张大 作品数:139 被引量:329 H指数:9 供职机构: 郑州大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省医学科技攻关计划项目 河南省医学科技创新人才工程项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
基于miR-429/IKKβ轴研究高丽参水提物对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭的作用 2023年 目的:研究高丽参水提物对神经母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制。方法:将微小RNA(miRNA)-429抑制剂转染至SH-SY5Y细胞,随机分为miR-429下调组(常规培养)、高丽参+miR-429下调组(50 g/L高丽参水提物培养)。另取SH-SY5Y细胞,分为空白组(常规培养)和高丽参组(50 g/L高丽参水提物培养)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-429相对表达量;CCK-8法、划痕实验、Transwell实验检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力;双荧光素酶实验验证miR-429与IκB激酶β(IKKβ)的靶系;蛋白质印迹法检测各组IKKβ蛋白表达。结果:与空白组对比,高丽参组miR-429表达量增加,24、48、72 h 3个时间点的细胞增殖能力、迁移率降低,侵袭细胞数量减少,IKKβ蛋白表达降低(P<0.05);miR-429下调组的miR-429表达量减少、3个时间点的细胞增殖能力增强,迁移率升高,侵袭细胞数量增加,IKKβ蛋白表达升高(P<0.05)。与高丽参组对比,高丽参+miR-429下调组miR-429表达量减少,24、48、72 h 3个时间点的细胞增殖能力增强,迁移率升高,侵袭细胞数增加,IKKβ蛋白表达升高(P<0.05)。与miR-429下调组对比,高丽参+miR-429下调组miR-429表达量增加,24、48、72 h 3个时间点细胞增殖能力增强,迁移率降低,侵袭细胞数减少,IKKβ蛋白表达量降低(P<0.05)。与转染IKKβ3′-UTR-WT和miR-429 mimic-NC的293T细胞对比,共转染IKKβ3′-UTR-MT与miR-429 mimic的293T细胞荧光素酶活性值升高(P<0.05)。结论:高丽参水提物可抑制神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,可能与调控miR-429进一步靶向下调IKKβ表达有关。 李正伟 刘奎 王瑛 冯珏利 张大关键词:神经母细胞瘤 迁移 机器人手术在儿童胆总管囊肿术后吻合口狭窄再手术中的应用 被引量:1 2022年 目的总结达芬奇机器人手术在小儿胆总管囊肿术后胆肠吻合口狭窄再手术中的应用经验,初步探讨其安全性及疗效。方法收集自2016年1月至2020年12月于郑州大学第一附属医院小儿外科及浙江大学医学院附属儿童医院普外腔镜中心因胆总管囊肿术后胆肠吻合口狭窄接受机器人辅助再手术的7例患儿临床资料,男4例,女3例,月龄31~156个月,7例患儿均有不同程度的肝功能损伤,其中5例患儿表现为腹痛,1例患儿表现为黄疸,1例患儿表现为腹痛伴发热。结果共有7例患儿因胆总管囊肿术后胆肠吻合口狭窄接受机器人辅助下再手术,手术时间(62.4±22.9)min,术中估计出血量(4.6±1.6)ml,术后开始进食时间(3.1±0.4)d,术后拔除腹腔引流管时间(4.6±1.0)d,术后住院时间(6.7±0.8)d。所有患儿均顺利完成手术,肝功能明显改善,术后恢复良好,随访时间3个月,无一例出现严重并发症。结论达芬奇机器人辅助下胆总管囊肿术后胆肠吻合口狭窄再手术安全可靠,操作精准灵活,并具有微创、美容等优势,整体效果良好,值得进一步推广。 王真真 张大 高志刚 熊启星 罗文娟 杨林 贾佳关键词:胆总管囊肿 达芬奇机器人 吻合口狭窄 再手术 儿童胰母细胞瘤6例报道 被引量:3 2017年 目的总结分析儿童胰母细胞瘤(pancreatoblastoma,PBL)治疗期间的各项指标,以提高对PBL的认识。方法回顾性分析近6 a郑州大学第一附属医院PBL患儿的临床资料,并系统检索国内外胰母细胞瘤相关文献。结果郑州大学第一附属医院PBL患儿共6例,男3例,女3例,年龄为2~7岁,中位年龄为5岁。6例均可触及腹部肿块,3例腹痛,其余症状如黄疸、贫血、呕吐各1例;肿瘤最大直径为30~160 mm,平均87 mm。2例位于胰头,3例位于胰体尾部,1例位于胰尾部。术后均经病理证实,其免疫组化结果:6例Syn(+)或(灶+),6例CK(+),5例AAT(+),ki-67(>30%+),3例CD56(+)或(灶+),5例AFP(-),1例AFP(灶+)。