胡海红
- 作品数：20 被引量：17H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种抗体荧光探针及其制备方法和在可视化细胞检测中的应用
- 本发明公开了一种抗体荧光探针及制备方法和在可视化细胞检测中的应用，所述抗体荧光探针是将抗体标记物与单克隆抗体偶联，再将偶联单克隆抗体后的抗体标记物与自淬灭荧光基团偶联制得；所述抗体标记物是与单克隆抗体氨基末端特异性偶联的...
- 钱玲慧王文超章颖庄鑫磊王昊婷胡海红
- 文献传递
- 转运体稳定表达的验证方法及其研究进展
- 2012年
- 目的介绍验证转运体稳定表达的方法和技术,为转运体细胞模型的应用提供依据。方法对近年来研究转运体在细胞模型中稳定表达的相关文献进行综述。结果实时定量PCR及Western blot是分别验证转运体转录水平和蛋白表达的经典方法。结论与荧光检测技术相结合的验证方法在转录水平、蛋白表达与功能活性等三方面都显示出广阔的应用前景。
- 沈琦胡海红曾苏
- 关键词：转运体转录水平蛋白表达
- siRNA与紫杉醇组合物在制备治疗肝细胞癌药物中的应用
- 本发明提供siRNA与紫杉醇组合物在制备治疗肝细胞癌药物中的应用，所述组合物由siCYP1B1和siP‑gp与紫杉醇按1:1:1的比例组合而成。本发明在低氧下肝细胞癌中CYP1B1和P‑gp蛋白表达增加以及低氧下肝细胞癌...
- 曾苏方琰艳郑小丽胡海红
- 人细胞色素P450 CYP2C19与CYPOR、CYPb5共表达模型的构建及其抑制剂筛选被引量：2
- 2012年
- 目的:获得人细胞色素P450 2C19(CYP2C19)蛋白重组酶,用特征性底物表征重组酶活性,并将该重组酶用于天然产物CYP2C19抑制剂的筛选。方法:构建含人CYP2C19基因的重组杆状病毒穿梭质粒,使用昆虫细胞-杆状病毒表达系统共表达人CYP2C19、细胞色素氧化还原酶(CYPOR)和细胞色素b5(CYPb5);用蛋白印迹分析(Western Blot)鉴定重组酶的表达;以奥美拉唑为底物进行代谢孵育,HPLC分析鉴定酶的活性;并使用该重组蛋白对70种天然产物进行抑制能力的筛选。结果:Western Blot结果显示重组人CYP2C19蛋白在Sf 9细胞中成功表达,该重组酶代谢经典底物奥美拉唑的酶动力学参数分别为:米氏常数Km为(4.99±0.22)μmol.L-1,最大反应速率Vmax为(0.2539±0.0024)μmol.min-1.mg-1蛋白,表观清除率CLint值为0.0509 L.min-1.mg-1蛋白。对70种天然产物的抑制筛选实验显示白藜芦醇、大黄素、异土木香内酯、莪术醇、薄荷脑、鬼臼毒素、补骨脂素、五味子甲素、五味子乙素、新狼毒素B等对人CYP2C19有比较明显的抑制能力。结论:利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统,可获得代谢活性良好的重组人CYP2C19蛋白,该重组酶可进一步用于其他底物的Ⅰ相代谢研究以及各种抑制剂的筛选。
- 孔丽敏胡海红曾苏
- 关键词：人细胞色素
- 高效液相色谱-质谱法测定大鼠尿、粪便中狼毒色原酮的含量及其排泄研究被引量：1
- 2014年
