徐思云
- 作品数：14 被引量：14H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑制CYP3A4的三种靶向编码区shRNA表达载体的构建和应用
- 目的 比较单一和混合质粒表达型短发夹RNA (shRNA)对CHL-3A4瞬转基因细胞、HEK293-3A4瞬转基因细胞和HepG2细胞的细胞色素P450 3A4 (CYP3A4)基因表达的抑制作用。方法 构建3种shR...
- 徐思云肖永胜李力余露山蒋惠娣喻爱民曾苏
- 关键词：报告基因蛋白质印迹
- 银杏酸(17∶1)在大鼠原代肝细胞、HepG2和MDCK细胞中的毒性研究
- 目的 研究银杏酸GA (17∶1)及其Ⅰ相代谢对原代肝细胞、HepG2毒性的影响,以及P-gp对MDCK细胞毒性的影响.方法 (1)应用大鼠肝微粒体体外孵育的方法,选用特异性的酶化学抑制剂,α-萘黄酮(CYP1A1/2)...
- 李力郭常川胡海红姜妍徐思云曾苏
- 关键词：大鼠原代肝细胞MDCK细胞
- 共表达摄取转运体和药物代谢酶模型的构建及应用
- 本发明提供一种共表达摄取转运体和药物代谢酶模型的构建，以人基因<I>OAT1</I> cDNA为模板，扩增获得人<I>OAT1</I>基因片段，连接到载体pcDNA3.1(+)，获得质粒pcDNA3.1(+)/OAT1，...
- 曾苏赵垒胡海红余露山蒋惠娣周惠徐思云
- 文献传递
- CYP2B6体外诱导活性评价模型的建立及其在中药活性成分筛选的应用被引量：5
- 2013年
- 建立基于hPXR/CAR的CYP2B6药物诱导剂的体外高通量筛选模型,用于快速筛选通过hPXR/CAR途径对CYP2B6具有潜在诱导能力的中药活性成分,并帮助阐述其诱导机制。本论文采用双荧光素酶报告基因系统,即将插入有CYP2B6远端和近端启动子序列的报告基因质粒pGL3-CYP2B6-Luc与hPXR/CAR3表达质粒瞬时共转染HepG2细胞,用含有空白溶剂或药物的培养基培养48 h后裂解测定双荧光素酶活性。运用PXR和CAR的阳性诱导剂利福平和CITCO验证报告基因模型构建成功后,考察5种常见中药提取物和1种中药单体通过hPXR/CAR途径对CYP2B6的诱导作用。本研究构建的基于hCAR的CYP2B6报告基因模型中用hCAR3代替hCARwt是国内首次报道,并且配合基于hPXR的报告基因模型可以系统且有效地用于CYP2B6药物诱导剂的体外筛选并阐释其诱导机制。
- 徐聪徐思云胡海红余露山曾苏
- 关键词：CYP2B6CAR报告基因中药
- 抑制CYP3A4的三种靶向编码区shRNA表达载体的构建和应用
- 目的比较单一和混合质粒表达型短发夹RNA（shRNA）对CHL-3A4瞬转基因细胞、HEK293-3A4瞬转基因细胞和HepG2细胞的细胞色素P450 3A4（CYP3A4）基因表达的抑制作用。方法构建3种shRNA真核...
- 徐思云肖永胜李力余露山蒋惠娣喻爱民曾苏
- 关键词：报告基因蛋白质印迹
- 共转染药物代谢酶和转运体的细胞模型的构建及应用
- 本发明提供一种共转染CYP3A4和MDR1细胞模型的构建，是先将P-gp的基因克隆到pcDNA3.1(+)上，转染MDCK细胞，经过G418筛选出单克隆细胞，得到MDCK-MDR1细胞株，然后将CYP3A4克隆到带有潮霉...
- 曾苏刘瑶胡海红余露山蒋惠娣周慧徐思云王鹭何新
- 文献传递
- 银杏酸(17:1)在大鼠原代肝细胞、HepG2和MDCK细胞中的毒性研究
- 目的研究银杏酸GA(17:1)及其Ⅰ相代谢对原代肝细胞、HepG2毒性的影响,以及P-gp对MDCK细胞毒性的影响。方法 (1)应用大鼠肝微粒体体外孵育的方法,选用特异性的酶化学抑制剂,α-萘黄酮(CYP1A1/2),磺...
- 李力郭常川胡海红姜妍徐思云曾苏
- 关键词：大鼠原代肝细胞MDCK细胞
- 应用shRNA慢病毒技术抑制MCF7/MX100细胞中乳腺癌耐药蛋白的表达和功能(英文)
- 2014年
- 乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在肿瘤细胞中的过表达可能导致肿瘤耐药性。RNA干扰是一种选择性抑制目的基因表达的实用技术。本研究旨在应用RNA干扰技术调控BCRP的表达和功能。首先在过表达BCRP的耐药细胞MCF-7/MX100中,评价了三种靶向于BCRP的si RNAs(si-BCRP1,si-BCRP2和si-BCRP3)。研究发现si-BCRP2和si-BCRP3对BCRP的m RNA和蛋白的抑制率分别超过90%和70%,进而导致MCF-7/MX100细胞中米托蒽醌的积聚显著上升。进一步的研究将生成si-BCRP2和si-BCRP3的shR NA序列克隆至慢病毒表达载体pT RIPZ中,并采用慢病毒介导的转基因体系建立了稳定表达si RNA的MCF-7/MX100细胞。在该细胞系中,si-BCRP2和si-BCRP3对BCRP的mR NA的抑制率分别达到72%和56%,对其蛋白的抑制率分别为70%和53%。在进一步的研究中,该细胞系被用于中药活性成分的筛选,以评价BCRP的底物和抑制剂。结果显示,BCRP低表达的MCF-7/MX100细胞可能作为良好的细胞模型被用于临床前研究。
- 余彩虹徐思云喻爱明刘彦卿胡海红李丽萍余露山周慧蒋惠娣曾苏
- 关键词：乳腺癌耐药蛋白耐药逆转米托蒽醌
- 共表达摄取转运体和药物代谢酶模型的构建及应用
- 本发明提供一种共表达摄取转运体和药物代谢酶模型的构建，以人基因OAT1cDNA为模板，扩增获得人OAT1基因片段，连接到载体pcDNA3.1(+)，获得质粒pcDNA3.1(+)/OAT1，转染MDCK细胞，经筛选得到高...
- 曾苏赵垒胡海红余露山蒋惠娣周惠徐思云
- 文献传递
- RNAi抑制乳腺癌MCF-7/MX100细胞乳腺癌耐药蛋白BCRP基因研究
- 目的 利用RNAi技术干扰耐药乳腺癌细胞MCF-7/MX 100的ABCG2基因的表达.方法 设计并化学合成3条不同的siRNA,设立阴性、阳性对照组及siRNA干扰组进行实验.Real-time RT-PCR检测不同组...
- 余彩虹徐思云喻爱民曾苏
