缪秋红
- 作品数：28 被引量：54H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小反刍兽疫病毒FY株全基因组序列的测定及其分子特征的研究被引量：2
- 2017年
- 根据小反刍兽疫病毒(PPRV)参考序列设计了11对特异性引物,然后用RT-PCR方法分段扩增出PPRV富阳分离株(PPRV-FY)的全基因组序列,用DNAstar软件和Mega软件对PPRV-FY株及参考毒株的基因序列进行了比对和分析,并根据N基因核苷酸序列绘制了系统进化树。结果,PPRV-FY株全长15 948 bp,编码6种结构蛋白(N、P、L、M、F和H),2种非结构蛋白(C和V),PPRV各毒株转录起始序列和转录终止序列都高度保守。同源性分析结果表明,PPRV-FY株与PPRV-Coted′Ⅰvoire89同源性最低,为89.0%,与PPRV/Tibet/30/2007株和PPRV/Tibet/2007株的同源性最高,为97.3%,其基因间隔区N-P长度一致,相似度最高,而M-F相似度最低。通过比较PPRV-FY株与参考毒株基因组末端调控序列,可以看出整个麻疹病毒属GP区和AGP区保守性较高,且存在不同程度的互补。氨基酸序列分析结果表明,PPRV-FY株在保守区域出现21处氨基酸突变,这些突变对其所编码蛋白的结构和功能有何影响尚需要进一步研究。此外,本文还基于N基因序列,对PPRV-FY株及参考毒株进行了系统进化分析。结果表明,PPRV-FY株与其它亚洲源PPRV野毒株共同形成一个拓扑群,属于第IV谱系。
- 刘柱缪秋红李琦宫晓华李传峰陈宗艳窦永喜张志东杨宗照刘光清张淼涛
- 关键词：小反刍兽疫病毒全基因组
- 双抗夹心ELISA检测兔出血症病毒抗原方法的建立及初步评估被引量：3
- 2016年
- 为建立一种快速、特异性强的用于检测兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)抗原的双抗夹心ELISA方法,本研究通过抗体配对实验,确定以抗兔出血症病毒结构蛋白VP60单克隆抗体9H9为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记的9H9为检测抗体建立双抗夹心ELISA方法。通过优化,确定最佳条件为:0.5μg/m L稀释后的9H9作为捕获抗体,底物显色液37℃包被2 h 4℃过夜,1%明胶溶液37℃封闭2 h,用含10%胎牛血清的PBST按5μg/m L稀释后的辣根过氧化物酶标记的9H9作为检测抗体,37℃作用15 min。建立的ELISA方法与杯状病毒科其他病毒无交叉反应,应用本方法和RT-PCR方法对85份兔肝脏样品进行检测,证明双抗夹心ELISA方法具有良好的特异性和敏感性,有望作为临床快速检测的一种简便方法。
- 郭慧敏谭永贵缪秋红朱杰刘腾陈宗艳李传峰刘光清
- 关键词：兔出血症病毒单克隆抗体
- 新型兔出血症病毒研究进展被引量：5
- 2016年
- 兔出血症病毒属于杯状病毒科,兔病毒属的成员之一,能够引起家兔的典型兔病毒性出血症。2010年,研究学者首次在法国发现一例非典型兔出血症疫情,该病原与经典兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)基因序列差异明显,被称为RHDV2。研究发现该病原能够与经典RHDV发生部分交叉免疫保护,该病原能够感染幼龄家兔而且是唯一一个能够跨物种感染的兔病毒属成员。该病的迅速传播,严重威胁了以兔为中心的生态平衡。目前,该病毒尚未在国内有报道,但是不排除潜在的隐性感染。因此,对该病原的分析研究对于控制该病原的传播具有非常重大的意义。
- 谭永贵缪秋红吴巧梅朱杰郭慧敏刘光清
- 基于SYBR GreenⅡ的荧光定量PCR结合熔解曲线鉴别不同亚型兔出血病毒方法的建立
- 引言兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)为单股正链RNA病毒,属于杯状病毒科(Caliciviridae)、兔病毒属(Lagovirus)。该病毒可引发兔发生急...
