丁佰娟
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
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- 核仁素表达下调对宫颈癌细胞Hela生物学行为的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨核仁素表达下调对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响。方法实验分4组:3个靶向人核仁素基因的实验组(siN1组、siN2组、siN3组)及1个阴性对照组(NC组)。体外化学合成各组siRNA并转染HeLa细胞;利用荧光实时定量RT-PCR法和Western blotting法分别从mRNA和蛋白水平检测核仁素基因的干扰效率,并筛选出干扰效率最高的片段;利用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测核仁素下调对HeLa细胞增殖活性的影响;利用流式细胞学Annexin V-FITC检测转染后HeLa细胞凋亡率的改变;Transwell实验检测转染后细胞侵袭能力的改变。结果与NC组相比,各实验组核仁素mRNA表达水平均下降(P<0.05);蛋白表达水平也相应下调(P<0.05)。成功筛选出最佳干扰片段siN2,用于后续实验。siN2组HeLa细胞生长速率明显受到抑制(P<0.05);流式细胞学Annexin V-FITC检测siN2组HeLa细胞凋亡率明显高于NC组(P<0.05);Transwell实验显示siN2组HeLa细胞侵袭能力减弱(P<0.05)。结论核仁素表达下调明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖与侵袭能力,促进细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供了理论依据。
- 刘洪丽张友忠吕昌帅丁佰娟王颉
- 关键词：HELA细胞小分子干扰核仁素
- TMPyP4-PDT对人宫颈癌细胞的杀伤效应被引量：3
- 2012年
- 目的探讨端粒酶抑制剂四甲基吡啶卟啉光动力治疗(TMPyP4-PDT)对人宫颈癌细胞株HeLa的杀伤效应。方法细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK8)法检测TMPyP4-PDT对人宫颈癌细胞HeLa的抑制作用;光镜下观察细胞形态变化;Annexin-V-FITC/PI双染试剂盒检测细胞凋亡率;RT-PCR法测定原癌基因c-myc、人类染色体端粒酶基因hTERC的变化。结果在一定浓度范围内,TMPyP4-PDT对人宫颈癌HeLa细胞生长增殖的抑制作用和诱导凋亡作用随着浓度和光照能量的增加而增加。光镜下可观察到细胞坏死和凋亡样改变。RT-PCR法测定c-myc mRNA、hTERC mRNA的表达降低。结论 TMPyP4-PDT对人宫颈癌HeLa细胞有明显的杀伤作用,并在一定范围内呈光剂量和浓度剂量依赖性。其作用机制可能与降低c-myc、hTERC mRNA的表达量有关。
- 丁佰娟张友忠吕昌帅姜侃刘洪丽
- 关键词：HELA细胞
- TMPyP4-PDT对人宫颈癌hela、siha细胞的杀伤效应及对其c-myc、hTERC表达影响的研究
- 宫颈癌是女性常见肿瘤之一,其发病率及死亡率均居女性肿瘤的前位。目前手术、化疗、放疗仍是宫颈癌的传统治疗方法。光动力治疗/(photodynamic therapy PDT/)是近年来快速发展起来的一种治疗肿瘤的新的辅助手...
- 丁佰娟
- 关键词：光动力治疗光动力治疗C-MYC
- 文献传递
- TMPyP4-PDT对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用及其对MCM2和CA-Ⅸ mRNA表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:观察四-(N-甲基-4-吡啶基)卟啉(TMPyP4)对人卵巢癌A2780细胞的光动力学杀伤作用及其对微型染色体维持蛋白2(MCM2)和碳酸酐酶Ⅸ(CA-Ⅸ)mRNA表达水平的影响,阐明TMPyP4-PDT(光动力疗法)对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用机制。方法:体外培养人卵巢癌A2780细胞株,按不同处理因素分为空白对照组、单纯TMPyP4组、单纯PDT组和TMPyP4-PDT组。采用CCK-8法检测TMPyP4-PDT对A2780细胞株的增殖抑制作用。流式细胞术测定不同浓度TMPyP4对A2780细胞株凋亡的影响。光镜下观察各组细胞HE染色的形态学变化。实时荧光定量PCR法检测MCM2和CA-IX mRNA表达水平的变化。结果:与空白对照组比较,单纯TMPyP4组随着药物浓度的增加,细胞的增殖抑制率逐渐增加(P<0.05);单纯PDT组细胞增殖抑制率增加不明显(P>0.05);TMPyP4-PDT组细胞增殖抑制率随着药物浓度及激光能量密度的增加而增加(P<0.05)。流式细胞术检测,TMPyP4-PDT可诱导A2780细胞凋亡,在激光能量密度为4J.cm-2的条件下,3、6、15、30和60μmol.L-1 TMPyP4作用4h,A2780细胞凋亡率分别为(9.46±0.04)%、(17.7±0.3)%、(25.4±0.2)%、(30.2±0.2)%和(66.3±0.3)%。光镜下可观察到空白对照组及单纯PDT组贴壁细胞多,无核固缩及核碎裂样改变;单纯TMPyP4组及TMPyP4-PDT组贴壁细胞减少,出现核固缩、空泡及部分胞浆溶解样改变。实时荧光定量PCR法检测,在激光能量密度为4J.cm-2的条件下,3、6、15、30和60μmol.L-1TMPyP4作用4h,MCM2和CA-IX mRNA表达水平明显降低,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:TMPyP4-PDT对人卵巢癌A2780细胞有明显杀伤作用,其机制可能与负性调节MCM2和CA-Ⅸ的表达有关。
- 吕昌帅张友忠丁佰娟姜侃刘洪丽
- 关键词：A2780细胞光动力治疗
- 核仁素表达下调对宫颈癌细胞HeLa生物学行为的影响
- 目的 探讨核仁素表达下调对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响.方法 体外化学合成靶向人核仁素的siRNA,转染HeLa细胞;利用荧光实时定量RT-PCR法和Western blotting 法分别从mR...