术后1例拒绝化疗,其余5例行正规化疗,术后随访0.9~3.1 a,1例失访,4例死亡,1例健在。结论 PBL是一种罕见的恶性肿瘤,胰腺各部位均可生长,肿瘤恶性程度高,复发及死亡率较高。目前治疗方案为尽早完整切除瘤体,并辅以化疗。如切除完整并辅以化疗,部分患者可长期生存。 何巍 王家祥 杨合英 张大 杨林关键词:胰母细胞瘤 儿童 诊疗 免疫组织化学染色 儿童神经母细胞瘤2年内复发进展的危险因素分析 被引量:1 2023年 目的探讨儿童神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)2年内复发进展的危险因素及其对无进展生存(progression-free survival,PFS)的影响。方法选取2020年1~12月郑州大学第一附属医院收治的97例NB患儿进行回顾性研究,根据2年内复发进展与否分为复发进展组(n=33)和非复发进展组(n=64),分析影响儿童NB 2年内复发进展的危险因素,比较不同因素的PFS率。结果N-Myc基因扩增状态、国际神经母细胞瘤分期系统(international neuroblastoma staging system,INSS)NB分期是儿童NB 2年内复发进展的独立危险因素(P<0.05)。N-Myc基因扩增患儿的复发进展风险为非基因扩增患儿的2.676倍(P<0.05),INSS分期Ⅳ期患儿的复发进展风险为INSS分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳs期患儿的4.308倍(P<0.05)。生存分析显示,N-Myc基因扩增患儿中位PFS为18个月,N-Myc基因扩增和未扩增患儿18个月PFS率分别为(46.7±12.9)%、(76.4±5.2)%。INSSⅣ期患儿中位PFS为23个月,Ⅳ期和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳs期患儿23个月PFS率分别为(56.3±7.2)%、(87.8±4.7)%,不同INSS分期NB患儿PFS率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复发进展是影响NB预后的关键因素,N-Myc扩增和INSS分期均为NB复发进展的独立危险因素且PFS率更低。 李秀芩 赵鸽 贾佳 谢潭 杨林 张大关键词:神经母细胞瘤 复发 RNA干扰靶向人端粒酶反转录酶对小儿肝母细胞瘤细胞的生长抑制作用 2017年 目的利用RNA干扰(RNAi)技术降低人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的表达,抑制其活性,观察其对小儿肝母细胞瘤细胞的增殖和凋亡影响。方法构建针对hTERT基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体——pLXSN-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)-U6-siTERT,采用聚合酶链反应(PCR)法扩增hTERT-siRNA、EGFP、U6+27的DNA片段,反转录病毒表达载体pLXSN-EGFP-U6-siTERT的构建及酶切鉴定,制备靶向hTERT的重组反转录病毒;用重组反转录病毒感染HepG2小儿肝母细胞瘤细胞,以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)法检测端粒酶活性变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;噻唑蓝(MTT)法检测肿瘤细胞生长抑制。结果成功制备出hTERT-siRNA反转录病毒表达载体;对照组端粒酶活性为2 143.06±198.69,重组病毒感染作用24、48、72 h后,端粒酶活性分别为1 632.02±116.28、899.38±126.11和321.25±25.25,与感染前比较,分别下降23.84%、58.03%和85.01%,各时间组间差异有统计学意义(P=0.046、0.024和0.008)。流式细胞仪检测结果显示:不同滴度的重组病毒感染实验组与对照组的细胞凋亡率比较差异有统计学意义,并呈浓度依赖关系,随着滴度的增加细胞凋亡率增加。1×105菌落形成单位(CFU)重组病毒感染24 h后,其凋亡率达29.05%。MTT结果显示,感染后24 h细胞凋亡率为29.05%;重组病毒感染后24 h,肿瘤细胞开始明显死亡,随着病毒滴度的提高和作用时间延长,细胞死亡亦逐渐加重,病毒滴度为6.0×105 CFU时,感染24、48、72 h后,MTT结果为0.29±0.14、0.20±0.13和0.18±0.11,3.0×105 CFU时,感染24、48、72 h后,MTT结果为0.32±0.11、0.26±0.12和0.25±0.10,1.0×105 CFU时,感染24、48、72 h后,MTT结果为0.33±0.12、0.26±0.13和0.26±0.12,1.0×104 CFU时,感染24、48、72 h后,MTT结果为0.43±0.14、0.35±0.10和0.33±0.15,1.0×103 CFU时,感染24、48、72 h后,M 夏自强 丁道奎 张宁 杨合英 张大 王家祥关键词:RNA干扰 人端粒酶反转录酶 肝母细胞瘤 脱噬作用 小儿罕见腰臀部肺吸虫病1例 2014年 患儿,女,4岁。