- 目的建立大鼠尿、粪便中狼毒色原酮含量测定的方法，并考察其排泄特征。方法采用高效液相色谱．质谱联用法测定给药后大鼠尿、粪中狼毒色原酮的含量，分别计算狼毒色原酮在尿、粪便中的累积排泄量及排泄率。色谱条件：XbridgeTM C18（2．1min×50mm，3．5μm，Waters柱，流动相为0．1％甲酸甲醇-0．1％甲酸水溶液梯度洗脱，流速0．4mL·min～，电喷雾型质谱检测器，采用MRM方式同时进行测定；用于定量分析的离子反应分别为：狼毒色原酮（m／z543．3→198．9），瑞舒伐他汀（m／z481．9～＋258．3）。结果在8～6400ng·mL“狼毒色原酮在尿液和粪便复溶液中线性良好（r2≥0．9995，n=5），最低检测限为4ng·mL-1。低、中、高浓度的质控样品日内、日间精密度和准确度均符合要求。灌胃给予狼毒色原酮后48h的尿、粪便中累积排泄率分别为（1．84±0．290）％、（41．5±6．917）％。结论所建立的分析方法准确、灵敏、快速，符合生物样品分析要求，适用于粪便、尿液中狼毒色原酮的分析。排泄实验结果表明，粪便是狼毒色原酮的最主要的排泄方式。
- 楼燕郑金琪胡海红王临润张幸国胡云珍曾苏
- 关键词：粪便尿液高效液相色谱-质谱法
- 共表达摄取转运体和药物代谢酶模型的构建及应用
- 本发明提供一种共表达摄取转运体和药物代谢酶模型的构建，以人基因<I>OAT1</I> cDNA为模板，扩增获得人<I>OAT1</I>基因片段，连接到载体pcDNA3.1(+)，获得质粒pcDNA3.1(+)/OAT1，...
- 曾苏赵垒胡海红余露山蒋惠娣周惠徐思云
- 文献传递
- CYP3A4和MDR1双转染细胞模型的构建和应用
- 目的构建共转染CYP3A4和MDR1细胞模型。方法先将P-gp的基因MDR1克隆到pcDNA3.1（+）（invitrogen）上,转染MDCK细胞（ATCC）,经过G418筛选出单克隆细胞,得到MDCK-MDR1细胞株...
- 胡海红余露山徐思云周慧刘瑶何新蒋惠娣曾苏
- CYP2B6体外诱导活性评价模型的建立及其在中药活性成分筛选的应用被引量：5
- 2013年
- 建立基于hPXR/CAR的CYP2B6药物诱导剂的体外高通量筛选模型,用于快速筛选通过hPXR/CAR途径对CYP2B6具有潜在诱导能力的中药活性成分,并帮助阐述其诱导机制。本论文采用双荧光素酶报告基因系统,即将插入有CYP2B6远端和近端启动子序列的报告基因质粒pGL3-CYP2B6-Luc与hPXR/CAR3表达质粒瞬时共转染HepG2细胞,用含有空白溶剂或药物的培养基培养48 h后裂解测定双荧光素酶活性。运用PXR和CAR的阳性诱导剂利福平和CITCO验证报告基因模型构建成功后,考察5种常见中药提取物和1种中药单体通过hPXR/CAR途径对CYP2B6的诱导作用。本研究构建的基于hCAR的CYP2B6报告基因模型中用hCAR3代替hCARwt是国内首次报道,并且配合基于hPXR的报告基因模型可以系统且有效地用于CYP2B6药物诱导剂的体外筛选并阐释其诱导机制。
- 徐聪徐思云胡海红余露山曾苏
- 关键词：CYP2B6CAR报告基因中药
- 共转染药物代谢酶和转运体的细胞模型的构建及应用
- 本发明提供一种共转染CYP3A4和MDR1细胞模型的构建，是先将P-gp的基因克隆到pcDNA3.1(+)上，转染MDCK细胞，经过G418筛选出单克隆细胞，得到MDCK-MDR1细胞株，然后将CYP3A4克隆到带有潮霉...
- 曾苏刘瑶胡海红余露山蒋惠娣周慧徐思云王鹭何新
- 文献传递
- 银杏酸(17:1)在大鼠原代肝细胞、HepG2和MDCK细胞中的毒性研究
- 目的研究银杏酸GA(17:1)及其Ⅰ相代谢对原代肝细胞、HepG2毒性的影响,以及P-gp对MDCK细胞毒性的影响。方法 (1)应用大鼠肝微粒体体外孵育的方法,选用特异性的酶化学抑制剂,α-萘黄酮(CYP1A1/2),磺...
- 李力郭常川胡海红姜妍徐思云曾苏
- 关键词：大鼠原代肝细胞MDCK细胞
