段;利用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测核仁素下调对HeLa细胞增殖活性的影响;利用流式细胞学Annexin V-FITC检测转染后HeLa细胞凋亡率的改变;Transwell实验检测转染后细胞侵袭能力的改变。结果与NC组相比,各实验组核仁素mRNA表达水平均下降(P<0.05);蛋白表达水平也相应下调(P<0.05)。成功筛选出最佳干扰片段siN2,用于后续实验。siN2组HeLa细胞生长速率明显受到抑制(P<0.05);流式细胞学Annexin V-FITC检测siN2组HeLa细胞凋亡率明显高于NC组(P<0.05);Transwell实验显示siN2组HeLa细胞侵袭能力减弱(P<0.05)。结论核仁素表达下调明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖与侵袭能力,促进细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供了理论依据。
- 刘洪丽张友忠吕昌帅丁佰娟王颉
- 关键词：HELA细胞小分子干扰核仁素
- TMPyP4-PDT对人宫颈癌细胞的杀伤效应被引量：3
- 2012年
- 目的探讨端粒酶抑制剂四甲基吡啶卟啉光动力治疗(TMPyP4-PDT)对人宫颈癌细胞株HeLa的杀伤效应。方法细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK8)法检测TMPyP4-PDT对人宫颈癌细胞HeLa的抑制作用;光镜下观察细胞形态变化;Annexin-V-FITC/PI双染试剂盒检测细胞凋亡率;RT-PCR法测定原癌基因c-myc、人类染色体端粒酶基因hTERC的变化。结果在一定浓度范围内,TMPyP4-PDT对人宫颈癌HeLa细胞生长增殖的抑制作用和诱导凋亡作用随着浓度和光照能量的增加而增加。光镜下可观察到细胞坏死和凋亡样改变。RT-PCR法测定c-myc mRNA、hTERC mRNA的表达降低。结论 TMPyP4-PDT对人宫颈癌HeLa细胞有明显的杀伤作用,并在一定范围内呈光剂量和浓度剂量依赖性。其作用机制可能与降低c-myc、hTERC mRNA的表达量有关。
- 丁佰娟张友忠吕昌帅姜侃刘洪丽
- 关键词：HELA细胞
- 阳离子卟啉对人宫颈癌Caski细胞光动力学杀伤效应的研究
- 背景:子宫颈癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，近数十年来基于宫颈细胞学筛查的广泛应用，使宫颈癌在癌前病变阶段就能够被早期发现，从而进行干预及治疗，现如今晚期宫颈癌发病率和死亡率已有明显下降，但是，其发病呈年轻化趋势。光动力学...
- 吕昌帅
- 关键词：子宫颈癌光动力学疗法多肿瘤抑制基因
- 文献传递
- TMPyP4-PDT对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用及其对MCM2和CA-Ⅸ mRNA表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:观察四-(N-甲基-4-吡啶基)卟啉(TMPyP4)对人卵巢癌A2780细胞的光动力学杀伤作用及其对微型染色体维持蛋白2(MCM2)和碳酸酐酶Ⅸ(CA-Ⅸ)mRNA表达水平的影响,阐明TMPyP4-PDT(光动力疗法)对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用机制。方法:体外培养人卵巢癌A2780细胞株,按不同处理因素分为空白对照组、单纯TMPyP4组、单纯PDT组和TMPyP4-PDT组。采用CCK-8法检测TMPyP4-PDT对A2780细胞株的增殖抑制作用。流式细胞术测定不同浓度TMPyP4对A2780细胞株凋亡的影响。光镜下观察各组细胞HE染色的形态学变化。实时荧光定量PCR法检测MCM2和CA-IX mRNA表达水平的变化。结果:与空白对照组比较,单纯TMPyP4组随着药物浓度的增加,细胞的增殖抑制率逐渐增加(P<0.05);单纯PDT组细胞增殖抑制率增加不明显(P>0.05);TMPyP4-PDT组细胞增殖抑制率随着药物浓度及激光能量密度的增加而增加(P<0.05)。流式细胞术检测,TMPyP4-PDT可诱导A2780细胞凋亡,在激光能量密度为4J.cm-2的条件下,3、6、15、30和60μmol.L-1 TMPyP4作用4h,A2780细胞凋亡率分别为(9.46±0.04)%、(17.7±0.3)%、(25.4±0.2)%、(30.2±0.2)%和(66.3±0.3)%。光镜下可观察到空白对照组及单纯PDT组贴壁细胞多,无核固缩及核碎裂样改变;单纯TMPyP4组及TMPyP4-PDT组贴壁细胞减少,出现核固缩、空泡及部分胞浆溶解样改变。实时荧光定量PCR法检测,在激光能量密度为4J.cm-2的条件下,3、6、15、30和60μmol.L-1TMPyP4作用4h,MCM2和CA-IX mRNA表达水平明显降低,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:TMPyP4-PDT对人卵巢癌A2780细胞有明显杀伤作用,其机制可能与负性调节MCM2和CA-Ⅸ的表达有关。
- 吕昌帅张友忠丁佰娟姜侃刘洪丽
- 关键词：A2780细胞光动力治疗
- 子宫内膜癌患者术前诊刮与术后大体病理对比研究被引量：7
