王金辉
- 作品数：4 被引量：16H指数：1
- 供职机构：吉林大学中日联谊医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金吉林省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 双特异性抗肿瘤重组腺病毒对前列腺癌细胞的抑制作用
- 2012年
- 目的探讨结合肿瘤特异性启动子hTERTp和特异性抑癌基因Apoptin的腺病毒Ad—hTERTp—Ela—Apoptin（Ad—VT）对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法于96孔板内制备前列腺癌PC一3单层细胞（5×10^3个／孔），分别用100个感染复数（multiplicityofinfection，MOI）、10MOI和1MOI的重组腺病毒Ad—VT、Ad—CMV—Apoptin（Ad—VP3）、Ad—hTERTp—E1a—EGFP（Ad．GT）和Ad—CMV．EGFP（Ad—EGFP）进行感染，以未感染孔为对照，每个剂量设3个复孔。采用96h噻唑盐（MTT）法，检测重组腺病毒埘PC-3细胞的抑制作用。于6孔板制备PC-3单层细胞（1×10^6个／孔），分别用100MOI的Ad—VT、Ad—VP3、Ad-GT和Ad—EGFP感染PC-3细胞，培养48h后，分别应用AO／EB染色法、DAPI染色法、AnnexinV检测法对PC-3细胞进行染色，在显微镜下观察细胞形态，分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式；应用Caspase榆测法对PC-3细胞提取总蛋白，检测Caspase酶活性，分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式。结果MTT法结果显示除Ad．EGFP外，Ad—VT、Ad—VP3和Ad—GT均不同程度地表现出对PC-3细胞的抑制作用，其中Ad—VT、Ad—GT的抑制作用强于Ad—VP3，差异有统计学意义（P〈0．05）；培养48、72、96h，随着MOI的增高，Ad—VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定剂量效应关系趋势，感染剂量为100MOI时，Ad．VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定时间效应关系趋势。通过AO／EB、DAPI、AnnexinV检测法和Caspase酶活性检测结果显示，Ad—VT可通过诱导PC-3细胞的捌亡抑制PC-3细胞的增殖。其中AO／EB染色可观测到经Ad—VT感染的PC-3细胞呈现橘红色；DAPI染色可观测到经Ad—VT感染的PC-3细胞细胞核呈现亮蓝色，且存在核内物质碎裂；AnnexinV检测法可观测到经Ad—VT感染的PC．3细胞出现磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加等凋亡特征；Caspase检测结果显示Ad—VT可明显上调Caspase2、3、6、8�
- 王金辉张慕淳李霄齐延新刘广臣孙丹丹金宁一
- 关键词：前列腺癌凋亡素重组腺病毒凋亡
- 经皮肾镜取石术后发热的影响因素分析及防治策略被引量：14
- 2011年
- 目的探讨经皮肾镜取石（PCNL）术后发热的影响因素及防治策略。方法回顾性分析2008—2011年收治320例肾结石行PCNL术的患者资料。男233例，女87例。年龄22，72岁，平均42岁。结石直径0．8～6．0cm，平均3．0cm。分析术后发热患者的年龄结构（〉60岁与≤60岁）、结石大小（〉2．0与≤2．0em）、手术时间（〉60与≤60min）、术中冲洗液灌注泵压力（〉120与≤120mmHg，1mmHg=0．133kPa）、有无梗阻情况、术前是否有尿路感染等因素，比较各因素与2组间发热率的关系。结果320例患者术后出现发热（体温〉38℃）59例（18．4％），其中发生脓毒败血症2例。结石直径〉2．0cm组患者术后发热率为22．4％，≤2．0cm组为10．4％；手术时间〉60min组患者术后发热率为27．2％，≤60min组为10．4％；术中灌注泵压力〉120mmHg组发热率28．3％，≤120／FIEHg组为11．0％；组间发热率比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论结石直径〉2．0cm、手术时间〉60min、冲洗液灌注泵压力〉120ITIITIHg是导致PCNL术后发热的影响因素；术前预防应用广谱抗生素、缩短手术时间、低压灌注冲洗是预防术后发热的有效措施。
- 张慕淳张刚张赟张茁晋学飞王金辉马天武朱继红
- 关键词：经皮肾镜取石术肾结石发热
- 微血管计数和侵入在肾细胞癌中的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的探讨肾细胞癌(RCC)中微血管计数和微血管侵入情况与肾癌病理分期及术后发生转移的关系。方法采用Ⅷ因子和CD34两种标记染色方法检测88例RCC组织标本中微血管计数和微血管侵入情况,回顾性分析其与患者术后病理分期及是否发生转移的关系。患者随访4年以上,分为无复发转移组和复发转移组。结果用Ⅷ因子相关抗原标记下对RCC组织标本的微血管进行计数,术后4年无复发转移组和复发转移组中平均微血管数量分别为52.3和96.6,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。无复发转移组有微血管侵入者仅占总数42.3%,复发转移组中有微血管侵入者占76.5%(P<0.01);CD34标记下两者比例分别是47.1%和18.3%(P<0.05)。结论微血管计数和微血管侵入对预测RCC患者术后发生复发转移有参考意义,对于较易发生转移或复发的患者,术后应加强随访并考虑及早进行靶向治疗或其他辅助治疗。
- 张慕淳张赟王金辉王永刚高吉马天武温建平孔祥波
- 关键词：微血管计数肾细胞癌
- 双特异性重组腺病毒Ad-HT对肝癌细胞的体内、外抑制效应被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨双特异性抗肿瘤重组腺病毒Ad-HT对肝癌细胞的体内、外抑制作用和作用方式。方法:运用噻唑兰法检测重组腺病毒Ad-HT对BEL-7402细胞的抑制作用;应用AO/EB染色法、DAPI染色法、Annexin V检测、Caspase检测、线粒体膜电位检测和活性氧检测等多种方法分析Ad-HT对BEL-7402细胞抑制作用的方式和途径;构建C57BL/6小鼠荷H22肿瘤模型,瘤内注射重组腺病毒,通过非放射性乳酸脱氢酶细胞毒性检测方法,检测NK活性、CTL活性,利用酶联免疫吸附方法检测IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ等细胞因子水平,探讨Ad-HT对体内实体肿瘤的抑制作用和对免疫系统的影响。结果:Ad-HT能够抑制BEL-7402细胞生长,且其作用具有一定时效和剂效关系趋势;Ad-HT感染导致BEL-7402细胞磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加、Caspase酶活性增强、线粒体膜电位下降和活性氧水平升高;Ad-HT实验组模型动物平均期在30天以上,显著高于对照组;另外,Ad-HT具有增强NK和CTL活性,上调IL-2和IFN-γ等细胞因子水平的功能。结论:Ad-HT能够通过诱导细胞凋亡,抑制BEL-7402肿瘤细胞增殖,而这种抑制作用可能通过线粒体途径实现。另外,Ad-HT能够有效延长模型动物平均生存期,活化免疫功能细胞,并使免疫趋向Th1优势。
- 刘广臣孙大辉齐延新王金辉王卓越吴娜朴秉国金宁一李霄
- 关键词：NDVHN重组腺病毒BEL-7402
