张丹丹
- 作品数：10 被引量：18H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：北京市科技计划项目北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 内毒素诱导正常人单核细胞活化中CD69、TNF-α、IL-6的表达变化及意义被引量：1
- 2013年
- 目的探讨内毒素诱导正常人单核细胞活化时抗原分子CD69、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的变化及意义。方法采集10例健康人外周静脉血20 ml,经乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝。通过Ficoll-Hypaque联合Percoll分离液分离纯化单核细胞后体外培养,设未干预组为对照,实验组予内毒素分别刺激30 min、1、2、4 h后收集细胞与上清液。通过流式细胞术检测单核细胞表面CD69的阳性细胞百分比,Luminex方法检测上清液中TNF-α、IL-6的浓度。结果分离的单核细胞纯度达95.5%。单核细胞表面CD69的表达率在内毒素刺激2、4 h分别为(25.1±1.8)%、(41.7±1.4)%,明显高于对照组[(22.1±1.4)%,P均﹤0.05]。上清液中TNF-α在内毒素刺激2、4 h分别为(453.654 6±163.616 8)pg/ml、(1 633.787 8±528.839 9)pg/ml,明显高于对照组[(0.119 1±0.213 5)pg/ml,P均﹤0.05]。内毒素刺激4 h时IL-6为(1464.451 0±488.378 3)pg/ml,明显高于对照组[(0.053 9±0.095 5)pg/ml,P﹤0.05]。结论CD69、TNF-α、IL-6的表达上调与内毒素诱导单核细胞的活化密切相关。
- 李珊珊李璐张丹丹冯霞丁美陈煜
- 关键词：内毒素单核细胞CD69白细胞介素-6
- 5-脂氧合酶在急性肝衰竭大鼠中的表达变化及意义被引量：3
- 2013年
- 目的探讨5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LO)及其产物白三烯B4(Leukotriene B4,LTB4)在急性肝衰竭大鼠模型中的变化及其在肝脏炎性损伤中的作用。方法30只成年雄性Wistar品系大鼠分为实验对照组(6只)和肝衰竭模型组(24只)。通过腹腔注射D-氨基半乳糖及脂多糖建立大鼠急性肝衰竭模型,动态观察4、8、16、24 h各时间点大鼠肝组织的病理变化以及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(T-BIL)的变化。荧光定量PCR测量肝组织5-LO mRNA变化,免疫组化法及蛋白质印迹法检测5-LO蛋白表达,ELISA试剂盒检测肝组织LTB4含量。结果联合腹腔注射D-氨基半乳糖/脂多糖后,血清中ALT、AST及T-BIL逐渐升高,24 h时达高峰,ALT(3992.6±290.7)U/L、AST(10 114.7±1 014.2)U/L,T-BIL(32.9±2.0)μmmol/L,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。24 h病理改变表现为肝细胞坏死、肝索解离,小叶及汇管区大量炎性细胞浸润。5-LO mRNA表达于造模后升高,8 h表达最高;与对照组比较,肝衰竭4、8、16 h的表达差异有统计学意义(P<0.01)。造模后肝组织5-LO表达呈持续升高,24 h表达最高。LTB4含量与5-LO变化趋势相同,于造模后24 h浓度最高,为(355.4±22.2)pg/ml。结论5-LO及其产物LTB4参与急性肝衰竭的病理生理过程,并发挥重要的作用。
- 李璐马春华李珊珊张丹丹丁美陈煜
- 关键词：急性肝衰竭5-脂氧合酶白三烯B4
