俞守义
- 作品数：404 被引量：2,138H指数：19
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院流行病学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 福氏志贺氏菌毒力基因ipaC在大肠杆菌中表达的初步研究被引量：1
- 2003年
- 目的 构建福氏志贺氏菌毒力基因ipaC与质粒pET32a的重组质粒 ,转入大肠杆菌中表达 ,并检测表达产物的活性。方法 PCR扩增福氏志贺氏菌毒力质粒中ipaC基因 ,克隆到质粒 pET32aT7启动子下游 ,转化感受态大肠杆菌BL2 1(λDE3) ,IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE以及Western -Blot分析。结果 获得pET32a -ipaC重组表达质粒 ,SDS -PAGE以及Western -Blot显示重组质粒表达产物的分子量约为 6 3kDa,并具有一定的免疫活性。结论 福氏志贺氏菌毒力基因ipaC可在大肠杆菌中表达 ,且表达产物具有一定的免疫活性。
- 孙素霞王红王勇向前吴爱军俞守义
- 关键词：福氏志贺氏菌毒力基因IPAC大肠杆菌细菌性痢疾
- 88株嗜麦芽窄食单孢菌氨基糖苷类耐药性及其修饰酶基因分析被引量：1
- 2008年
- 目的明确2005年8月至2007年7月临床分离的88株嗜麦芽窄食单孢菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性及其修饰酶基因的存在状况。方法用Kirby-Bauer(K-B)药敏试验分析88株嗜麦芽窄食单孢菌对3种常用氨基糖苷类抗生素阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素的敏感性,再用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增常见的8种氨基糖苷修饰酶基因。结果这88株嗜麦芽窄食单孢菌同时对3种氨基糖苷类抗生素都耐药的有19株,占21.6%(19/88);同时对这3种抗生素都敏感的有12株,占13.6%(12/88);对阿米卡星,庆大霉素和妥布霉素的耐药率分别为22%,69.3%和58%,敏感率分别为70%,22.7%和23.9%。氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅰ和ant(4′)-Ⅱ未检测到;其余6种基因中,aac(3)-Ⅱ,ant(2″)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰ,aac(3)-Ⅲ,aac(3)-Ⅳ和aac(6′)-Ⅱ)的检出率分别是2.3%,5.7%,8%,11.4%,11.4%和12.5%。结论临床分离的嗜麦芽窄食单孢菌对氨基糖苷类修饰酶携带率不是很高,但氨基糖苷类抗生素耐药情况却很严重。
- 胡族琼陈清柯雪梅周杰俞守义
- 关键词：嗜麦芽窄食单孢菌聚合酶链反应
- 白藜芦醇对β淀粉样蛋白诱导星形胶质细胞氧化损伤的保护作用被引量：9
- 2010年
- 目的研究白藜芦醇对β淀粉样蛋白诱导星形胶质细胞氧化损伤的保护作用,从而探索其对中枢神经保护作用的可能机制。方法采用不同浓度的白藜芦醇预处理星形胶质细胞12h,继之用25μmol/L浓度的β淀粉样蛋白进行损伤,然后检测细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)以及采用DHE探针测定荧光强度间接反映胞内活性氧(ROS)含量,以评价白藜芦醇对细胞氧化损伤的保护作用。结果受β淀粉样损伤的细胞存活率明显下降(P<0.05),而用10、100μmol/L白藜芦醇预处理则能提高该细胞的存活率(P<0.05),但1μmol/L白藜芦醇预处理的细胞存活率并无明显变化;荧光检测显示,蛋白损伤使得荧光强度增高(P<0.05),1μmol/L白藜芦醇处理组荧光强度大于阳性对照组,其余各组荧光强度均小于阳性对照组(P<0.05);蛋白损伤可导致细胞LDH漏出量增加(P<0.05),1μmol/L白藜芦醇使得LDH漏出增加(P<0.05),而10、100μmol/L白藜芦醇处理组,细胞LDH漏出量明显减少(P<0.05)。结论星形胶质细胞受到β淀粉样蛋白损伤后,白藜芦醇能减少LDH的漏出及有效降低胞内ROS水平,从而显示对星形胶质细胞具有保护作用。
