蔡炯
- 作品数：43 被引量：67H指数：4
- 供职机构：北京协和医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 免疫监测点阻断药物和肿瘤疫苗联合的制药用途
- 本发明公开了免疫监测点阻断药物和肿瘤疫苗联合在制备用于治疗癌症的药物的用途。通过将免疫监测点阻断药物和肿瘤疫苗联合制备成新的药物，实现两种免疫疗法联合对癌症的治疗，达到单药治疗都不能达到的优异治疗效果，显著限制了肿瘤的生...
- 蔡炯
- 文献传递
- 抗β淀粉样肽40人单克隆抗体在昆虫细胞分泌表达被引量：1
- 2007年
- 目的通过杆状病毒昆虫细胞系统重组表达抗β淀粉样肽40人单克隆抗体,为全人抗体治疗阿尔茨海默病创造条件。方法将抗β淀粉样肽40人单链抗体重链可变区和轻链可变区分别克隆插入pAC-L-CH3的多克隆位点,构建成pAC-VH-VL表达质粒。将表达质粒和BaculoGold共转染SF9细胞后,用免疫荧光方法进行人IgG表达的检测。将感染重组杆状病毒的昆虫细胞培养液上清过蛋白A-琼脂糖亲和层析柱,洗脱纯化出的抗体经过SDS-PAGE电泳鉴定纯化蛋白质。结果杆状病毒昆虫细胞系统抗β淀粉样肽40人单克隆抗体表达质粒pAC-VH-VL构建成功。将表达质粒和辅助病毒感染昆虫细胞后可见昆虫细胞表达人抗体。经过蛋白A-琼脂糖亲和层析,从昆虫细胞培养基中纯化出抗β淀粉样肽40人单克隆抗体。结论通过基因工程手段在人抗Aβ40抗体可变区羧基端连接人抗体恒定区片段,通过杆状病毒昆虫系统分泌表达并纯化获得完整的人抗Aβ40单克隆抗体。
- 蔡炯郭瑜梁米芳李方刘飞王世真
- 关键词：阿尔茨海默病Β淀粉样肽昆虫细胞
- Aβ单链抗体基因腺相关病毒载体的构建被引量：1
- 2009年
- 蔡炯刘飞李方王世真
- 关键词：阿尔茨海默病腺相关病毒单链抗体
- 阿尔茨海默病β淀粉样肽40人单链抗体的生物活性被引量：2
- 2007年
- 目的测定重组表达的抗β淀粉样肽(Aβ)40的人单链抗体的生物活性。方法通过基因重组表达方式获得抗Aβ40人单链抗体,应用常规ELISA和竞争性ELISA鉴定抗Aβ40人单链抗体的抗原结合活性,以人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞为模型检测抗Aβ40人单链抗体的神经元保护作用。结果重组表达的抗Aβ40的人单链抗体主要位于细菌不溶性内涵物中,经过尿素溶解和金属亲和层析纯化后具有结合Aβ40或Aβ42的活性。与Aβ42组相比,Aβ42加等摩尔抗体组可显著提高SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.05)。与Aβ40组相比,Aβ40加等摩尔抗体组亦显著提高SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.01)。结论从大肠杆菌系统中重组表达的抗Aβ40人单链抗体可以部分对抗β淀粉样肽的神经毒性。
- 蔡炯李方刘飞王世真
- 关键词：单链抗体神经毒性SH-SY5Y
- 4-18F-氟代丁酸及其甲酯作为PET显像剂可行性的初步研究被引量：1
- 2015年
- 目的：利用PET-MF-2V-IT-I氟多功能合成模块自动化合成4-18F-氟代丁酸及其甲酯，并初步探讨其作为PET显像剂的可行性。方法前体4-溴代丁酸甲酯与18F－发生氟代反应，中间体4-18F-氟代丁酸甲酯用高压液相色谱法分离，收集保留时间在6．8～7．8 min的组分，将此组分与NaOH溶液于115℃下加热水解10 min，加入HCl调至中性，得到4-18F-氟代丁酸；稀释后过C18柱，再用20 ml注射用水清洗C18柱，0．5 ml乙醇洗脱后用生理盐水稀释，得到4-18F-氟代丁酸甲酯。分别目测两种产品的澄清度，精密试纸测定pH值、测定放射化学纯度和稳定性。正常小鼠尾静脉注射4-18F-氟代丁酸30 min后行micro PET显像。结果4-18F-氟代丁酸和4-18F-氟代丁酸甲酯的自动合成时间分别为40 min和20 min，放化收率分别为35%和50%（均未经时间校正）， pH值分别为6．5和7．1，产品放射化学纯度均＞95%。二者均澄清无颗粒，室温放置30 min后均出现脱氟现象。正常小鼠micro PET显像结果显示，脊柱有明显的放射性浓聚，表明4-18F-氟代丁酸在体内脱氟，肠道亦有较高的放射性摄取。结论4-18F-氟代丁酸及其甲酯的合成方法操作简便，合成时间短，且放化收率也较高，但因其不稳定，不适合用作PET显像剂进行进一步研究。但小鼠micro PET显像结果提示，18F-氟代丁酸类似物在肠道疾病诊断中有潜在研究价值。
