程海
- 作品数：54 被引量：97H指数：4
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- 发文基金：国家自然科学基金徐州市科技计划项目江苏省高校自然科学研究项目更多>>
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- 骨髓移植小鼠急性移植物抗宿主病早期弥漫性肺损伤中TH17细胞的作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨骨髓移植小鼠急性移植物抗宿主病（aGVHD）早期肺损伤中TH17细胞的作用和机理。方法Balb／c小鼠为受鼠，经致死量全身照射（TBI）后，输注C57BL／6小鼠来源的骨髓细胞和脾细胞，建立aGVHD模型。实验分为3组：TBI组小鼠仅接受TBI，异基因骨髓移植（BMT）组小鼠TBI后输注供者骨髓细胞和脾细胞，常山酮（HF）组小鼠TBI后输注骨髓细胞和脾细胞，并注射HF。动态观察小鼠GVHD的表现，并进行肺组织病理学、T淋巴细胞亚群及相关细胞因子的检测。结果移植后小鼠出现典型GVHD的表现。移植后6d时HF组肺组织病理学评分为（2．00±0．35）分，BMT组为（0．67±0．07）分。BMT组TH1细胞占CD4＋T淋巴细胞的比例为（5．53±0．11）％，TH17细胞占（1．04±0．34）％；HF组TH1细胞占（8．61±0．21）％，TH17细胞占（0．49±0．07）%；组间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组均未检测到TH2细胞。移植后6d，BMT组白细胞介素（IL）-17A为（2．81±0．19）pg／ml，γ干扰素（IFN-γ）为（42．97±0．23）pg／ml；HF组IL-17A〈0．8pg／ml，IFN-γ为（9．89±0．51）pg／ml；组间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组均未检测到IL-10。结论在异基因造血干细胞移植早期阻断TH17细胞及其细胞因子的分泌，导致炎症因子分泌失衡，加重肺损伤。
- 程海田静潘彬宋国梁陈伟闫志凌李振宇曾令宇徐开林
- 关键词：造血干细胞移植移植物抗宿主病肺损伤TH17细胞
- 供体Treg细胞对小鼠异基因骨髓移植后GVHD和GVL效应的影响
- 本研究探讨供体CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T ceils,Treg cells)输注对异基因骨髓移植(allo-BMT)后小鼠移植物抗宿主病(GVHD)及移植物抗CVL)效应的影响.建立BALB...
- 曹江陈翀曾令宇李振宇程海潘秀英徐开林
- 关键词：移植物抗宿主病移植物抗白血病效应
- Th17细胞与人类相关疾病的研究进展被引量：1
- 2012年
- Th17细胞是近年发现的-类新型T辅助细胞亚群，由初始T细胞分化而来，分泌IL-17家族细胞因子，包括白细胞介素（IL）-17，IL-17F，IL-17E和IL-21，1L-22，IL-23等。其中以IL-17A最为重要，是Th17的标志性细胞因子。Th17细胞与其相关细胞因子被认为是天然免疫和适应性免疫之间的桥梁，在众多疾病如肿瘤、自身免疫性疾病以及器官、骨髓移植排斥中发挥着重要生物学作用。笔者对Th17细胞在人类相关疾病中的作用及Th17细胞可塑性进行综述。
- 李护君程海徐开林
- 关键词：TH17细胞肿瘤器官移植骨髓移植
- 慢病毒介导的人凝血因子Ⅷ高效真核表达系统的建立