- 刘洪丽张友忠吕昌帅丁佰娟王颉
- 新型光动力学疗法联合核仁素沉默对宫颈癌SiHa细胞的光动力学效应被引量：4
- 2014年
- 目的:研究新型光敏剂阳离子卟啉(TMPyP4)介导的光动力学疗法(PDT)联合人核仁素基因沉默对人宫颈癌SiHa细胞的体外抑瘤效应,探讨有效的宫颈癌联合治疗方案。方法:SiHa细胞分为空白对照组、RNAi组、PDT组和联合治疗组(PDT-RNAi组)。采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK8)法检测各组细胞增殖活性;采用流式细胞术定量检测各组细胞凋亡率;采用Tranwell实验检测各组细胞侵袭能力。结果:与空白对照组比较,RNAi组、PDT组和PDT-RNAi组细胞的生长抑制率明显升高(P<0.01);PDT-RNAi组细胞生长抑制率明显高于RNAi组和PDT组(P<0.05),Q值等于1.27。与空白对照组比较,各实验组细胞凋亡率增加(P<0.05),PDT-RNAi组晚期细胞凋亡率明显增加,PDT-RNAi组细胞凋亡率与RNAi组和PDT组比较差异也有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,各实验组细胞侵袭性均减弱(P<0.05);PDT-RNAi组细胞侵袭性减弱最为显著,且与RNAi组和PDT组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:新型PDT对SiHa细胞具有良好的体外光动力效应,可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖和侵袭,促进其凋亡。核仁素基因沉默对SiHa细胞的PDT具有协同增效作用,PDT联合核仁素沉默可能成为治疗肿瘤的新方案。
- 刘洪丽吕昌帅丁佰娟王颉李姗张友忠
- 关键词：SIHA细胞
- 阳离子卟啉对宫颈癌细胞株Caski的光动力学杀伤效应被引量：5
- 2012年
- 目的探讨阳离子卟啉(TMPyP4)对宫颈癌细胞株Caski的光动力学杀伤效果和可能作用机制,为光动力学治疗(PDT)在宫颈癌动物荷瘤模型以及临床应用中提供理论依据。方法以宫颈癌细胞株Caski为研究对象,以TMPyP4为光敏剂,按照不同处理因素分为正常对照组、单纯PDT组、单纯TMPyP4组和TMPyP4-PDT组。采用四甲基偶氮唑蓝法检测TMPyP4-PDT对宫颈癌细胞株Caski体外生长的抑制作用,光镜下观察细胞形态变化。采用Annexin V-PI双标记法检测细胞凋亡率。采用实时荧光定量PCR检测TMPyP4-PDT对Caski细胞Ki-67、MCM2、P16、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达水平的影响。结果单纯TMPyP4组和TMPyP4-PDT组对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖性;单纯PDT组对细胞增殖的抑制作用不明显(P>0.05)。光镜下可观察到单纯PDT组贴壁细胞多,无核固缩及核碎裂样改变;单纯TMPyP4组及TMPyP4-PDT组细胞出现胞质空泡化、细胞体积缩小、细胞核碎裂及凋亡小体形成等。流式细胞术检测结果显示,TMPyP4-PDT可诱导Caski细胞凋亡,且随着药物浓度的增加,细胞凋亡百分比增加。实时荧光定量PCR检测发现,随着药物浓度的增加,Caski细胞Ki-67、MCM2、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达水平明显降低,P16 mRNA表达水平升高,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 TMPyP4-PDT对宫颈癌细胞株Caski有明显的杀伤作用,其机制可能与正性调节P16以及负性调节Ki-67、MCM2、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达量有关。
- 吕昌帅丁佰娟刘洪丽姜侃张友忠
- 关键词：光动力疗法KI-67MCM2P16