因发现右侧腰臀部肿块4个月于2013年5月14日入院。体查:右侧腰臀部外侧包块,约10cm×8cm×7cm大小,皮肤有块状暗褐色色素沉着,边界不清,质软,有部分硬结,无压痛,活动度差。血常规:WBC:12.7×10^9/L,HGB:10^9g/L,嗜酸性粒细胞比37.0%,心电图、胸片未见异常,MRI提示:右侧腰臀部软组织内异常信号(图1),彩超提示:右侧腰臀部皮下软组织内可探及多个片状低回声,形状不规则,较大范围约10mm×6mm,CDFI:内可见分支状血流信号。 冯强 王家祥 杨合英 张大 高鹏飞 赵鸽关键词:腰臀部 肺吸虫病 小儿 嗜酸性粒细胞 软组织内 血流信号 产时胎儿手术治疗畸形胎儿 李延安 杨合英 张大 赵鸽 王家祥先天性皮肤缺损三例报告并文献复习 被引量:3 2016年 目的探讨先天性皮肤缺损的病因、分类、治疗及预后,提高该病的诊治水平。方法回顾性分析我院治疗的3例先天性皮肤缺损患儿发病特点、治疗过程、方法,并复习国内外文献中报道的皮肤缺损305例,总结先天性皮肤缺损的临床特点及诊治经验。结果3例患儿缺损皮肤均由羊皮纸样瘢痕组织愈合,无组织挛缩,无活动障碍。305例患儿中死亡8例;保守治疗234例;手术治疗63例,其中因瘢痕挛缩影响肢体功能者5例。该病致死率、致残率低,预后良好。结论先天性皮肤缺损是一种病因尚不明确的疾病,创面表浅者多可经保守治疗后痊愈,骨外露、重要脏器外露、深度缺损宜适时采用手术治疗,该疾病若能给予正确处理,预后良好,对患儿日常生活影响小。 岳铭 李明辉 杨合英 张大 姚阳迪 王家祥关键词:皮肤缺损 表皮松解 大疱性 瘢痕 小儿毛发性胃石症一例 被引量:4 2018年 患儿女性,5岁10个月,以“左上腹肿物伴腹胀、呕吐4d”为主诉来本院就诊.体查:腹型不对称,左上腹部膨隆,可触及一大小约15cm×10cm肿物,右侧超过腹中线约3cm,质硬,表面光滑,边界尚清,无明显压痛及反跳痛.胃镜检查见食管光滑,血管纹理清晰,蠕动好,贲门开闭自如,齿状线清晰.胃腔内可见巨大黑色异物团,考虑为毛发引起胃石(图1).胃体黏膜皱襞规整,胃窦黏膜红斑样改变. 郭飞 徐彦磊 张大 杨合英 王家祥关键词:胃石症 小儿 胃窦黏膜 腹部膨隆 表面光滑 左上腹 Budd-Chiari综合征合并肝肺综合征1例并文献复习 2024年 目的总结Budd-Chiari综合征合并肝肺综合征(HPS)患儿的临床特征及预后。方法回顾性分析2016年12月郑州大学第一附属医院儿科收治的1例Budd-Chiari综合征合并HPS患儿的临床资料。以“Budd-Chiari综合征”“肝肺综合征”“Budd-Chiari syndrome”“hepatopulmonary syndrome”为关键词分别在中国知网、万方数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed数据库进行检索(建库至2023年7月),结合本例资料,总结Budd-Chiari综合征合并HPS患儿(<18岁)的临床特征、诊疗经过及预后。结果患儿,男,13岁,因“发绀、活动后胸闷6个月,皮肤黄染1周”入院。入院体格检查可见全身皮肤黏膜、巩膜轻度黄染,口唇、眼周、四肢末端发绀。辅助检查可见肝功能及动脉血气分析异常,总胆红素53μmol/L,直接胆红素14μmol/L,间接胆红素39μmol/L;氧分压54 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),二氧化碳分压31 mmHg,肺泡动脉血氧梯度57 mmHg;腹部CT静脉造影示Budd-Chiari综合征(肝静脉型)、肝硬化、门静脉高压;增强经胸超声心动图造影(CE-TTE)阳性。患儿经对症支持治疗后院外氧疗,随访至2023年3月,低氧血症无明显改善,日常活动受限。文献复习符合检索条件中文文献0篇,英文文献3篇,结合本例患儿共4例,3例首诊原因为呼吸困难、发绀或低氧血症,1例不详。2例因呼吸系统症状就诊诊断Budd-Chiari综合征合并HPS,2例HPS分别发生于Budd-Chiari综合征确诊1.5和8.0年。CE-TTE阳性2例,肺灌注显像阳性2例。2例患儿行肝移植,呼吸功能恢复良好;吸氧治疗1例,低氧血症无改善;等待肝移植1例。结论Budd-Chiari综合征合并HPS早期起病隐匿,临床表现以呼吸困难、发绀多见,早期行CE-TTE明确肺内血管扩张可减少误诊。肝移植有助于改善预后。 田凤艳 董萧 侯晓寒 袁如月 潘元威 张大关键词:儿童 BUDD-CHIARI综合征 肝肺综合征