李霄
- 作品数：190 被引量：195H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- 利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建天坛株痘苗病毒TK基因缺失痘苗病毒载体
- 研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP，构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK，利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP，与TTVV共转(感)染BHK细胞，通过同源...
- 阚式绂金宁一李霄王宇航刘立明王卓越齐延新王金辉刘广臣
- 关键词：基因缺失病毒载体
- 联合应用凋亡素基因、新城疫病毒HN基因及IL-18基因对黑色素瘤的抑制效应研究被引量：10
- 2004年
- 以前的研究结果表明，来自于鸡贫血病毒的凋亡素基因、来自于鸡新城疫病毒的HN基因和IL-18基因具有不同的抗肿瘤效应，但上述基因抗肿瘤的机制不同，本研究在双启动子真核表达质粒pIRES中的CMV启动子下游插入凋亡素基因，IRES启动子下游插入IL-18HN嵌合基因，构建能同时表达三种基因的真核表达质粒pIRVP3IL-18HN。复制C57BL／6小鼠荷黑色素瘤模型，并将质脂体包裹的重组质粒进行瘤内注射，共注射3次，每次100μg质粒，拟观察凋亡素、新城疫病毒HN基因和IL-18基因以核酸疫苗的形式联合应用对小鼠黑色素瘤的抑制效应。结果显示pVIL-18HN、pVlL-18和pVVP3IL-18均有抑制肿瘤作用，但pIRVP3IL-18HN组抑瘤率高于pVIL-18HN组、pVIL-18VP3组、pVIL-18组和Hanks液对照组。研究结果提示，上述3种基因联合应用具有协同抑瘤效应。
- 李霄金宁一米志强连海孙迎春李杰管国芳
- 关键词：凋亡素黑色素瘤基因鸡贫血病毒
- 双特异性抗肿瘤重组腺病毒对前列腺癌细胞的抑制作用
- 2012年
- 目的探讨结合肿瘤特异性启动子hTERTp和特异性抑癌基因Apoptin的腺病毒Ad—hTERTp—Ela—Apoptin（Ad—VT）对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法于96孔板内制备前列腺癌PC一3单层细胞（5×10^3个／孔），分别用100个感染复数（multiplicityofinfection，MOI）、10MOI和1MOI的重组腺病毒Ad—VT、Ad—CMV—Apoptin（Ad—VP3）、Ad—hTERTp—E1a—EGFP（Ad．GT）和Ad—CMV．EGFP（Ad—EGFP）进行感染，以未感染孔为对照，每个剂量设3个复孔。采用96h噻唑盐（MTT）法，检测重组腺病毒埘PC-3细胞的抑制作用。于6孔板制备PC-3单层细胞（1×10^6个／孔），分别用100MOI的Ad—VT、Ad—VP3、Ad-GT和Ad—EGFP感染PC-3细胞，培养48h后，分别应用AO／EB染色法、DAPI染色法、AnnexinV检测法对PC-3细胞进行染色，在显微镜下观察细胞形态，分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式；应用Caspase榆测法对PC-3细胞提取总蛋白，检测Caspase酶活性，分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式。结果MTT法结果显示除Ad．EGFP外，Ad—VT、Ad—VP3和Ad—GT均不同程度地表现出对PC-3细胞的抑制作用，其中Ad—VT、Ad—GT的抑制作用强于Ad—VP3，差异有统计学意义（P〈0．05）；培养48、72、96h，随着MOI的增高，Ad—VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定剂量效应关系趋势，感染剂量为100MOI时，Ad．VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定时间效应关系趋势。通过AO／EB、DAPI、AnnexinV检测法和Caspase酶活性检测结果显示，Ad—VT可通过诱导PC-3细胞的捌亡抑制PC-3细胞的增殖。其中AO／EB染色可观测到经Ad—VT感染的PC-3细胞呈现橘红色；DAPI染色可观测到经Ad—VT感染的PC-3细胞细胞核呈现亮蓝色，且存在核内物质碎裂；AnnexinV检测法可观测到经Ad—VT感染的PC．3细胞出现磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加等凋亡特征；Caspase检测结果显示Ad—VT可明显上调Caspase2、3、6、8�
- 王金辉张慕淳李霄齐延新刘广臣孙丹丹金宁一
- 关键词：前列腺癌凋亡素重组腺病毒凋亡
- 一种鸡痘病毒载体穿梭质粒及其应用
- 本发明提供了一种鸡痘病毒载体穿梭质粒pTGP3，其包括：重组臂TKL和TKR、双向启动子PE/L、荧光蛋白表达盒、抗性标记基因和复制起点ori，在所述双向启动子PE/L上下游分别具有多克隆位点MCSL和MCSR、在所述荧...