- 郭江陈清周浩高璐璐孔丹莉俞守义
- 关键词：Β淀粉样蛋白阿尔茨海默病白藜芦醇星形胶质细胞
- 缺失耶尔森菌HPI irp6基因EAggEC的构建被引量：2
- 2003年
- 目的 构建小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6重组自杀质粒 ,并应用其构建EAggEC上该基因的缺失株。方法 根据已知小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6基因序列 ,设计PCR引物 ,扩增并克隆了irp6结构基因 ,在体外进行精确突变后 ,插入氯霉素抗性基因。再将含氯霉素的irp6缺失基因亚克隆入自杀质粒 pKNG1 0 1中 ,构建成irp6基因重组自杀质粒 pKH6 ,并以肠粘附聚集性大肠杆菌EAggEC 1 7 2为出发菌株 ,通过体内同源重组 ,置换其irp6基因。结果 经接合转移和同源重组 ,利用蔗糖抗性筛选 ,pKH6上的同源序列有效的置换了EAggEC 1 7 2的irp6基因。结论 以小肠结肠炎耶尔森菌为靶构建的irp6基因重组自杀质粒成功的缺失了EAggEC 1 7 2的irp6基因 ,获得了携带耶尔森菌强毒力岛的EAggEC 1 7 2irp6基因缺失株EAG6 。
- 胡静俞守义阚飙刘志华
- 关键词：耶尔森菌
- 胶体金免疫层析法检测金黄色葡萄球菌的初步研究被引量：36
- 2006年
- 目的建立一种快速检测金黄色葡萄球菌的方法。方法以金黄色葡萄球菌菌体抗原免疫家兔获得多克隆抗血清,利用胶体金免疫层析技术,采用二步法检测金黄色葡萄球菌,并对该方法的特异性、敏感性进行评价。结果建立的胶体金免疫层析试纸法能在60min内完成检测,灵敏度实验结果显示检测灵敏性为1×106cfu/ml;特异性实验检测显示与副溶血弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌小川型、O139型及569B型等菌无交叉反应,但与耶尔森氏菌、大肠杆菌标准株(ATCC25922)、铜绿假单胞菌标准株(ATCC27853)有一定交叉。结论建立的检测金黄色葡萄球菌的胶体金免疫层析法,能快速、灵敏地检测金黄色葡萄球菌。
- 杜玉萍陈清王雅贤俞守义
- 关键词：金黄色葡萄球菌胶体金免疫层析法
- 产毒性大肠杆菌毒力表达环境调控的机理研究被引量：5
- 2001年
- 目的 探讨产毒性大肠杆菌 (ETEC)毒力受环境因素调控的机理。方法 采用ELISA及DNA RNA杂交法观察在不同培养条件下 ,ETEC毒力因子及毒力基因mRNA的表达 ;并且比较加入或不加入DNA解旋酶抑制剂novobiocin和coumermycinA1对ETEC毒力因子及其基因mRNA表达的影响。结果 ETEC肠毒素 (LT和ST)及定居因子 (CFA)表达均与mRNA呈剂量反应关系 ;novobiocin和coumermycinA1对ETEC生长的影响也受细菌培养环境的影响 ;在正常培养条件下 ,novobiocin或coumermycinA1对ETEC的生长有轻微抑制作用 ,毒力的表达也相对较低 ,但在培养环境改变时 ,如 :在novobiocin 2 0 μg/ml或coumermycinA12 μg/ml的作用下 ,LT、ST和CFA的表达均明显增加 ,mRNA的表达也明显增高。
- 陈清王雅贤申洪俞守义
- 关键词：大肠杆菌毒力环境调控肠毒素
- 以SARS流行特征为鉴增强防范类似重大疫病的意识被引量：1
- 2005年
- 杨占清俞守义彭佐林张景兰刘运喜徐建江于晓敏彭清平