- 糖原合成酶激酶-3β对巨噬细胞系RAW264.7活化的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)对巨噬细胞系RAW264.7活化的影响。方法将生长状态良好的RAW264.7细胞分为3组:实验对照组、脂多糖(LPS)组和GSK-3β特异抑制剂SB216763干预组,在12 h、24 h进行指标检测。采用Western印迹法检测细胞GSK-3β、p-GSK-3βser9蛋白的表达,ELISA试剂盒法检测细胞上清IL-10、TNF-α的变化,RT-PCR检测细胞中5-LO mRNA变化,免疫荧光法检测ED1表达,电镜下观察RAW264.7细胞形态变化。结果12 h和24 h LPS组与对照组相比,p-GSK-3βser9表达减少,GSK-3β表达不变,活性升高;TNF-α、IL-10及5-LO mRNA表达增多(P<0.05);ED1表达绿色荧光明显增多;透射电镜观察LPS组巨噬细胞形态不规则,吞噬坏死物质细胞变多。12 h和24 h SB216763干预组与LPS组进行比较,p-GSK-3βser9表达明显增多,GSK-3β表达不变,活性降低;TNF-α及5-LO mRNA表达减少(P<0.05),IL-10表达明显增多(P<0.05);ED1绿色荧光表达减少;透射电镜观察细胞形态较规则。结论 GSK-3β对于RAW264.7细胞活化发挥重要的作用。
- 张丹丹李珊珊李璐李俊峰郑素军段钟平陈煜
- 关键词：糖原合成酶激酶3Β
- sCD163和铁蛋白在HBV相关慢加急性肝功能衰竭中的表达及其临床意义被引量：3
- 2014年
- 目的研究HBV相关慢加急性肝功能衰竭(HBV-ACLF)患者血浆中可溶性CD163(sCD163)和铁蛋白水平,分析其与患者病情、预后的关系。方法选择HBV-ACLF患者30例、乙型肝炎肝硬化25例、慢性乙型肝炎18例以及健康对照15例,采用ELISA方法检测血浆中sCD163和铁蛋白水平。结果 HBV-ACLF组血浆中sCD163和铁蛋白水平均明显高于肝硬化组、慢性乙型肝炎组及健康对照组[sCD163:(123±43)比(76±33)、(58±19)、(35±15)ng/mL,均P<0.05;铁蛋白:(2 714±1 896)比(505±722)、(833±801)、(106±58)ng/mL,均P<0.05]。肝衰竭发展到晚期时sCD163和铁蛋白水平均较早、中期明显增高[sCD163:(162±44)比(104±40)、(108±24)ng/mL,均P<0.05);铁蛋白:(4 154±2 122)比(1 746±1 047)、(2 416±1 713)ng/mL,均P<0.05]。HBV-ACLF死亡组中sCD163和铁蛋白水平均高于存活组[sCD163:(140±42)比(101±36)mg/mL,(t=-2.719,P=0.01);铁蛋白:(3 568±2 007)比(1 598±957)ng/mL,(t=-3.547,P=0.001)]。经受试者工作特征曲线(ROC)分析,sCD163、铁蛋白评估HBV-ACLF患者3个月内死亡所对应的曲线下面积(AUC)分别为0.803、0.844。结论 sCD163和铁蛋白可作为HBV-ACLF病情严重程度及预后评估的重要参考指标。
- 李珊珊李璐张丹丹仵永枫丁美段钟平陈煜
- 关键词：铁蛋白
- 急性肝功能衰竭大鼠肝组织内巨噬细胞形态变化特点
- 2013年
- 目的探讨肝组织内巨噬细胞在急性肝功能衰竭(acute liver fnilure.ALF)大鼠模型中的形态变化及其在肝脏炎性损伤中的意义。方法 Wistar大鼠分为两组;实验对照组6只,模型组24只。通过腹腔注射D-氨基半乳糖(DGalN)及脂多赭(LPS)建立大鼠急性肝功能衰竭模型,动态观察各时间点(4、8、16、24 h)大鼠肝组织的病理变化以及ALT、AST,TBil和TNF-α的含量变化,通过透射电镜观察各时间点大鼠肝组织中巨噬细胞的形态变化。结果 D-GalN/LPS联合注射成功诱导大鼠急性肝功能衰竭模型,表现为建立模型后ALT、AST及TBil水乎显著上升,于造模后24 h表达最商(P<0.01),病理变化符合急性肝功能衰竭的病理特点。以细胞体积增大、形状不规则、胞质伸出较多微绒毛和伪足者为激活的巨噬细胞判断标准。建立模型后,在同样放大倍数下,肝组织中巨嘴细胞形态发生变化,以8 h模型组的大鼠肝组织中巨噬细胞的形态变化最为明显,随着炎性反应的进一步发展,其形态变化反面减弱。与此同时,TNF-α建立模型后其含量逐渐升高,以8 h模型组的大鼠血清内含量最高,此后逐渐下降。结论肝组织中巨噬细胞参与急性肝功能衰竭的瘸理生理过程,其在急性肝功能衰竭的初始阶段及促进炎性反应发展中发挥了重要的作用。