- 2013年
- 目的应用慢病毒载体系统建立高效稳定表达人凝血因子Ⅷ（FⅧ）的细胞株并评估该表达系统的生物安全性。方法构建携带人B区缺失FⅧ（BDDhFⅧ）和绿色荧光蛋白基因的慢病毒转移质粒BDDhFⅧ／pXZ9及对照pXZ9，包装并浓缩慢病毒颗粒。体外感染中国地鼠卵巢（CHO）细胞后72h取培养上清，ELISA法测定FⅧ抗原表达水平，一期促凝法测定FⅧ活性，RT-PCR检测感染后CHO细胞中FN的转录。检测载体复制能力以评估安全性。结果成功构建携带BDDhFⅧ和绿色荧光蛋白基因的慢病毒转移质粒BDDhFⅧ／pXZ9及对照质粒pXZ9，并制备出高滴度的慢病毒。该慢病毒载体可高效感染CHO细胞，感染后72h培养上清中FⅧ抗原浓度为（1724．9±283．7）mU／ml，FⅧ活性为（10．58±1．55）％，RT-PCR检测到BDDhFⅧ基因的转录。感染后的CHO细胞未检测到gag基因的表达，培养上清中也未检测到病毒。结论慢病毒可以介导人FⅧ在CHO细胞内高效表达；该表达系统不产生子代病毒，具有良好的生物安全性。
- 宋旭光曹江曾令宇张焕新程海王缦王力陈翀徐开林
- 关键词：慢病毒属真核表达中国地鼠卵巢细胞
- CD47在初诊正常核型急性髓系白血病患者中的表达及其临床意义被引量：3
- 2017年
- 目的 探讨CD47在初诊正常核型急性髓系白血病（AML）患者中的表达水平及临床意义.方法 选取137例初诊正常核型AML患者及3名健康志愿者.采用流式细胞术及实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）对健康志愿者骨髓造血干细胞（HSC）和造血祖细胞（MPP）及AML患者骨髓单个核细胞（MNC）和白血病干细胞（LSC,Lin-CD34＋CD38-CD90-）的CD47表达水平进行检测;采用基因组分析平台检测患者FMS样酪氨酸激酶3内部串联重复（FLT3-ITD）.采用超高速流式分选系统分选CD34＋CD38-CD47lo和CD34＋CD38-CD47hi细胞.将两组细胞均用MethoCult H4445培养液培养接种于含有琼脂糖的甲基纤维素板,12 d后计数MPP集落形成单位（CFU）,同时将1＆#215;105个CD34＋CD38-CD47lo和CD34＋CD38-CD47hi细胞分别移植到经280 cGy照射的NSG（NOD-SCID IL-2Rγnull）小鼠,8周后处死小鼠,流式细胞术检测人CD45＋细胞比例.结果 CD47的表达在初诊正常核型AML患者中高于健康志愿者,CD47在AML各法、美、英协作组（FAB）亚型中均有表达,相对表达量比较差异无统计学意义（F=0.545,P〉0.05）.137例患者中CD34＋CD38-CD47hi 37例,其中17例（46%）FLT3-ITD阴性,20例（54%）为FLT3-ITD阳性;CD34＋CD38-CD47lo的患者100例,其中63例（63%）FLT3-ITD阴性,37例（37%）FLT3-ITD阳性,CD34＋CD38-CD47hi与CD34＋CD38-CD47lo患者相比较,FLT3-ITD阳性率差异无统计学意义（χ2=3.79,P〉0.05）.将FACS分选的CD34＋CD38-CD47lo和CD34＋CD38-CD47hi接种于含有琼脂糖的甲基纤维素板12 d后,仅CD34＋CD38-CD47lo细胞可以形成CFU.NSG小鼠移植实验显示CD34＋CD38-CD47lo细胞可重建造血,CD34＋CD38-CD47hi植入失败.结论CD34＋CD38-CD47hi富集LSC,可作为AML患者化疗后微小残留病的监测指标.
