陈斌
- 作品数：9 被引量：12H指数：2
- 供职机构：同济大学医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人热休克蛋白73的基因重组、表达和纯化被引量：1
- 2000年
- 目的 用基因重组的方法表达人热休克蛋白７３，并纯化表达产物，用于进一步分析。方法 用人 热休克类似蛋白ＨＳＰ７３基因构建原核细胞表达载体ｐＥＴＨＳＰ７３，在大肠杆菌ＢＬ２１中用半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导表达，用 电泳法和 ＡＴＰ亲和层析法提取 ＨＳＰ７３。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、用３ ａ３抗体 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ作 ＥＣＬ检测。结果人 ＨＳＰ７３基因 构建的载体ｐＥＴＨＳＰ７３能很好地在大肠杆菌表达出相对分子质量为７３ ０００的蛋白。两种蛋白提取方法均能有效提纯表达的蛋白，该蛋白具有人ＨＳＰ７３抗原特性。所得蛋白质氨基酸测定和Ｎ端测序的结果与有关的报道一致。结 论 ＨＳＰ７３基因重组、表达和纯化方法的建立，为研究ＨＳＰ７３的结构、功能与临床应用提供了必要条件。
- 杨虎川杨耀琴陈斌陶惠红朴文姬
- 关键词：基因重组基因表达提纯
- 吐温80合并温热诱导BGC-823细胞的抑制作用及对凋亡相关因子的影响被引量：2
- 2002年
- 目的 观察膜活化剂吐温 80合并温热作用对人胃癌细胞BGC 82 3的抑制效应及其对Hsp70、bcl 2、bax表达的影响。方法 通过MTT法 ,测定 0 .1%及 0 .15 %吐温 80与 4 2℃温热合并作用对BGC 82 3细胞的抑制作用 ;运用免疫细胞化学染色 ,观察 0 .1%吐温 80与 4 2℃温热合并作用后 (0h、8h、16h、2 4h)BGC 82 3细胞Hsp70、bcl 2、bax表达的改变。结果 吐温 80合并 4 2℃10 0min温热作用对BGC 82 3细胞具有明显的抑制效应 ,温热后保留吐温 80继续作用将进一步增强抑制效应 ,合并抑制效应与吐温 80浓度相关 (P <0 .0 1)。合并作用能明显抑制BGC 82 3细胞热作用后的Hsp70表达 ,但bcl 2、bax的表达均增加 ,且bax的表达强于bcl 2 ,并全部分布于胞浆。结论 吐温 80与 4 2℃温热有明显协同抑制肿瘤细胞生长效应 ,对Hsp70和bcl 2、bax表达及分布的影响提示其抑制机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。
- 陶惠红杨虎川陈斌杨耀琴
- 关键词：吐温80HSP70BAX温热疗法
- 吐温80对BGC-823细胞抑制作用及凋亡相关因子的影响被引量：3
- 2001年
- 目的 观察吐温 80对人胃癌细胞 BGC- 82 3的抑制作用及凋亡相关因子的影响。方法 采用 MTT法 ,测定不同浓度 (0 .15 %、0 .1%、0 .0 5 % )的吐温 80及其不同作用时间 (2小时、18小时、34小时 )条件下 ,对 BGC- 82 3细胞的抑制作用 ;运用免疫组化 ABC法染色 ,观察 0 .1%吐温 80 %作用 (2小时、18小时、34小时 )后 BGC- 82 3细胞Hsp70、bcl- 2、bax的表达。结果 (1)吐温 80的抑制效应随作用浓度及时间增加而明显增高 (P<0 .0 1) ;(2 )吐温 80作用不同时间对细胞 Hsp70表达及分布影响不明显 ,而 bcl- 2、bax随作用时间延长有表达增加趋势 ,作用 34小时 ,bcl- 2主要分布于胞浆 ,bax主要分布于胞核。结论 吐温 80对肿瘤细胞具有较强抑制作用 ,吐温 80对 bcl- 2、bax表达及分布影响可能与其抑制作用有关。
- 陈斌陶惠红杨耀琴杨虎川
- 关键词：吐温80BAX蛋白BGC-823细胞
- 吐温80对BGC-823细胞抑制作用及凋亡相关因子的影响
- 本文通过MTT及免疫组化的方法,观察吐温80对人胃癌细胞BGC-823的杀伤抑制作用及对HSP70、Bel-2、Bax表达的影响,从而进一步探讨时温的作用机制.
