孙运良
- 作品数：34 被引量：198H指数：8
- 供职机构：赣榆区人民医院更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金连云港市卫生局科研项目江苏省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生哲学宗教更多>>
- 靶向重组腺病毒介导Hsp70基因表达对大鼠胰腺癌移植瘤的抑制作用被引量：2
- 2012年
- 目的:观察重组腺病毒Ad5-pCEA-Hsp70介导的Hsp70基因表达对大鼠胰腺癌移植瘤生长的影响,并分析其相关机制.方法:建立大鼠胰腺癌皮下移植瘤模型,随机分为3组,分别给予Ad5-pCEA-Hsp70、Ad5-control以及PBS进行治疗.对比不同时间点3组肿瘤大小,评价抑瘤效果:通过ELISA的方法检测外周血Hsp70蛋白含量及细胞因子INF-γ、TNF-α、IL-6的含量;取动物的移植瘤常规HE染色,观察淋巴细胞浸润情况;分离动物脾脏单核细胞,通过流式细胞仪检测CD83+细胞比例,并观察脾淋巴细胞对体外培养的大鼠胰腺癌细胞的杀伤能力.结果:治疗后第4、6、8周,Ad5-pCEA-Hsp70组肿瘤体积分别与Ad5-control组及PBS组相比(724.4mm3±81.6mm3vs901.3mm3±103.9mm3、987.5mm3±126.0mm3;681.3mm3±64.9mm3vs1270.6mm3±131.6mm3、1398.5mm3±193.0mm3;648.0mm3±65.9mm3vs1487.0mm3±243.0mm3、1660.0mm3±167.0mm3),差异均具有统计学意义(均P<0.01).Ad5-pCEA-Hsp70组动物外周血Hsp70蛋白及细胞因子INF-γ、TNF-α、IL-6的含量均显著高于Ad5-control组和PBS组(均P<0.01).HE染色发现,与Ad5-control组和PBS组相比,Ad5-pCEA-Hsp70组有较多的淋巴细胞浸润.经流式细胞仪检测,Ad5-pCEA-Hsp70组脾单核细胞中CD83+细胞比例显著高于Ad5-control组及PBS组(10.8±1.3%vs5.1±0.6%、4.8±0.6%;均P<0.01).脾淋巴细胞介导的CTL实验中,当效靶细胞比为1:1时,3组动物之间并无统计学差异(P>0.05),但随着效靶细胞比的增加,Ad5-pCEA-Hsp70组对胰腺癌细胞的杀伤能力较Ad5-control组和PBS组明显增加(P<0.05,P<0.01).结论:重组腺病毒Ad5-pCEA-Hsp70介导的Hsp70基因表达对大鼠胰腺癌动物模型的肿瘤生长具有抑制作用,其机制与促进树突状细胞(dendritic cells,DC)的成熟、诱导细胞因子INF-γ、TNF-α、IL-6的分泌、促进淋巴细胞浸润有关.
- 孙运良徐灿苏长青马建霞高军满晓华李兆申
- 关键词：热休克蛋白70重组腺病毒胰腺癌
- 环氧化酶2促肿瘤血管生成研究进展被引量：4
- 2003年
- 近年来研究表明,环氧化酶(cyclooxygenase,COX)亚型COX鄄2表达在肿瘤的发生、发展、分化和转移中起重要作用,特别是参与肿瘤血管生成。全文主要综述了COX鄄2促进肿瘤血管生成的机制。
- 孙运良孙为豪
- 关键词：环氧化酶2肿瘤血管生成
- 环氧合酶-2抑制剂对盐酸诱导大鼠胃粘膜损伤后上皮细胞增殖和愈合的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 :探讨特异性和非特异性环氧合酶 - 2 (COX - 2 )抑制剂 ,对盐酸诱导胃粘膜损伤后上皮细胞增殖和损伤愈合的影响。方法 :大鼠胃内给予 0 6mol/LHCl 1mL后 ,胃内给予NS - 398或吲哚美辛 ,Westernblot和免疫组化法分析盐酸灌胃前、后胃粘膜COX - 2表达 ,免疫组化检测增殖细胞核抗原 (PCNA)评价上皮细胞的增殖状态 ,小格图纸法计算胃损伤指数 (LI)。