- 金宁一李霄李昌鲁会军田明尧金扩世陈漉刘妍高鹏杨恩成
- 一种HIV复合多表位DNA疫苗及其应用
- 本发明公开了一种HIV复合多表位DNA疫苗，其是以HIV－1衣壳蛋白p24为载体骨架分子，以ER信号肽作为引导序列，包含有HIV基因组中26个高度保守的免疫优势表位，其中包括3个中和抗体表位和23个CTL表位；1个HIV...
- 金宁一李昌李霄鲁会军田明尧金扩世申镇维金洪涛李臻付延军
- 文献传递
- 抗肿瘤重组活载体疫苗
- 一种抗肿瘤重组活载体疫苗，属于生物技术领域，特别是涉及一种鸡痘病毒活载体疫苗的重组。本发明提供三株分别表达鸡贫血病毒(CAV)凋亡素基因(VP3)，鸡新城疫病毒(NDV)血凝素－神经氨酸酶基因(HN)和人白细胞介素18基...
- 金宁一李霄米志强金扩世孙迎春李昌夏志平金洪涛管国芳李杰
- 文献传递
- Ⅱ型猪圆环病毒长春株衣壳蛋白基因的克隆及原核表达
- Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原,不同分离株间衣壳蛋白同源性高并具有良好的免疫原性.本研究应用PCR方法扩增敲除了N端核定位信号(Nuclear localization s...
- 李洋金宁一韩松李霄金苗苗杨尧
- 关键词：猪圆环病毒衣壳蛋白ORF2基因原核表达
- 成纤维细胞生长因子21介导TLR/MyD88通路减缓布鲁菌诱导巨噬细胞分泌细胞因子
- 2017年
- 为探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)对布鲁菌感染的抗炎作用,本试验检测患布鲁菌病羊外周血中FGF21的含量;体外试验使用FGF21与布鲁菌共培养后检测细菌存活率;分析FGF21对Raw264.7细胞毒性,并以FGF21预处理Raw264.7细胞后,使用布鲁菌侵染细胞,观察细胞因子的释放以及TLR/MyD88信号通路的变化。结果显示,患布鲁菌病羊外周血中FGF21的含量显著升高,FGF21并不影响布鲁菌的存活率且对Raw264.7细胞没有毒性;FGF21预处理后可以抑制布鲁菌侵染诱导的IL-6、TNF-α、MCP1和LDH的释放,并且FGF21可提高IL-10的含量;同时FGF21可降低布鲁菌侵染引起的TLR/MyD88表达的升高。结果表明,患布鲁菌病羊外周血中FGF21的含量显著升高,FGF21通过TLR/MyD88通路缓解布鲁菌侵染诱导的炎性细胞因子的释放。
- 刘立明庄昕雨赵海洋李霄赵翠青金宁一
- 关键词：布鲁菌成纤维细胞生长因子21RAW264.7细胞细胞因子
- 多联重组痘苗病毒的构建及鉴定
- 2016年
- 构建含有埃博拉出血热病毒(Ebola hemorrhagic fever virus,EHFV)小片段分泌蛋白S基因、马尔堡出血热病毒(Marburg hemorrhagic fever virus,MHFV)GP基因、辛诺柏病毒(Sin Nombre virus,SNV)G2糖蛋白基因及非洲欧尼恩病毒(Africa O’nyong nyong virus,O’NNV)E2蛋白基因的重组痘苗病毒。设计含EGFP筛选标记和4种外源基因的穿梭质粒,并利用同源重组技术、荧光筛选技术和Cre/LoxP敲除系统,最终获得四联重组痘苗病毒。使用PCR方法鉴定重组痘苗病毒及其遗传稳定性;用透射电镜观察病毒形态。结果显示:所构建的多联重组痘苗病毒rVTT-J^-4^+具有良好的遗传稳定性,并且具备痘苗病毒的完整形态。结果表明:成功构建了含有4种外源基因的重组痘苗病毒rVTT-J^-4^+,为后续多联疫苗的研究奠定了基础。
- 李一权兰添胡宁宁姜爽李敏曹亮曹佳媛范园园李霄金宁一
- 关键词：痘苗病毒同源重组EGFP
- 新城疫病毒HN基因对子宫颈癌细胞内线粒体功能的影响
- 2008年
- 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，目前的发病机制尚不完全清楚。现有的研究表明，宫颈癌的发生、发展是由多基因参与的多步骤的复杂过程。新城疫病毒（NDV）HN基因的长度为1734 bp，编码577个氨基酸，蛋白相对分子质量为63000。20世纪60年代，Cassel和Garrett发现，NDV的爆发流行使晚期胃癌患者的转移受到抑制，NDV的抗肿瘤作用因此受到人们的重视并已进入临床研究阶段。
- 朱继红岳瑛金宁一李霄孙丽丽张珏陈漉刘立明张振民
- 关键词：新城疫病毒HN基因子宫颈癌线粒体功能细胞内妇科恶性肿瘤相对分子质量