- 陈斌陶惠红杨耀琴杨虎川
- 关键词：胃癌细胞吐温80
- 文献传递
- 基因重组人HSP73抗体的制备及对肿瘤细胞在温热作用后HSP70表达的检测
- 2001年
- 目的 用基因工程方法表达、提纯人热休克类似蛋白 73(HSP73) ,制备抗体 ,检测吐温 80协同 41℃温热对肿瘤细胞HSP70表达的影响。方法 用人HSP73基因构建原核细胞表达载体 pETHSP73,在大肠杆菌BL2 1中用半乳糖苷 (IPTG)诱导表达 ,经电泳法和ATP亲和层析法提取HSP73并作检测。用提纯蛋白免疫新西兰兔 ,制备抗HSP70多克隆抗体 ,测定其活性 ,用此抗体作免疫组化法观察 41℃温热和吐温 80协同时BGC 82 3胃癌细胞及B16黑色素瘤细胞的热休克蛋白 70 (HSP70 )表达情况。结果 人基因重组构建的pETHSP73能很好地在大肠杆菌中表达出分子量为73kD的蛋白。两种提纯方法均能有效提取表达蛋白 ,用 3a3单抗作Westrnblot检测证明该蛋白具有人HSP70的抗原活性 ,所得蛋白氨基酸测定和N端测序的结果与有关报道一致。以此蛋白制成的抗体活性可达 1∶80 0 0以上。并可检测出吐温 80合并温热有明显抑制肿瘤细胞SHP70表达的作用。结论 2 .1kb的基因片段构建的高表达载体能很好表达人HSP73活性蛋白。该蛋白免疫新西兰兔所得多克隆抗体具有很高抗人和鼠HSP70活性。用该抗体免疫组化法检测表明吐温 80协同 41℃温热可明显抑制肿瘤细胞HSP70的表达和耐热性的产生。
- 杨虎川杨耀琴陈斌陶惠红
- 关键词：基因重组抗体肿瘤细胞耐热性
- 汶川地震脊髓损伤患者康复需求研究现状被引量：2
- 2017年
- 地震是我国公共卫生和安全所面临的重大问题,2008年汶川地震造成了大量的人员伤亡。脊髓损伤是地震最严重的伤害类型之一,在汶川地震中的发生率达2%5%[1]。脊髓损伤会造成严重的肢体残疾,且并发症较多、康复过程复杂、康复周期较长,患者的康复需求是医师长期关注的重点[2]。脊髓损伤的康复主要包括医疗、心理、婚姻与性、教育与职业康复[3]。医疗康复主要指患者病情稳定后的康复训练、促进功能改善和并发症防治。
- 陈斌陈斌姜成华
- 关键词：脊髓损伤患者伤员持续性康复需求汶川地震
- 温热对BGC-823细胞抑制作用及Hsp70、Bcl-2、Bax表达的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 观测温热对人胃癌细胞BGC 82 3的抑制作用及Hsp70、Bcl 2、Bax表达的影响。 方法 通过MTT法 ,测定 41℃ 10 0min、42℃ 10 0min对BGC 82 3细胞的抑制作用 ;运用免疫组化ABC法染色 ,观察 42℃ 10 0min作用后 0、8、16、32h ,BGC 82 3细胞Hsp70、Bcl 2、Bax的表达。结果 (1)BGC 82 3细胞在 41℃及 42℃温热作用后 ,均受到一定抑制 ;42℃温热比 41℃对细胞的抑制作用较强且持久 (P <0 .0 1) ;(2 ) 4 2℃温热作用后细胞Hsp70、Bcl 2表达均明显增加 ,16h表达达到高峰 ,且主要分布于核区 ;Bax表达也增加 ,但低于Bcl 2。结论 温热对BGC 82 3细胞有一定抑制作用 ,Hsp70、Bcl 2表达增加可能与细胞自身修复或自身保护有关 ,Bcl
- 陈斌陶惠红杨耀琴杨虎川
- 关键词：HSP70BCL-2BAXBGC-823细胞
- 基因重组人HSP73抗体的制备及对肿瘤细胞在温热作用后HSP70表达的检测
- 本文用人HSP73基因构建原核细胞表达载体并在大肠杆菌内诱导表达,提纯出人的HSP73.用此蛋白免疫兔,得到高活性的抗HSP70抗体并用于检测吐温80'协同41°C温热作用后肿瘤细胞HSP70表达的改变,探讨吐温80协同...
- 杨虎川杨耀琴陈斌陶惠红
- 关键词：肿瘤细胞基因重组蛋白表达
- 文献传递
- 吐温80合并温热诱导BGC-823胃癌细胞凋亡及对Hsp70,Bcl-2和Bax表达的影响被引量：4
- 2002年
- 目的 观察膜活化剂吐温 80合并温热作用对BGC 82 3人胃癌细胞生长、凋亡及对Hsp70、Bcl 2、Bax表达的影响。方法 应用MTT法、荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳 ,测定 0 1%吐温 80与 4 2℃ 10 0min合并作用对BGC 82 3细胞的抑制效应和诱导细胞凋亡的影响 ;应用免疫细胞化学染色 ,观察合并作用后不同时间 (0h、 8h、 16h、 2 4h)BGC 82 3细胞Hsp70、Bcl 2、Bax的表达改变。结果 ①吐温 80合并 4 2℃温热作用对细胞具有明显的抑制效应 (P <0 0 0 1)。②合并作用后 2 4h ,可见大量肿瘤细胞凋亡。③合并作用可明显抑制BGC 82 3细胞Hsp70的表达 ;Bcl 2、Bax的表达均增加 ,且Bax的表达强于Bcl 2 ,并全部分布在胞浆。结论 吐温 80合并 4 2℃温热可通过诱导细胞凋亡来抑制肿瘤细胞生长 ,其对细胞Hsp70表达的抑制和对Bcl 2。
- 杨耀琴陈斌陶惠红杨虎川
- 关键词：HSP70BCL-2BAX