- 党永红蔡炯王玲吕京桥李方
- 关键词：自动化合成PET显像剂
- 人膜联蛋白V二聚体的制备研究
- 2009年
- 目的制备人膜联蛋白V二聚体,为其药理作用研究创造条件。方法人膜联蛋白V基因转化毕赤酵母获得的转基因酵母用于本实验。在BMGY培养基中培养转基因酵母,在BMMY培养基中诱导人膜联蛋白V的分泌表达。通过硫酸铵沉淀、分子筛分离、超滤浓缩等纯化步骤序列处理BMMY培养基上清,用SDS-PAGE分析人膜联蛋白V形成二聚体的变化。结果BMMY培养基诱导转基因酵母2天后获得人膜联蛋白V,培养基上清经过硫酸铵沉淀、分子筛分离、超滤浓缩等纯化步骤序列处理后制备人膜联蛋白V二聚体。结论本实验室制备出人膜联蛋白V二聚体,其药理作用有待进一步研究。
- 蔡炯曾嘉炜李方王世真
- 关键词：膜联蛋白V二聚体毕赤酵母
- 人膜联蛋白V的重组表达与细胞凋亡显像被引量：3
- 2006年
- 蔡炯李方郑连芳张迎强蒲圻王世真
- 关键词：膜联蛋白V细胞凋亡细胞膜磷脂程序性细胞死亡显像磷脂酰丝氨酸
- 腺相关病毒介导β淀粉样肽单链抗体对动物阿尔茨海默病的治疗效果
- 2011年
- 目的观察携带β淀粉样肽单链抗体基因的腺相关病毒对阿尔茨海默病动物模型的治疗效果。方法给突变淀粉样蛋白前体转基因阿尔茨海默病模型小鼠腿部肌肉注射携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒,在药物注射前和注射后3、7、10个月用Morris水迷宫测定潜伏期,并在药物注射后10个月取大脑做组织切片,行免疫组织化学染色,观察淀粉样斑块在海马的沉积。结果注射基因治疗药物后3个月,阿尔茨海默病模型小鼠的学习和记忆能力明显改善,注射基因治疗药物后10个月,模型小鼠海马淀粉样斑块的沉积减少。结论肌肉注射携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒对阿尔茨海默病模型有治疗作用。
- 蔡炯牛娜李方王世真
- 关键词：阿尔茨海默病腺相关病毒Β淀粉样肽单链抗体
- 2-^(18)F-氟代丙酸的自动化合成及其Micro PET肺癌小鼠显像被引量：2
- 2015年
- 目的:利用国产PET-MF-2V-IT-I型氟多功能合成模块建立2-18F-氟代丙酸(2-18F-FPA)稳定合成方法,并评价其在肿瘤显像中的价值。方法:前体2-溴代丙酸乙酯与18F-发生氟代反应,中间体2-18F-FPA乙酯采用高压液相色谱法(HPLC)分离,收集保留时间在6.3~7.3 min的组分,将组分与Na OH溶液于100℃加热水解10 min,加入HCl调至中性,经过0.22μm除菌滤膜后得终产品。目测澄清度,测定p H值、放射化学纯度和稳定性后行C57BL/Micro PETJ荷瘤小鼠显像。结果:自动合成过程约40 min,放化收率(35±2)%(未经时间校正),产品放化纯度>98%。产品澄清无颗粒,p H值为6.0,在室温放置6 h稳定,小鼠肿瘤显像清晰。结论:利用国产PET-MF-2V-IT-I型氟多功能合成模块合成肿瘤显像剂2-18F-FPA,操作简便,合成时间短,收率及放射化学纯度高,稳定性好,在肿瘤显像中值得进一步的研究。
- 党永红蔡炯王玲李欣吕京桥李方
- 关键词：肿瘤显像剂自动化合成
- 川芎嗪对D-半乳糖损伤模型小鼠学习记忆及胆碱能系统的影响被引量：17
- 2003年
- 目的探讨川芎嗪对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)损伤模型学习记忆和胆碱能系统功能的影响。方法C57BL/6J小鼠颈背部皮下注射2%D-gal100mg·kg-1·d-1,连续40d制造D-gal损伤模型。第3周起各组分别用生理盐水(正常对照组、模型组)、川芎嗪(高、低剂量组)和哈伯因(阳性对照组)灌胃。第6周起进行Morris水迷宫测试,连续5d。行为测试结束后,进行大脑皮层乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)活性测定和M受体的放射性配基结合分析。结果与正常对照组相比,D-gal模型组学习记忆能力、AchE活性和M受体含量均明显下降(P<0.05),川芎嗪尤其是在100mg·kg-1·d-1剂量时可明显改善学习记忆功能,增强胆碱酯酶活性(P<0.05),上调M受体数目(P<0.005)。结论川芎嗪可明显提高模型小鼠的学习记忆能力,改善中枢胆碱能系统功能。
- 张春王世真左萍萍崔旭蔡炯
- 关键词：川芎嗪D-半乳糖阿尔茨海默病痴呆模型胆碱能系统