- 2016年
- 目的:评价诊断性刮宫(诊刮)的病理结果对于子宫内膜癌患者术前评估的价值。方法:选择北京协和医院术前诊刮及术后大体病理均为子宫内膜癌的患者共217例,与术后大体病理进行对比,从病理类型及组织学分级分别讨论其诊断准确率。结果:术前诊刮病理类型显示子宫内膜样癌196例,非子宫内膜样癌21例;与术后大体病理类型比较敏感度97.4%,特异度72.7%,Kappa值=0.716。术前病理组织学分级高分化G1 135例,中分化G2 50例,低分化G3 32例,与术后病理组织学分级比较加权Kappa值=0.596,Z=11.72,P=0.000。与术后大体病理相比较,术前G3组误诊率明显高于术前G1组,术前G2组与其他两组之间误诊率无明显差异。结论:术前诊刮病理对于子宫内膜癌患者术前评估有重要意义,两种病理比较,病理类型的一致性较高,术前组织学分级为低分化的患者误差较大。
- 张英兰吕昌帅周星楠郎景和
- 关键词：子宫内膜肿瘤病理类型组织学分级
- 225例子宫内膜癌患者生存预后相关因素的分析被引量：22
- 2016年
- 目的:探讨子宫内膜癌的预后及其相关因素,为子宫内膜癌的临床诊治提供参考。方法:回顾性分析2003年1月—2010年6月北京协和医院妇产科收治的225例子宫内膜癌患者的临床资料,计算生存率,Kaplan-Meier法筛选危险因素,用比例危险度回归模型(Cox回归)对危险因素进行多因素分析。结果:225例患者5年累积生存率为90.6%。单因素Kaplan-Meier分析显示,子宫内膜癌生存率与手术病理分期、组织学分级、肌层浸润深度、病理类型、术后辅助治疗、淋巴结转移和腹腔细胞学有关(P<0.05)。各手术分期患者中,行淋巴结剔除者和未行淋巴结剔除者的生存率差异无统计学意义(P>0.05)。早期子宫内膜癌患者术后接受辅助治疗和未接受辅助治疗的患者生存率差异无统计学意义(P>0.05)。Cox回归行多因素分析显示,手术分期、病理类型、组织学分级是影响子宫内膜癌预后的独立危险因素(P<0.05),非子宫内膜样癌、手术病理分期晚和组织学分级差的患者预后差。结论:子宫内膜癌总体预后良好,手术分期晚、非子宫内膜样癌、组织学分级差是子宫内膜癌预后的独立危险因素,肌层浸润深度、腹腔冲洗液等与其预后无关。
- 张英兰吕昌帅郎景和周星楠
- 关键词：子宫内膜肿瘤预后存活率比例危险度模型
- 产后避孕认识的误区及对策被引量：6
- 2019年
- 产后避孕对产后女性来说十分重要,产前宣教及产后42d随诊时应对母亲进行避孕教育和指导。过短的妊娠间隔会增加母亲及围产儿的发病率和死亡率。产后即时或尽早落实避孕措施对预防人工流产及其并发症有重要作用。本综述对产后女性避孕知识的一些误区及对策进行阐述,为产后妇女选用安全、适宜的避孕方法提供指导。
- 陈蔚琳吕昌帅刘欣燕
- 关键词：产后避孕
- ARID1A基因表达下调对卵巢透明细胞癌ES2细胞生物学功能的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨AT丰富结合域1A（ARID1A）基因表达下调对卵巢透明细胞癌细胞系ES2细胞生物学功能的影响。方法（1）设计3对ARID1A基因小分子干扰RNA（siRNA）序列，分别命名为siN1（即ARID1A-705）、siN2（即ARID1A-1513）、siN3（即ARID1A．2282），以及1对与ARID1A基因无关（阴性对照）的siRNA序列。分别采用逆转录（RT）．PCR技术和蛋白质印迹（westemblot）法检测3种不同的ARIDIA基因siRNA瞬时转染后ES2细胞中ARID1AmRNA和蛋白的表达水平，选择最佳沉默效应的siRNA干扰片段（即siN3）用于后续实验。（2）实验分为3组，即siN3转染组、阴性对照组和空白对照组，采用活细胞计数（CCK．8）法检测转染不同时间（6、24、48、72、96h）后3组细胞的增殖活性，以吸光度（A）值表示；流式细胞仪检测转染后3组细胞的凋亡情况；体外侵袭实验检测转染后3组细胞的侵袭能力；westernblot法检测转染后ES2细胞中核因子KB（NF．KB）、膜型基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）及基质金属蛋白酶2（MMP2）蛋白的表达水平。结果（1）RT—PCR技术检测显示，siN1、siN2、siN3瞬时转染后ES2细胞中ARID1AmRNA的表达水平分别为0．0078±0．0057、0．0068±0．0003、0．0028±0．0003，均明显低于阴性对照（0．0346±0．0013；P均〈0．01）；westernblot法检测显示，siN1、siN2、siN3瞬时转染后ES2细胞中ARID1A蛋白的表达水平分别为0．4394±0．0007、0．4244±0．0050,0．3860±0．0058，均明显低于阴性对照（0．7324±0．0303；P均〈0．01）。故用于后续实验的最佳沉默效应的siRNA干扰片段即为siN3。（2）CCK．8法检测显示，转染6h后，siN3转染组ES2细胞的增殖活性分别与阴性对照组及空白对照组（分别为0．506＋0．010、0．491±0．006、0．498±0．009）比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）；而转染24、48、72、96h后，siN3转染组ES2细胞的增殖活性明显高于阴�
- 吕昌帅张英兰郎景和
- 关键词：透明细胞核蛋白质类小分子干扰
