王颖秋
- 作品数:5 被引量:6H指数:2
- 供职机构:上海医药工业研究院更多>>
- 发文基金:上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学医药卫生更多>>
- 利用易错PCR提高头孢菌素C酰化酶的活性
- 本研究采用易错PCR,引入不同浓度的Mg2+和Mn2+,得到的易错PCR产物经克隆、转化后进行初筛,共筛选了400株转化子,有35株活性比未突变的酶活性提高,将35株初筛活性提高的转化子用金属鳌合亲和层析法得到纯酶后再进...
- 王颖秋郑林冲谢丽萍朱宝泉胡又佳
- 关键词:抗生素合成工艺头抱菌素酶活性
- 文献传递
- 顶头孢霉CPC高低产菌株差异蛋白对CPC合成的影响
- 本研究首先进行了顶头孢霉的比较蛋白质组学的研究。并针对鉴定成功的15个蛋白进一步寻找与CPC合成代谢相关的蛋白,选定了丙酮酸氧化酶、谷胱甘肽转移酶、硫酰转移酶、甘油激酶以及噻唑生物合成酶。随后对上述各酶设计了不同引物,进...
- 王颖秋刘艳谢丽萍胡又佳
- 关键词:头孢菌素合成工艺蛋白质组学
- 文献传递
- microRNA——药物开发的新靶点被引量:2
- 2012年
- 微小RNA(micro RNA)是一类长约22nt的非编码单链RNA,由前体经酶作用而得,它是细胞的内源性物质,普遍存在于动植物中,高度保守,在生命体的生长、发育、疾病发生发展的过程中起到了基因调控作用,它与重大疾病,如肿瘤、心脏疾病、神经性疾病等都有着密切的关联,因此成为新药开发的一个重要新靶点,以它为靶点的药物设计和药物研发工作也在不断探索中。本文就其研究的历史、生物合成和作用机制、生物功能、与疾病的关系以及以microRNA为靶点的药物设计的研究情况做一个简单的综述。
- 王颖秋刘艳胡又佳
- 关键词:微小RNA药物开发靶点
- 利用易错PCR提高头孢菌素C酰化酶的活性
- 7-氨基头孢烷酸(7-ACA)是生产许多半合成头孢菌素类抗生素的中间体,目前工业生产主要采用两步酶法转化头孢菌素C(CPC)为7-ACA。本研究在前期工作获得的一个可以直接转化头孢菌素C为7-ACA的头孢菌素C酰化酶的基...
- WANG Ying-qiu王颖秋ZHEN Lin-chong郑林冲XIE Li-ping谢丽萍ZHU Bao-quan朱宝泉HU YOU-jia胡又佳
- 关键词:制药工程聚合酶链反应催化活性7-氨基头孢烷酸
- 基于易错PCR的头孢菌素C酰化酶的定向进化被引量:4
- 2013年
- 以前期工作中获得的一个可以直接转化头孢菌素C(CPC)为7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的CPC酰化酶为基础,采用易错PCR,引入不同浓度的Mg2+和Mn2+,所得易错PCR产物经克隆、转化后进行初筛,共筛选了400株转化子,其中有35株酶活力得到提高。采用金属螯合亲和色谱法分离得到纯酶后再进行复筛,其中一株酶活力显著提高,转化率提高约35%。测序结果显示,该CPC酰化酶突变蛋白的编码序列中有两个碱基发生突变,使得第122位的丙氨酸被替换为缬氨酸。在最适条件下,该酶催化CPC生成7-ACA的转化率为95%。
- 王颖秋郑林冲谢丽萍朱宝泉胡又佳
- 关键词:易错PCR体外进化头孢菌素C7-氨基头孢烷酸