汪和睦
- 作品数：11 被引量：103H指数：4
- 供职机构：南开大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 细胞电穿孔与电融合的机理及应用被引量：44
- 1994年
- 近十余年来，由于细胞生物学家、分子生物学家、免疫学家与物理学家之间在学术上的相互渗透、共同实验，已经开辟出一个生物物理技术的新领域．它既涉及细胞电磁场效应及其机理的基础研究；同时作为一种新的生物技术，又涉及对分子生物学、细胞生物学、免疫医学以及医药、食品、农业等方面的广泛应用．文章综述了本领域的最近进展．
- 汪和睦汪洲
- 关键词：细胞电融合生物技术
- 基因导入技术及其应用被引量：2
- 1991年
- 电融合和电导入技术是八十年代发展起来的一种新的生物技术。其转换率是用化学方法所得不到的。LN-101基因脉冲导入仪能提供2500伏脉冲电压和160安培电流。无论在高阻的和低阻的介质中(如盐和蔗糖缓冲剂)均能使用该仪器。
- 徐宝强刘建民袁其平吕联荣汪和睦
- 关键词：基因导入电穿孔生物技术
- 利用电穿孔技术实现质粒向酵母原生质体的转化被引量：1
- 1991年
- 本实验的主要目的旨在摸索电场对基因转化的最佳条件.已得到初步结果为:用酿酒酵母S.cerevisiae DBY 746作为穿梭质粒(YRp类)的受体菌.经过对最适电场条件与基因转化率之间关系的研究,我们发现在1个400μS的宽时程脉冲、电场强度为4KV/cm时有最高转化率,达273个转化子/μgDNA.本实验所用的电穿孔装置是自组装的,它简便、快速、实用.
- 张蕾汪和睦
- 关键词：电穿孔技术质粒酵母原生质体
- 全文增补中
- 在酵母中表达原核碱性磷酸酶
- 本发明涉及一种在酵母中表达原核碱性磷酸酶的方法，用以表达来自海科贝特菌(Cobetia marina)的碱性磷酸酶CmAP。该方法可以用于生产具有高比活力、高稳定性、高糖基化的重组碱性磷酸酶，提高其纯品的单位发酵液产量，...
- 高山贝锦龙徐国峰杨珺汪和睦米东周浩魏东盛梁剑光李鑫
- 文献传递
- 烟草叶肉原生质体的漂浮电介质电泳研究被引量：2
- 1992年
- 本文根据电介质电泳理论,首次对单个烟草叶肉细胞原生质体进行了电介质电泳漂浮实验。对单个原生质体在频率10Hz—15MHz的范围内测定了不同电导率(12.5μs/cm—520μs/cm)下的电介质电泳频谱,并根据实验数据计算了单个原生质体的膜电容C_m,数值为0.40±0.03μF/cm^2。本文还根据实验数据对细胞电融合过程中的原生质体偶极相互作用进行了分析,得出当施加外电场E_c=1.5kV/cm的情况下,两细胞之间的偶极相互作用压力π_d在频率高于20kHz时将显著地大于膜电压产生的压力π_m,成为膜穿孔的主要原因,这将为改进细胞电融合方案提供了新的依据。
- 汪和睦杭军
- 关键词：原生质体烟草
- 在酵母中表达原核碱性磷酸酶
- 本发明涉及一种在酵母中表达原核碱性磷酸酶的方法，用以表达来自海科贝特菌(Cobetia marina)的碱性磷酸酶CmAP。该方法可以用于生产具有高比活力、高稳定性、高糖基化的重组碱性磷酸酶，提高其纯品的单位发酵液产量，...
- 高山贝锦龙徐国峰杨珺汪和睦米东周浩魏东盛梁剑光李鑫
- 高效电融合技术建立能分泌抗分枝杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞系被引量：1
- 1996年
- 用细胞电穿孔融合仪，摸索最佳电融合参数，对５种分枝杆菌超声粉碎菌体混合抗原免疫的１只ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞和ＮＳｌ骨髓瘤细胞进行了电融合。在最佳电融合参数下，获得１．７５个杂交瘤细胞克隆／１０５个脾细胞的最佳融合率。采用间接ＥＬＩＳＡ法筛选，经克隆化，获２２株分泌抗分枝杆菌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的阳性杂交瘤细胞株。并对其中１１株进行了初步研究。
- 郭明霞苏焯潘最汪和睦
- 关键词：单克隆抗体分枝杆菌电融合杂交瘤
- 重组水蛭素体内抗凝活性的实验研究被引量：30
- 2002年
- 目的 研究重组水蛭素的抗凝活性 ,为水蛭素新药开发提供实验依据。方法 家兔 iv重组水蛭素前及后心脏采血 ,应用血凝仪测定凝血酶时间 (TT)、凝血酶原时间 (PT)和活化的部分凝血活酶时间 (APTT) ,并考察其抗凝活性的量效和时效关系。结果 重组水蛭素能明显延长 TT和 APTT,且呈剂量依赖性 ,但在所试剂量范围内对 PT无明显影响 ;其延长 TT和 APTT的作用随时间而下降 ,作用持续时间约 6 0 m in。结论 重组水蛭素具有明显抗凝作用 ,明显强于现有抗凝药肝素 ,且其作用强度与同剂量德国产基因重组水蛭素
- 吕莉李欣燕韩国柱汪和睦
- 关键词：重组水蛭素凝血酶时间凝血酶原时间
- 鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的电融合被引量：4
- 1989年
- 本文介绍一种可产生单克隆抗体的杂交瘤细胞的电场诱导细胞融合技术。首先,施加非均匀交流电场(强度为250V/cm,频率为1MHz)或凝集素(植物血球凝集素、伴刀豆蛋白、链霉蛋白酶)使待融合细胞近接触;然后,施加三个电脉冲(强度为5kV/cm,脉宽为20μs)诱导细胞融合。经20天HAT选择培养,获得了52个大于10~4个以上杂交瘤细胞的大集落细胞团。
- 谢廷栋汪和睦鲁玉瓦阎惠芬饶颐年方美玉曾雪荣
- 关键词：B细胞骨髓瘤细胞电融合
- 细胞电穿孔导入DNA的动态特征被引量：22
- 1994年
- 本文以Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１为模型细胞，研究了不同幅度和时间常数的ＲＣ放电脉冲条件下，触发细胞穿孔，导入长度分别为４２２和１６８０ｎｍ的超螺旋长丝形质粒ｐＵＣ－１８和ｐＣＰ１０，及精胺缩合后直径为８８ｎｍ的复曲面体的质粒ｐＣＰ１０，测定了相应的细胞转化率。实验结果显示了细胞电穿孔导入ＤＮＡ的动态特征。
- 汪和睦李金慧
- 关键词：DNA大肠杆菌