- 关键词：SARS疫病防治流行病学
- 人禽流感H_5N_1毒株PB1基因突变分析被引量：3
- 2007年
- 目的通过对人禽流感H5N1毒株PB1基因序列的变异分析，揭示毒株PB1基因的特征与进化。方法检测广东地区人禽流感H5N1毒株PB1基因核苷酸序列，同时检索全球人禽流感H5N1毒株PB1基因序列，采用DNAStarLa-sergene软件对检索的人禽流感H5N1毒株PB1基因核苷酸序列进行比对和分析，并结合流行病学资料对变异毒株进行进化速度分析。结果将50株毒株PB1基因核苷酸序列按同源性分成两组：1997-1998年毒株为第1组（G1），2003-2006年毒株为第2组（G2）。PB1基因74个氨基酸发生位点置换，占9．78％（74/757）。PB1基因Ks值为26．1×10^-6～39．8×10～Nt/d，Ka值为3．91×10^-6～5．59×10^-6～Nt/d，检验结果显示，基因进化受到负选择性压力。2003-2006年毒株（G2）丢失G757，引起氨基酸结构改变；同时糖基化位点也较1997-1998年毒株减少了1个糖基化位点NES382-384。结论目前PB1基因进化分成两组，自发突变作用影响PB1基因进化；PB1基因与PB2基因的进化途径在时间特征和区域特征方面类似。2003-2006年毒株PB1基因氨基酸结构和糖基化位点均有改变。
- 黄平俞守义柯昌文邹丽容方苓李晖陈秋霞
- 关键词：人禽流感突变进化
- 来源于人外周血单核细胞的树突状细胞感染rAAV-HBsAg后的功能改变被引量：7
- 2003年
- 目的观察人外周血单核细胞来源树突状细胞(DCs)经重组腺相关病毒(rAAV)载体介导乙肝表面抗原(HBsAg)基因感染后的功能改变。方法采用ELISA试剂盒检测感染rAAV-HBsAg后的DCs (rAAV-HBsAg-DC)分泌IL-12水平以及rAAV-HBsAg-DCs与淋巴细胞共孵育后上清中γ-干扰素(IFN-γ)的含量;采用混合白细胞反应(MLR)检测rAAV- HBsAg感染前后DCs刺激同种异体淋巴细胞的增殖能力;用FACSort流式细胞仪检测rAAV-HBsAg-DCs表面分子CD80、CD83、CD86和HLA-DR的变化。结果rAAV-HBsAg感染可促进DCs分泌IL-12(P<0.05),感染后的DCs刺激淋巴细胞分泌IFN-γ的水平显著提高(P<0.01),感染前后的DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力及其特征性表面分子无明显改变。结论rAAV介导HBsAg基因感染的DCs能诱发淋巴细胞朝Th1型细胞分化,且不明显改变DCs的表型和刺激淋巴细胞增值的功能,rAAV载体介导HBsAg基因体外遗传修饰的DCs可以进一步用于乙型肝炎的免疫治疗研究。
- 胡贵方吴小兵俞守义康禹侯云德
- 关键词：人外周血单核细胞树突状细胞重组腺相关病毒乙肝表面抗原
- 基层公共卫生医生对幼虫监测法与诱蚊诱卵器法评价的定性研究被引量：8
- 2016年
- 目的了解基层公共卫生工作者对幼虫监测法与诱蚊诱卵器法的评价,为改进蚊媒监测方法,制定有效的蚊媒监测方案提供建议。方法抽取广州市白云区若干卫生服务中心或镇医院蚊媒监测工作人员进行半结构式访谈,使用ATLAS.ti 6定性分析软件进行编码分析。结果 14个基层单位蚊媒监测项目负责人接受了访谈。幼虫监测法被认为相对耗费人力,城市高楼入户困难、现场调查员态度可以影响数据的质量。等同看待每个幼虫阳性积水以及蚊媒主要孳生于户外的情况也被认为影响幼虫监测法的效力。但幼虫监测法可以了解社区蚊媒孳生情况和宣传登革热防控知识。诱蚊诱卵器被认为相对省时省力,但不适用于人口建筑密集的地区。诱蚊诱卵器的瓶孔和瓶身被认为太小,而且监测结果与具体的布放位置有关。诱蚊诱卵器法反映蚊媒密度的能力在基层存在争议。结论两种蚊媒监测方法在人力成本、可操作性和指标价值上有较大的差异。不同地区需要根据实际需要制定有效、合理的蚊媒监测方案。
- 黄建华石挺丽周景忠陈远源冯细标陈清俞守义
- 关键词：幼虫伊蚊属