结果 :盐酸灌胃后 ,COX - 2在胃粘膜表层上皮细胞和腺颈部成体干细胞高表达。盐酸灌胃后 2 4h ,NS - 3984 0mg/kg组及吲哚美辛组PCNA标记指数 (PCNA -LI)分别为 (2 2 72± 4 33) %和(2 1 98± 5 18) % ,明显低于对照组 (34 4 6± 3 6 1) % (P <0 0 5 ) ;NS - 3984mg/kg组和 4 0mg/kg组LI分别为 (1 2 8±0 5 8) %和 (1 16± 0 5 6 ) % ,显著高于对照组 (0 5 8± 0 2 4 ) % (P <0 0 5 )。结论 :COX - 2抑制剂抑制胃粘膜上皮细胞增殖 ,延迟大鼠胃粘膜损伤的愈合 ,提示COX - 2表达在胃粘膜再生过程中起重要作用。
- 孙为豪欧希龙俞谦曹大中陈洪俞婷邵华朱峰孙运良
- 关键词：胃粘膜损伤盐酸环氧合酶-2抑制剂上皮细胞细胞增殖损伤愈合
- 环氧化酶-2在胃癌组织中的表达及其与血管生成的关系被引量：24
- 2005年
- 目的探讨环氧化酶-2(COX-2)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法应用免疫组织化学(免疫组化)法检测96例胃癌手术切除标本中COX-2的表达,采用抗CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析COX-2表达与MVD和胃癌主要临床病理特征的相关性。结果胃癌组织COX-2阳性表达率和MVD分别为80.2%和32.5±8.3,显著高于正常胃黏膜的13.3%和13.1±2.4;P<0.01。临床TNM分期中Ⅲ、Ⅳ期胃癌标本COX-2表达率与MVD为91.4%和34.9±8.7,显著高于Ⅰ和Ⅱ期胃癌标本(P<0.01)。伴有淋巴结转移的胃癌组织中COX-2表达率和MVD分别为87.9%和35.0±8.5,与无淋巴结转移病例相比,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman等级相关分析表明,COX-2表达与MVD呈显著正相关(γ=0.311,P<0.01)。结论COX-2表达在胃癌的肿瘤血管生成中起重要作用,COX-2及其诱导的血管生成与胃癌的浸润和转移密切相关。
- 孙为豪孙运良方仁年欧希龙薛绮萍邵耘许海尘程蕴琳
- 关键词：胃癌组织手术切除标本无淋巴结转移胃癌标本阳性表达率
- TLR4蛋白在胃癌组织中的表达及其与微血管密度的关系被引量：1
- 2012年
- 目的探讨Toll样受体4(TLR4)蛋白在胃癌发生、发展中的作用及机制。方法采用免疫组化法检测52份胃癌组织及30份正常胃组织标本中TLR4蛋白表达;采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析TLR4蛋白表达、MVD与胃癌主要临床病理参数的关系。结果胃癌组织TLR4蛋白阳性率和MVD分别为76.9%和32.5±8.3,均显著高于正常胃黏膜(P<0.01);有淋巴结转移者TLR4阳性率显著高于无淋巴结转移者(P<0.05);TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期者TLR4蛋白表达率明显高于Ⅰ+Ⅱ期者(P<0.05)。MVD与肿瘤TNM分期、淋巴结转移及分化程度密切相关(P<0.01,P<0.05)。Spearman等级相关分析表明,TLR4蛋白表达与MVD呈显著正相关(P<0.01)。结论 TLR4蛋白表达与胃癌的发生发展密切相关,其机制可能为促进肿瘤血管生成。
- 孙运良满晓华吴红玉朱明
- 关键词：TOLL样受体4胃肿瘤胃癌CD34微血管密度
- 雷公藤内酯醇对人胰腺癌PANC-1细胞的抑制作用及其可能的机制被引量：2
- 2013年