- 程海曹江陈伟齐昆明闫志凌徐开林
- 关键词：髓样急性CD47集落形成单位测定CD47
- 基因工程Treg细胞对小鼠异基因骨髓移植后GVHD和GVL效应的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨输注慢病毒载体介导的小鼠基因工程调节性T淋巴细胞（Treg细胞）对小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病（GVHD）及移植物抗白血病（GVL）效应的影响.方法 利用慢病毒载体介导,将小鼠叉状头螺旋转录因子（Foxp3）基因转导入Balb/c小鼠的CD4＋CD25-T淋巴细胞,即为基因工程Treg细胞.以Balb/c小鼠为供者.C57BL/6小鼠为受者,进行异基因骨髓移植,移植当天受者接受X线直线加速器全身照射.用随机数字表法将受者分为5组,每组10只.（1）单纯照射组：经受者尾静脉输注RPMI 1640培养液0.2 ml;（2）白血病对照组：经受者尾静脉输注供者骨髓细胞5×106个＋C57BL/6小鼠T淋巴细胞白血病/淋巴瘤细胞株（EL4细胞）500个;（3）移植对照组：经受者尾静脉输注供者骨髓细胞5×106个＋脾细胞5×106个＋EL4细胞500个;（4）工程Treg组：经受者尾静脉输注供者骨髓细胞5×106个＋脾细胞5×106个＋EL4细胞500个＋基因工程Treg细胞5×106个;（5）空载体对照组：经受者尾静脉输注供者骨髓细胞5×106个＋脾细胞5×106个＋EL4细胞500个＋空载体转导的CD4＋CD25-T淋巴细胞5×106个.每天观察受者存活情况;记录GVHD及白血病的发生情况;各组均于小鼠濒死前取其肝脏、小肠、皮肤、脾脏等组织,进行病理学观察;取长期存活（超过60 d）受者的骨髓细胞,检测嵌合情况.结果 单纯照射组、白血病对照组、移植对照组、工程Treg组和空载体对照组小鼠存活时间分别为（10.3±1.5）d、（20.7±1.9）d、（26.0±4.3）d、（49.0±17.7）d和（24.4±4.1）d,工程Treg组小鼠存活时间明显长于其他各组,差异有统计学意义（P＜0.05）.白血病对照组小鼠肝、脾组织病理切片均存在白血病细胞浸润表现,移植对照组及空载体对照组小鼠肝脏、皮肤和小肠病理切片存在GVHD病理改变,而工程Treg组长期存活小鼠各组织病理切片结构基本正常,
- 曹江李莉陈翀曾令宇李振宇程海徐开林
- 关键词：移植物抗宿主病移植物抗白血病
- Th1和Th17细胞之间的平衡关系控制小鼠急性移植物抗宿主病的发病过程
- 目的：采用小鼠急性移植物抗宿主病(GVHD)模型，并通过改变Th1和Th17细胞之间的平衡，以观察Th1/Th17平衡关系在急性GVHD发生中的作用。方法：分别建立小鼠常规GVHD模型和GVHD联合常山酮(HF)干预模型...
- 潘彬程海宋国良张滢陈伟徐开林
- 关键词：急性移植物抗宿主病TH17细胞干预模型流式细胞术
- TH17在小鼠GVHD发病早期中的作用
- 目的:探讨TH17细胞在急性移植物抗宿主病(aGVHD)发病早期的作用及机制.方法:以C57/B6为供鼠,BABL/c为受鼠,全身致死性照射(TBI)后输注供鼠骨髓细胞和脾细胞混合细胞悬液,建立小鼠aGVHD模型.实验分...
- 程海曾令宇潘彬宋国梁田静闫志凌李振宇徐开林
- 关键词：干细胞移植移植物抗宿主病TH17
- E119.人凝血因子Ⅷ体外高效表达体系的建立
- 程海徐开林孙海英鹿群先何徐彭潘秀英
- 文献传递
- 肠道菌群的免疫调节作用对移植物抗宿主病的影响被引量：1
- 2013年
- 移植物抗宿主病（GVHD）是造血干细胞移植（HSCT）后的主要并发症之一。宿主肠道菌群及其产物是影响GVHD发生和发展的关键因素之一。免疫细胞对胞内感染的各种病原微生物及其产物的快速识别依赖于胞浆内的炎性复合体。炎性复合体在感受外界信号后调控促炎因子的活化、成熟，调节全身炎症反应。因此，深入了解肠道菌群失调在GVHD发病中的作用，可为GVHD的防治提供新思路。
- 程海徐开林
- 关键词：异基因造血干细胞移植肠道菌群移植物抗宿主病