- 李璐高原李珊珊张丹丹马春华许永枫陈煜
- 关键词：急性肝功能衰竭巨噬细胞透射电镜肿瘤坏死因子-Α
- 5-脂氧合酶在急性肝衰竭大鼠中的表达变化及意义
- 李璐马春华张丹丹丁美段钟平陈煜
- HBV相关慢加急性肝功能衰竭患者外周血单核细胞CD163和CD69的表达及其与病情、预后的关系被引量：8
- 2014年
- 目的了解HBV相关慢加急性肝功能衰竭(HBV-ACLF)患者外周血单核细胞CD163和CD69的表达情况,分析其与患者病情、预后的关系。方法应用流式细胞术对HBV-ACLF患者30例、乙型肝炎肝硬化25例、慢性乙型肝炎18例、健康对照15例外周血单核细胞CD163与CD69的表达情况进行检测,结合肝功能衰竭患者病情及预后进行分析。结果 HBV-ACLF组外周血单核细胞表面CD163的表达率低于肝硬化组、慢性乙型肝炎组及健康对照组(P<0.05),随肝功能衰竭早、中、晚期病情进展,CD163的表达率逐渐降低(F=10.921,P=0.000),死亡组CD163的表达率明显低于存活组(P<0.05);HBV-ACLF组CD69的表达率高于肝硬化组、慢性乙型肝炎组及健康对照组(P<0.05),随肝功能衰竭早、中、晚期病情进展,CD69的表达率逐渐增高(F=11.504,P=0.000),死亡组CD69的表达率明显高于存活组(P<0.05);CD163和CD69评估HBV-ACLF患者3个月内死亡情况所对应的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.726、0.735。结论 HBV-ACLF患者外周血单核细胞CD163和CD69的表达与病情严重程度及预后密切相关。
- 李珊珊马春华李璐张丹丹仵永枫陈煜冯霞丁美段钟平
- 关键词：乙型肝炎病毒CD69
- 丝裂原活化蛋白激酶通路在GSK-3β对于巨噬细胞活化过程中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路在GSK-3β对于巨噬细胞活化过程中可能的作用。方法生长状态良好的RAW264.7细胞分为3组:对照组、脂多糖(LPS)组及GSK-3抑制剂SB216763干预组。在两个时间点(12 h、24 h),采用Western blotting法检测GSK-3β、p-GSK-3βser9、MAPK(c-jun氨基端激酶、细胞外信号调节激酶、p-38)表达情况,Elisa法检测细胞上清中TNF-α的变化,RT-PCR检测细胞中5-LO mRNA变化,电镜下观察RAW264.7细胞形态变化。结果 LPS组与对照组比较,p-GSK-3βser9/GSK-3β比值降低,活性升高;MAPK 3条信号通路:磷酸化的c-jun氨基端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38表达增多;TNF-α和5-LO mRNA表达增多(P<0.05);电镜下观察RAW264.7细胞出现形态改变,可见大量坏死物质。SB216763组与LPS组比较,p-GSK-3βser9/GSK-3β比值升高,活性降低;磷酸化JNK、ERK、p38表达出现不同时间不同程度改变;TNF-α和5-LO mRNA表达降低(P<0.05);电镜下观察RAW264.7细胞形态较规则,仅见少量坏死物质。结论 MAPK通路在GSK-3β对于RAW264.7细胞活化过程中发挥一定的作用。
- 张丹丹李珊珊李璐丁美段钟平陈煜
- 关键词：糖原合成酶激酶-3Β丝裂原活化蛋白激酶
- 糖原合成酶激酶-3在炎症反应中的研究被引量：2
- 2013年
- 糖原合成酶激酶-3(GSK3)是一种丝/苏氨酸磷酸激酶,在原发性和继发性免疫系统均发挥重要作用,其增加促进炎症因子(IL-1β、IL-2、IL-6等)的产生,抑制GSK3活性后可减轻炎症反应同时保护机体免受免疫介导的病理损伤。GSK3活化与阿尔茨海默病、糖尿病、急性肾衰竭等疾病发生、发展有一定的相关性。本文就GSK3在不同免疫系统及其参与相关疾病的研究进展作一综述。
- 张丹丹李璐陈煜
- 关键词：免疫反应炎症因子