- 目的:通过体内外实验观察雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)对人胰腺癌PANC-1细胞生长和凋亡的抑制作用,并分析其对Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)的表达和肿瘤血管生成的影响。方法:以0、20、40、80 ng/ml的TPL作用于PANC-1细胞,MTT法和流式细胞术分别检测TPL对PANC-1细胞增殖和凋亡的影响,Western blotting检测TPL作用后PANC-1细胞中TLR4和VEGF的表达。建立PANC-1细胞裸鼠荷瘤模型并随机分为TPL组、PBS组,测量移植瘤的体积变化,治疗35 d后摘取瘤块,免疫组织化学方法检测移植瘤组织内TLR4、VEGF和CD31的表达,并计算微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:与0 ng/ml组相比,PANC-1细胞经20、40和80 ng/ml的TPL处理24 h后,细胞凋亡率均显著升高[(4.7±1.0)%、(10.5±2.0)%、(21.1±4.2)%vs(2.6±0.5)%,P<0.05或P<0.01];48 h后,细胞增殖率均显著下降[(68.0±5.3)%、(59.6±5.0)%、(51.6±4.2)%vs(99.6±5.2)%,均P<0.01],并较相同浓度TPL处理24 h时显著降低(P<0.05或P<0.01)。80 ng/ml TPL组处理后PANC-1细胞中TLR4蛋白[(20.2±4.7)%vs(57.5±6.3)%,P<0.01]和VEGF蛋白[(35.8±4.0)%vs(92.1±8.3)%,P<0.01]的表达量显著低于未处理组。TPL治疗组第34天的裸鼠移植瘤体积显著小于PBS对照组[(510.9±79.8)vs(1 220.6±127.2)mm3,P<0.01];TPL治疗组移植瘤组织内的TLR4、VEGF表达均显著低于PBS组[(3.2±0.6)vs(6.7±1.1),(3.7±0.7)vs(7.1±1.2);均P<0.01),其MVD也显著低于PBS组[(12.2±4.0)vs(22.7±5.6),P<0.01]。结论:TPL能够抑制人胰腺癌PANC-1细胞及其裸鼠移植瘤的生长,并促进PANC-1细胞凋亡,其机制可能与TPL抑制TLR4、VEGF表达及肿瘤血管生成有关。
- 孙运良马建霞吴红玉满晓华李淑德
- 关键词：雷公藤内酯醇胰腺癌TOLL样受体4血管内皮细胞生长因子血管生成
- 伊立替康联合卡培他滨治疗晚期结直肠癌的临床观察被引量：1
- 2009年
- 目的观察伊立替康联合卡培他滨治疗晚期结直肠癌的疗效和安全性。方法回顾性分析62例复发或转移性结直肠癌患者，接受伊立替康联合卡培他滨治疗：伊立替康125mg／m^2 d1、d8、d15静脉滴注90min；卡培他滨（希罗达）2500mg/m^2，分早晚2次，第1—14天，每28天重复。治疗至少2个周期，按照WHO标准进行疗效和不良反应评价，并观察至疾病进展时间及总生存期。结果62例患者中，可评价疗效的有59例。其中一线治疗28例，RR42．8％，DCR71．4％，TTP 8．6个月，MST18．8个月；二线治疗31例，RR32．3％，DCR61．2％，TTP 7．2个月，MST13．2个月。不良反应主要为恶心与呕吐、迟发性腹泻、粒细胞减少，多为Ⅰ-Ⅱ度，且一线和二线治疗的不良反应无统计学差异。结论伊立替康联合卡培他滨治疗晚期结直肠癌疗效高，不良反应可耐受，值得扩大样本进一步观察。
- 张明奎蒋华孙运良
- 关键词：伊立替康卡培他滨晚期结直肠癌
- 雷公藤内酯醇对胰腺癌PANC1细胞Toll样受体4／核因子-κB信号通路的影响被引量：7
- 2013年
