金鑫
- 作品数：2 被引量：13H指数：2
- 供职机构：安徽省立医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高效毛细管电泳测定海马组织和脑脊液中氨基酸类神经递质被引量：8
- 2007年
- 目的建立测定大鼠海马组织和人脑脊液中氨基酸类神经递质的高效毛细管电泳分析方法。方法用高效毛细管电泳技术,选用总长60 cm、有效长度50.5 cm、直径75μm熔融石英毛细管,在20 kV电压下快速分离4种氨基酸。以100 mmol/L硼酸-三羟甲基氨基甲烷（Tris）（1∶1,含1%异丙醇）为电泳缓冲液（pH值为10.35）,激光诱导荧光检测器进行检测,并对此方法进行方法学评价。同时检测45例患者脑脊液的氨基酸含量。结果谷氨酸（GLU）、天冬氨酸（ASP）、γ-氨基丁酸（GABA）、甘氨酸（GLY）4种氨基酸能在15 min内分离,线性范围为1.0~100.0μmol/L,GLU、ASP、GABA、GLY最低检出限分别为10、23、18、15 nmol/L,4种氨基酸的批内精密度范围4.44%~9.72%,批间精密度范围6.96%~10.50%。4种氨基酸的回收率不低于88.1%。全面性大发作癫痫患者GLU、GLY、ASP含量显著高于对照组（P〈0.05）,而GABA较对照组差异无统计学意义;复杂部分性发作癫痫患者4种氨基酸含量较对照组显著增加（P〈0.05）。结论高效毛细管电泳具有快速、灵敏、准确的特点,为临床和科研提供了一种有效的方法。
- 宣柳沈佐君何晓东伊茂礼金鑫鲁明傅先明
- 关键词：神经递质高效毛细管电泳
- 亲和毛细管电泳法测定甲氨蝶呤对映体与二氢叶酸还原酶反应动力学参数被引量：5
- 2008年
- 目的建立一种测定氨甲蝶呤（MTX）两种对映体与二氢叶酸还原酶（DHFR）结合反应动力学参数的方法。方法建立DHFR反应体系，采取亲和毛细管电泳技术，以含0．2％Brij-35的pH 9．50的50mmol／L硼砂为电泳缓冲液，检测波长为254nm，在25kV的电压下，分离反应体系中各组分。观察酶反应前后的电泳图谱并根据反应生成物峰面积的变化计算相关反应动力学参数，将不同浓度的氨甲蝶呤两种对映体L-（＋）-MTX和D-（-）-MTX分别作用于所建立的DHFR反应体系，测定两种对映体的半数抑制浓度（IC50）。结果建立了亲和毛细管电泳法对氨甲蝶呤对映体与DHFR反应动力学参数的测定方法，在30min内实现DHFR反应体系中反应物和生成物的分离，并根据反应生成物峰面积的变化计算得出D-（-）-MTX的IC50为3．17×10^-7 mol／L，L-（＋）-MTX的IC50为2．48×10^-8 mol／L，两者相差13倍左右。结论亲和毛细管电泳的方法可以快速准确地用于DHFR反应动力学参数的研究，通过检测MTX对映体对DHFR的抑制能力的差异，首次发现MTX对映体对DHFR有立体选择性作用。
- 金鑫沈佐君何晓东
- 关键词：甲氨蝶呤药代动力学
