张丽杰
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院农产品加工研究所农业部农产品加工与质量控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学农业科学医药卫生更多>>
- 有机磷农药通用抗原的合成及鉴定被引量：3
- 2010年
- 以二乙基膦酸乙酸作为通用结构半抗原,经活化酯法(NHS-DCC)、碳化二亚胺法(EDC)和混合酸酐法(MAH)合成了3种免疫原,用MAH法合成了1种包被原。人工抗原用紫外分光光度法初步鉴定偶联结果并计算克分子浓度分别为2.846×10-3、2.133×10-3、3.574×10-3、2.584×10-3。后用核磁共振P谱进一步确定偶联情况。偶联成功后免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,动物实验检测人工抗原的免疫原性,结果表明:NHS-DCC、EDC和MAH法所制得抗血清的最高滴度分别为24000、10000和32000,均获得免疫应答,以半抗原为研究对象建立的间接竞争ELISA法对半抗原的最低检测质量浓度IC10值为1.115×10-5g/L,抑制中浓度IC50值为7.176×10-4g/L。
- 张丽杰周映霞王磊潘家荣
- 关键词：有机磷农药酶联免疫吸附试验
- 杀菌剂抑霉唑人工抗原的合成和鉴定被引量：2
- 2010年
- 以咪唑乙醇为原料,与6-溴己酸乙酯发生取代反应后再经水解反应合成抑霉唑半抗原(6-[1-(2,4-二氯苯基)-2-(1-咪唑基)乙氧基]己酸)。产物经薄层层析和1H-NMR鉴定后,采用活化酯法分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联得到免疫原(HIA-BSA)和包被原(HIA-OVA),紫外光谱分析法计算得其偶联比分别为13:1和7:1,初步说明人工抗原合成成功。通过免疫动物获得效价为1:64000的抗体,采用间接竞争ELISA法测定抗体的IC50值为1.76μg/mL,从而进一步证明人工抗原合成成功,所得的抗体可用于ELISA检测试剂盒的研制。
- 周映霞张丽杰潘家荣焦必宁王磊
- 关键词：抑霉唑半抗原人工抗原
- 乙氧基磷酸酯类有机磷农药单克隆抗体的制备与鉴定被引量：4
- 2010年
- 制备针对乙氧基磷酸酯类有机磷农药的单克隆抗体,以此为基础建立该类农药的快速免疫筛选检测方法.以二乙基磷酸乙酸为通用结构半抗原,分别使之与牛血清白蛋白和鸡卵清蛋白共价偶联,合成免疫原和包被原并对其进行结构鉴定.偶联成功后的免疫原用于免疫Balb/c小鼠.将免疫成功小鼠的脾细胞与小鼠SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选能稳定分泌抗乙氧基磷酸酯类有机磷农药单克隆抗体的杂交瘤细胞株.获得的小鼠腹水用辛酸-硫酸铵法纯化,所得纯化抗体以琼脂双扩散法鉴定其免疫球蛋白类型,间接竞争ELISA方法测定其对半抗原的灵敏度、特异性和亲和性.结果表明,该抗体分泌IgG1亚类的单克隆抗体,且与二乙基磷酸乙酸的亲和性较高(1.4×107L/mol),所得抗体对毒死蜱、对硫磷、丙溴磷、氧化乐果、除线磷、二嗪农、溴硫磷、辛硫磷、喹硫磷、三唑磷等农药有特异性反应.该检测技术可用于上述农药的快速定性或定量检测.
- 张丽杰潘家荣
- 关键词：单克隆抗体广谱性有机磷农药酶联免疫
- 生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定二乙基磷酸酯类有机磷农药被引量：12
- 2011年
- 基于生物素和亲和素之间发生特异性反应,形成多酶系统,建立了二乙基磷酸酯类有机磷农药的竞争酶联免疫分析技术和生物素-亲和素放大酶联免疫分析技术。在优化条件下,二乙基磷酸酯类有机磷农药浓度在1×10-1～1×104mg/L范围内与抑制率线性关系良好,其线性回归方程为y=0.1168x+0.6259(r=0.9889),半抑制浓度和检出限分别为34 mg/L和0.0248 mg/L,与间接竞争酶联免疫分析方法相比,在交叉反应率基本不变的情况下,检测灵敏度和检测范围都得到显著提高,实际样品的加标回收率为70.1%～117.8%,基本满足痕量物质分析的要求。
- 王磊张丽杰吕伟韩世鹤张付凯潘家荣
- 关键词：农药
