彭志强
- 作品数：10 被引量：58H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学热带军队卫生学系更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科研条件建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 霍乱肠毒素B亚单位在转基因番茄中表达的研究被引量：12
- 2001年
- 将霍乱肠毒素 B亚单位 (CT-B)基因及内质网引导序列 (SEKDEL)克隆到质粒 p RTL2和 p BI1 2 1中 ,分别构建植物双元表达载体 p BI-CTB和 p BI-CTBK,CT-B基因由 Ca3 5 S启动子控制表达 .采用叶盘法经根癌农杆菌介导转化番茄 (金丰 1号 ,Jinfeng1 ) ,各表达载体得到一批转基因植株 .经 PCR和 Southern blot分析表明 CT-B基因整合到了番茄基因组中 ;ELISA和 Western blot分析表明 p BI-CTB和 p BI-CTBK的转基因植株能够有效表达 CT-B多肽 ,分别占番茄叶片可溶性蛋白的 0 .0 5 5 %和 0 .0 84% .
- 彭志强贺竹梅俞守义余迪求李宝健
- 关键词：转基因番茄基因表达
- 2000年东莞市麻疹病毒流行株基因型分析被引量：10
- 2001年
- 目的 了解东莞市麻疹病毒 (measlesvirus,MV)流行株的基因型。方法 2 0 0 0年 4～ 7月间东莞市发生有 5 5例患者的麻疹流行 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法直接检测麻疹病人急性期唾液中的麻疹病毒核糖核酸 (RNA)的N基因和M基因 ,对任意选取的 5份RT PCR阳性标本和疫苗株沪 191的N基因扩增片段进行核酸序列测定 ,并进行序列系统树分析。结果 用RT PCR方法直接检测的阳性率为 87.3% ;用血清抗 MV IgMELISA方法检测的阳性率为70 .9% ,抗 MV IgM阴性的病人唾液中有 6 8.8%的标本MV RNA阳性。序列分析结果表明此流行株的基因型与世界麻疹病毒流行株不同 ,差异为 1.4%～ 11.7% ,可归属于H基因型。结论 2 0 0 0年东莞市麻疹病毒流行株核酸序列完全相同 ,为H基因型 ,说明本次流行的麻疹病毒具有同源性 ,来源于同一传染源。
- 朱建琼彭志强雷满根王红郑少敏李润深陈清叶临湘
- 关键词：麻疹病毒核糖核酸基因型
- 转基因植物表达重组蛋白的研究进展被引量：4
- 2000年
- 植物表达系统的一些潜在优点 ,如重组蛋白的高积累水平 ,糖基化 ,细胞内的定位和自然储藏的稳定性是目前植物生产重组蛋白系统研究成为热点的主要原因 .在研究和选择转基因植物表达系统的过程中 ,转化 ,转化后 ,翻译 ,翻译后等环节都会影响到最终产物的数量和质量 ,因此应该了解基因表达的规律 ,以制定植物生产重组蛋白合适的策略 ,重组蛋白积累水平是关键 ,但其它因素如植物的选择 ,转基因植物的处理 ,下游加工等同样重要 .某些情形下 ,仅下游加工的成本一项就影响到特定植物表达系统的实际应用价值 .