- 目的探讨雷公藤内酯醇（TP）对人胰腺癌PANC1细胞株侵袭能力的影响及其与Toll样受体4／核因子．KB（TLR4／NF-KB）信号通路的关系。方法将PANC1细胞分为亲本细胞组、TP组、脂多糖（LPS）组和TP＋LPS组。TP组培养液中加入50ng／ml的TP，LPS组加入μg／ml的LPS，TP＋LPS组先用50ng／ml的TP处理2h，再加入μg／ml的LPS。各组细胞均常规培养24h。采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测TLR4、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA和蛋白的表达，双荧光素酶报告基因系统检测NF-KB活性，Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果亲本组、LPS组、TP组、TP＋LPS组的TLR4mRNA表达量分别为0．41±0．06、0．46±0．10、0．20±0．04和0．25±0．06，TLR4蛋白表达量分别为0．55±0．06、0．60±0．03、0．18±0．04和0．13±0．00；NF—KB活性分别为13．0±3．0、31．6±4．3、7．3±1．5和10．8±2．1；穿膜细胞数分别为（56．8±8．6）、（104．5±12．8）、（32．0±5．7）和（46．8±7．0）个；MMP-9mRNA表达量分别为0．36±0．05、0．58±0．07、0．18±0．03和0．30±0．004，MMP-9蛋白表达量分别为0．31±0．04、0．53±0．08、0．11±0．02和0．15±0．00。LPS组TLR4mRNA和蛋白表达量与亲本组差异无统计学意义，但NF-KB活性、穿膜细胞数、MMP-9mRNA和蛋白表达量显著高于亲本组（t值分别为8．654、7．593、6．655、4．982，P值均〈0．01）。rrP组TLR4mRNA和蛋白表达量、NF·KB活性、穿膜细胞数、MMP-9mRNA和蛋白表达量均显著低于亲本组（t值分别为-7．609、-9．948、-4．176、-5．915、-8．179、-9．948，P值均〈0．01）。TP＋LPS组TLR4mRNA和蛋白表达量、NF-KB活性、穿膜细胞数、MMP-9mRNA和蛋白表达量均显著低于LPS组（t值分别为-4．437、-14．805、-10．506、-9．700、-9．055、-8．932，P值均〈0．01）。结论TP具有抑制胰腺癌细胞侵袭的作用，其机制与抑制TLR4／NF-KB信号通�
- 马建霞孙运良王一倩童依丽于晓峰
- 关键词：胰腺肿瘤TOLL样受体4雷公藤内酯基质金属蛋白酶类
- CEA启动子驱动下表达Hsp70基因的重组腺病毒的构建及鉴定被引量：3
- 2011年
- 目的构建癌胚抗原（CEA）启动子驱动下靶向表达热休克蛋白70（HspTO）基因的重组腺病毒。方法通过RT-PCR和PCR的方法分别扩增人Hsp70基因和CEA启动子，构建穿梭质粒pDC316-pCEA—Hsp70。将所得的穿梭质粒与腺病毒骨架质粒共转染293细胞获得重组腺病毒Ad5-pCEA—Hsp70。通过梯度离心纯化病毒，采用半数细胞培养物感染量测定病毒滴度。分别以重组的腺病毒感染CEA阳性的人胰腺癌BxPC3细胞和CEA阴性的SWl990细胞，通过RT-PCR和ELISA法检测Hsp70 mRNA和蛋白的表达。结果酶切和测序证实Hsp70基因和CEA启动子成功插入PDC316质粒。与骨架质粒共转染293细胞获得的病毒经PCR扩增证实重组腺病毒构建成功。最终获得的病毒颗粒数达2．2×10^11vp／ml，滴度为1．5X10^10PFU／ml。重组腺病毒感染CEA阳性表达的BxPC3细胞后，可显著增加Hsp70 mRNA和蛋白的表达，而感染CEA阴性的SWl990细胞，Hsp70mRNA和蛋白的表达无变化。结论成功构建了能够在CEA阳性细胞中靶向表达Hsp70基因的重组腺病毒Ad5-pCEAHsp70，为进一步研究奠定了基础。
- 孙运良徐灿苏长青高军金晶吴红玉李兆申
- 关键词：热休克蛋白质70腺病毒
- COX-2、MMP-9表达与胃癌血管生成及生物学行为关系的研究
- 目的:探讨COX-2、MMP-9表达与MVD在胃癌发生、发展中的作用以及COX-2、MMP-9表达与MVD的关系,揭示COX-2、MMP-9促进胃癌发生、发展的可能机制.方法:收集96例临床和病理资料完整的手术切除胃癌标...
- 孙运良
- 关键词：胃癌环氧化酶-2血管生成生物学行为
- 文献传递