- 谭永贵刘腾朱杰郭慧敏吴巧梅李琦缪秋红陈宗艳李传峰刘光清
- 文献传递
- 绵羊MAVS基因的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2019年
- 通过RT-PCR方法从绵羊肺细胞(sheep lung cells,SLT)扩增获得MAVS(mitochondrial antiviral signaling protein)基因,并将其克隆至原核表达载体pET-32a,测序鉴定结果表明成功获得重组质粒pET-32a-MAVS。将其转化至感受肽细胞BL21中,经IPTG诱导获得重组蛋白。将纯化的MAVS蛋白免疫BALB/c雌鼠,制备抗MAVS的鼠源多克隆抗体。SDS-PAGE结果表明该抗体具有良好的反应原性。MAVS多克隆抗体的成功制备为其生物学功能研究奠定了基础。
- 董丹丹刘腾缪秋红朱杰刘光清
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 一株犬瘟热病毒变异株的基因组特征
- 引言犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)隶属于副黏病毒科麻疹病毒属,是单股负链RNA病毒。传染性极强,发病率和致死率都很高。发病率可达100%,死亡率也高达80%,宿主主要包括犬科、猫科、鼬...
- 刘柱李丹丹李琦宫晓华缪秋红李传峰陈宗艳张淼涛刘光清
- 文献传递
- SYBR Green II荧光定量PCR结合熔解曲线鉴别不同亚型兔病毒性出血症病毒方法的建立被引量：2
- 2017年
- 本研究建立了一种荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR)结合熔解曲线区分不同亚型兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)方法。根据GenBank数据库中已公布的不同亚型RHDV(经典RHDV和RHDV2)的衣壳蛋白VP60序列保守区设计了1对特异性引物,利用SYBR Green II荧光染料,在实时荧光定量PCR方法的基础上结合熔解曲线进行分析,经典RHDV和RHDV2熔解温度(Tm)分别为(86.3±0.1)℃和(85.1±0.1)℃,扩增产物的熔解曲线分析均只出现单特异峰。结果表明,本研究建立的方法能够快速地鉴别经典RHDV和RHDV2。
- 谭永贵刘腾朱杰郭慧敏吴巧梅李琦缪秋红陈宗艳李传峰刘光清
- 关键词：兔病毒性出血症病毒荧光定量PCR熔解曲线
- 羊口疮病毒F1L融合Fe蛋白的表达与鉴定被引量：2
- 2020年
- 本研究克隆了羊口疮病毒安徽分离株的F1L基因,融合Fe蛋白编码基因后,插入载体pET-32a中,构建了重组质粒pET-F1L-Fe。将pET-F1L-Fe转化BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达重组蛋白F1L-Fe。SDS-PAGE分析结果显示,羊口疮病毒F1L-Fe基因在BL21(DE3)获得了正确表达。将大量表达的F1L-Fe蛋白进行纯化,然后免疫BALB/c鼠,制备了抗F1L蛋白的多克隆抗体。最后,以制备的多克隆抗体对F1L-Fe融合蛋白进行Western-blot检测和分析,结果表明F1L-Fe蛋白能与制备的多克隆抗体发生特异性反应,具有良好的反应原性。本研究结果为进一步研发羊口疮病毒亚单位疫苗提供了物质基础。
- 邢雪王元红李传峰缪秋红曹昳王桂军刘光清
- 关键词：羊口疮病毒多克隆抗体
- 山羊BST-2基因的表达及其亚细胞定位
- 2018年
- 将山羊的BST-2基因(Capra hircus bone marrow stromal antigen 2 gene)分别克隆至原核表达载体p GEX-4T-1和真核表达载体p3×Flag-CMV-14中,获得了重组表达质粒p GEX-BST-2和p3×Flag-BST-2。将重组质粒p GEX-BST-2转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE及Western blot结果显示,诱导表达的重组蛋白分子量约为42 ku,与预期蛋白一致。利用脂质体介导转染法将重组质粒p3×Flag-BST-2转染Vero细胞,经激光共聚焦显微镜检测,结果显示,BST-2蛋白在细胞中可以良好表达,并主要定位于细胞膜上。
- 张莉刘腾刘腾缪秋红朱杰朱杰陈宗艳陈宗艳王桂军
- 关键词：原核表达真核表达亚细胞定位山羊
- 兔出血症病毒NSP1蛋白及其编码序列与病毒翻译关系初步研究
- 由兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus. RHDV)引起的兔病毒性出血症是一种导致兔大量死亡的烈性传染病,给国内外养兔业造成了巨大的经济损失。RHDV其基因组为一条单股正链的RN...
- 缪秋红
- 关键词：兔出血症病毒亚细胞定位复制子双顺反子
- 文献传递