- 彭志强贺竹梅
- 关键词：转基因植物重组蛋白基因表达
- 编码霍乱肠毒素B亚单位基因植物表达载体的构建被引量：5
- 2002年
- 目的构建含霍乱肠毒素B亚单位(CTB)基因的植物双元表达载体。方法采用高保真PCR方法调出CTB基因,定向克隆到中间载体pRTL2,经测序证实核酸序列正确后,再亚克隆到含植物双元表达载体pBI121上;采用电击法,将含CTB的植物表达载体转入根癌农杆菌中,并进行酶切证实。结果PCR扩增的CTB片断亚克隆到中间载体,得到pRCTB和pRCTBK,测序证实CTB核酸序列正确;再与根癌农杆菌双元载体pBI121连接,获得含CTB基因的植物双元表达载体pBI-CTB和pBI-CTBK,转入根癌农杆菌的载体,酶切证实正确。结论采用正确技术路线,构建了含CTB基因的植物表达载体,为下一步的转基因植物表达研究打下了坚实的基础。
- 彭志强俞守义余迪求贺竹梅
- 关键词：霍乱肠毒素亚克隆多聚酶链式反应植物表达载体
- 含霍乱肠毒素B亚单位基因植物表达载体的构建策略
- 2001年
- 采用高保真PCR方法调出CTB基因 ,经测序证实核酸序列正确后 ,再亚克隆到含植物表达调控原件的载体上 ,采用冻融法和电击法 ,将含CTB的植物表达载体转入根癌农杆菌中。通过一系列分子克隆的方法获得含CTB基因的植物双元表达载体pBI CTB和pBI CTBK ,并经酶切证实 。
- 彭志强俞守义余迪求贺竹梅
- 关键词：霍乱肠毒素亚克隆多聚酶链式反应植物表达载体
- 番茄子叶外植体转化系统的优化被引量：14
- 2004年
- 目的 :对番茄子叶外植体的转化进行优化 ,为进行转基因番茄的研究奠定基础。方法 :通过正交设计实验 ,以子叶外植体的存活天数为观察指标 ,分别对农杆菌稀释浓度、浸染时间和转化方式等条件进行优化。结果 :在子叶预培养 2d、活化农杆菌稀释倍数约 30倍、侵染时间为 1 0min、共培养时间为 2d的情况下 ,子叶存活时间最长 ,抗性芽产生频率达 2 5 %。结论 :获得了高效的番茄子叶外植体转化系统 。
- 江晓玲俞守义贺竹梅彭志强祁瑜
- 关键词：番茄子叶外植体农杆菌
- 转基因植物口服疫苗的安全性问题所引发的思考被引量：2
- 2004年
- 江晓玲贺竹梅俞守义彭志强
- 关键词：安全性蔬菜果实
- 霍乱肠毒素B亚单位在转基因番茄果实中特异性表达及其免疫原性的研究被引量：10
- 2004年
- 利用番茄果实特异性启动子-E8启动子,将霍乱肠毒素B亚单位基因(ctb)用根癌农杆菌浸润法转入番茄植株,并使其在果实中特异表达,然后对试验小鼠进行口服免疫,研究转基因番茄果实的免疫原性。结果表明,ctb基因在14株番茄植物基因组中被证实有整合,并在其中2株的番茄果实中有特异性表达,最高表达量分别为455和385 ng·g-1FW,口服免疫后的小鼠血液和肠道粘膜中均检测到抗CTB抗体。表明获得了在番茄果实中特异、高效表达霍乱肠毒素B亚单位基因(ctb)的植物口服疫苗候选植株。
- 江晓玲贺竹梅陈清彭志强祁瑜俞守义
- 关键词：霍乱肠毒素B亚单位转基因番茄果实特异性表达免疫原性
- 采用RT——巢式PCR检测麻疹病人唾液中麻疹病毒
- 2001年
- 朱建琼彭志强雷满根王红郑少敏李润深
- 关键词：唾液麻疹麻疹病毒
- 含霍乱肠毒素B亚单位基因植物表达载体的构建被引量：4
- 2001年
- 构建含CTB基因的植物双元表达载体。采用高保真PCR方法调出CTB基因 ,经测序证实核酸序列正确后 ,再亚克隆到含植物表达调控原件的载体上 ,采用冻融法和电击法 ,将含CTB的植物表达载体转入根癌农杆菌中。通过一系列分子克隆的方法获得含CTB基因的植物双元表达载体pBI -CTB和pBI-CTBK 。
- 彭志强俞守义余迪求贺竹梅
- 关键词：霍乱肠毒素亚克隆PCR反应植物表达载体
